Количество TREC в периферических T-лимфоцитах человека в норме и при иммунопатологических состояниях

• Автор: Блинова, Елена Андреевна
• Шифр специальности: 14.03.09
• Научная степень: Кандидатская
• Год защиты: 2012
• Место защиты: Новосибирск
• Количество страниц: 117 с. : ил.

Оглавление
Список сокращений
Введение
Часть I. Обзор литературы
Глава 1. Процесс образования Т-клеток в тимусе
1.1. Механизм реаранжировки генов Т-клеточного рецептора
1.2. Структурные и функциональные изменения тимуса и периферического
пула Т-лимфоцитов, связанные с возрастом
Глава 2. Т-клеточный гомеостаз
2.1. Механизмы гомеостатического контроля пула наивных
2.1.1. Факторы выживания наивных Т-лимфоцитов
2.1.2. Гомеостатическая пролиферация наивных Т-лимфоцитов
2.2. Механизмы гомеостатического контроля пула Т-клеток памяти
2.2.1. Факторы выживаемости Т-клеток памяти
2.2.2. Гомеостатическая пролиферация Т-клеток памяти
Глава 3. Патологии, связанные с нарушением Т-клеточного гомеостаза
3.1. ВИЧ-инфекция
3.2. Ревматоидный артрит
3.3. Бронхиальная астма
3.4. Атопический дерматит
Часть II. Материалы и методы
Часть III. Результаты собственных исследований
Глава 1. Оптимизация реакции ПЦР в режиме реального времени для
определения количества TREC в популяциях Т-лимфоцитов
Глава 2. Характеристика количества TREC-позитивных клеток в норме
2.1. Взаимосвязь количества TREC и возраста
2.2. Измерение количества TREC в динамике клеточных делений in vitro. 63 Глава 3. Характеристика количества TREC-позитивных клеток при иммунопатологических заболеваниях
3.1. Количество ТЯЕС при ревматоидном артрите
3.2. Количество ТКЕС при бронхиальной астме
3.3. Количество Т1ШС при атопическом дерматите
3.4. Количество ТИЕС в субпопуляциях СПЗ 1-позитивных Т-лимфоцитов в норме и при иммунопатологических заболеваниях
Обсуждение
Заключение
Выводы
Список литературы
Список сокращений
АД - атопический дерматит
БА - бронхиальная астма
ВИЧ - вирус иммунодефицита человека
ГП - гомеостатическая пролиферация
ЗФР - забуференный физиологический раствор
МНК - мононуклеарные клетки
ПИР - полимеразная цепная реакция
РА - ревматоидный артрит
СКК - стволовая кроветворная клетка
СПИД - синдром приобретенного иммунодефицита
ТЭК - тимусные эпителиальные клетки
7-AAD - 7 аминоактиномицин D
CFSE (carboxyfluorescein succinimidyl ester) - сукцинимидильный эфир
карбоксифлюоресценина
DMSO - диметил сульфоксид
DN - двойные негативные
DP - двойные позитивные
EDTA - этилендиаминтетерауксусная кислота FBS - фетальная бычья сыворотка FCS - параметр прямого светорассеяния FL - канал флюоресценции
G-CSF - гранулоцитарный колониестимулирующий фактор
GM-CSF - гранулоцитарно-макрофагальный колониестимулирующий фактор
hTERT - каталитическая субъединица теломеразы человека
IL - интерлейкин
IFN - интерферон
ISF-1 - инсулиноподобный фактор роста

Глава 3. Патологии, связанные с нарушением Т-клеточного гомеостаза
3.1. ВИЧ-инфекция
Т-клеточный иммунитет играет важную роль в иммунологической защите организма от вирусной инфекции, включая защиту от вируса ВИЧ. Различные исследования показали, что количество наивных CD4+CD45RA+ клеток сокращается уже на ранних стадиях ВИЧ-инфекции и у детей, и у взрослых. Отчасти это связано с переходом некоторых из них в пул клеток памяти и со снижением жизнеспособности наивных CD4+ клеток под действием вируса [Chattopadhyay Р.K., 2006]. Как известно, наряду с CD4+ лимфоцитами мишенью вируса могут стать моноциты и дендритные клетки, экспрессирующие на поверхности молекулу CD4 [Mariani S.A., 2011]. Для проникновения внутрь клетки и репликации вирус ВИЧ использует не только CD4, но и рецепторы к хемокинам CCR5 и CXCR4 [Mariani S.A., 2011].
Спектр Т-клеточных нарушений при ВИЧ-инфекции довольно обширен, однако, основным является дисбаланс CD4+ и CD8+ Т- лимфоцитов с преобладанием последних. Было показано, что потеря наивных CD4 клеток предшествует нарушению гомеостаза Т-лимфоцитов и развитию СПИДа [Chattopaghyay Р.К. , 2006]. На поздней стадии количество TREC-позитивных CD4+ лимфоцитов значительно снижается, что можно объяснить как увеличением гибели зрелых Т-клеток, так и низким уровнем тимопоэза по сравнению со здоровыми донорами [Nobile М., 2004]. Изучение экспрессии CD31 на поверхности наивных CD4 лимфоцитов показало, что более низкий уровень его экспрессии наблюдался у тех людей, которые через год прогрессировали до СПИДа [Сао W., 2009]. Длина теломер в популяции наивных CD31+ и CD31' клеток сходна с таковой у неинфицированных доноров, старше пациентов на 20-30 лет [Rickabaugh 2011], что говорит о ГП этих клеток.
ВИЧ-инфекция также связана с существенной потерей наивных CD8+ Т-лимфоцитов и увеличением пула CD8+ клеток памяти [Kalayjian R.C
2003]. Сокращение количества TREC в популяции CD8+ Т-лимфоцитов уже