Изучение активности эластазы нейтрофилов в условиях применения искусственных органов

• Автор: Макарова, Лариса Владимировна
• Шифр специальности: 14.00.41
• Научная степень: Кандидатская
• Год защиты: 1998
• Место защиты: Москва
• Количество страниц: 137 с. : ил.

ОГЛАВЛЕНИЕ
Введение
Глава I. Эластаза нейтрофилов и ее роль в повреждении
тканей в условиях применения искусственных органов (обзор литературы)
1.1. Активация нейтрофильных гранулоцитов при экстракорпоральной гемоциркуляции
1.2. Нейтрофильные гранулоциты и их компоненты
1.3. Эластаза нейтрофилов: физико-химические свойства, биологическая роль, методы определения
и диагностическое значение
1.4. Роль эластазы нейтрофилов в повреждении тканей
при экстракорпоральной гемоциркуляции
1.4.1. Механизм участия эластазы нейтрофилов в нарушениях коагуляции
1.4.2. Механизм участия эластазы нейтрофилов в повреждении соединительной ткани
1.5. Заключение
Глава II. Материал и методы исследования
2.1. Характеристика больных и исследуемого материала
2.2. Полимерные материалы
2.3. Определение активности эластазы нейтрофилов
2.4. Методы выделения белков
2.5. Методы иммунохимического анализа
2.6. Статистическая обработка результатов
Глава III. Изучение активности НЭ в условиях
взаимодействия цельной крови с поверхностью синтетических материалов медицинского
назначения
3.1. Адсорбция НЭ из крови здорового человека на поверхность кремнийорганических резин медицинского назначения

3.2. Сравнительный анализ активности эластазы
нейтрофилов в условиях взаимодействия крови с
поверхностью различных материалов
медицинского назначения
Глава IV. Изучение влияния Перфторана на активность НЭ в
тестах in vitro и при клиническом применении
4.1. Влияние Перфторана (ПФ) на адсорбцию эластазы нейтрофилов из цельной крови на поверхность полимеров
4.2. Изучение влияния Перфторана на активность НЭ
в условиях клинического применения
Глава V. Изучение влияния интраоперационных факторов на активность эластазы нейтрофилов в плазме крови больных при операции в условиях искусственного кровообращения
5.1. Динамика активности нейтрофильной эластазы в зависимости от характера основного заболевания
5.2. Влияние кортикостероидов и инсулина на активность эластазы нейтрофилов в плазме крови кардиохирургических больных
5.3. Динамика активности эластазы нейтрофилов при применении препаратов ингибиторов протеиназ
при операции в условиях ИК
Обсуждение результатов и заключение
Выводы
Практические рекомендации
Список литературы
СПИСОК ПРИНЯТЫХ СОКРАЩЕНИЙ
НЭ (ГЭ)- нейтрофильная (гранулоцитарная) эластаза МПО - миелопероксидаза
ЛЦ - лизоцим
ЛФ - лактоферрин
ЛТаГ - лейкоцитарный термостабильный а-гликопротеид аЩП - а.]-ингибитор протеиназ, оц-антитрипсин а2МГ - а2-макроглобулин
ВМК - высокомолекулярный кининоген
ПМН - полиморфноядерный нейтрофильный лейкоцит ИК - искусственное кровообращение
ЭК (ЭГ) - экстракорпоральное кровообращение /гемоциркуляция ИБС - ишемическая болезнь сердца
ДКМП - дилятационная кардиомиопатия
НК - недостаточность кровообращения
ФК - функциональный класс
ЭКГ - электрокардиограмма
Ме08ис(А1а)2РгоУа1р№ - метоксисукцинил-диаланил-пролил-
валил-паранитроанилид ФСБ - фосфатно-солевой буфер
КР - кремнийорганические резины
ПВХ - поливинилхлорид
ПФ - Перфторан
ГД - Гемодез

Разработано несколько методов определения НЭ, в основе которых лежат два различных подхода:
1. Измерение ферментной активности НЭ;
2. Иммунохимическое определение концентрации НЭ.
Определение концентрации НЭ в плазме крови больных может быть использовано в качестве достаточно чувствительного теста, позволяющего установить выраженность воспалительного процесса и контролировать эффективность медикаментозной терапии.
Биохимические методы основаны на измерении скорости гидролиза специфических субстратов и накоплении продуктов реакции, предпо лагают использование природных субстратов: нативного или модифи цированного эластина (243), фибриногена (250). Нейтрофильная эластаза расщепляет фибриноген с образованием фибринопептида А, по уровню которого в крови измеряют активность фермента (250).
Для определения в биологическом материале суммарной активности эластазоподобных протеиназ, в том числе гранулоцитарной и панкреатической эластазы, используют хромогенные субстраты - А1а-А1а-А1а -р№ (251).
Ряд синтетических хромогенных субстратов, таких как 3(сагЬоху-р гор 10 пу1) - (А1 а) 2Уа1рЫ а, Ь-риго§1Щату1-ЬРго-Б-Уа1-рМа, специфичны именно только для лейкоцитарного фермента, но не трипсина, хи-мотрипсина, панкреатической эластазы (251). Около 90% внеклеточной НЭ связано с а1-ПИ (период выведения комплекса составляет 1 час), 10% НЭ связано с а2-МГ (105); кроме того, НЭ связана с интер-альфа-трипсином плазмы крови (164). Все эти ингибиторы препятствуют определению активности фермента в сыворотке или плазме крови больного. Поэтому особое значение для определения НЭ имеют методы иммунохимического анализа.