Влияние малопоточной мембранной оксигенации крови на иммунологическую реактивность больных перитонитом

• Автор: Кривцова, Ирина Владимировна
• Шифр специальности: 14.00.36
• Научная степень: Кандидатская
• Год защиты: 1999
• Место защиты: Москва
• Количество страниц: 109 с. : ил.

ОГЛАВЛЕНИЕ

Введение
I глава Обзор литературы. Иммунологические нарушения и
экстракорпоральная оксигенация крови при разлитом гнойном перитоните
1.1. Состояние иммунной системы при разлитом гнойном
перитоните
1.2. Мембранные оксигенаторы крови в клинической практике
1.2.1. Краткая история вопроса
1.2.2. Сравнительная характеристика оксигенаторов крови
1.2.3. Перспективы применения малопоточной мембранной
оксигенации крови в клинической практике
II глава Материалы и методы исследования
2.1. Характеристика экспериментального и клинического
материала
2.2. Методика проведения малопоточной мембранной
оксигенации крови
2.3. Определение популяций лимфоцитов и активности
рецепторного аппарата Т-лимфоцитов
2.4. Определение фагоцитарной и энзиматической активности
нейтрофилов
2.5. Определение компонентов комплемента и сывороточных
иммуноглобулинов
2.6. Определение циркулирующих иммунных комплексов
2.7. Определение количества фактора некроза опухоли альфа в
сыворотке крови
2.8. Компьютерная лазерная фазометрия мононуклеарных

клеток периферической крови
Определение кислотно-щелочного и газового состава крови
Собственные исследования. Влияние малопоточной мембранной оксигенации на показатели клеточного и гуморального иммунитета консервированной донорской крови различных сроков хранения
Влияние ММОК на популяции лимфоцитов и активность рецепторного аппарата Т-лимфоцитов Изучение воздействия ММОК на фазометрические параметры мононуклеарных клеток периферической крови Влияние ММОК на фагоцитарную и энзиматическую активность нейтрофилов
Воздействие ММОК на концентрацию сывороточных иммуноглобулинов и компонентов комплемента Влияние ММОК на циркулирующие иммунные комплексы консервированной крови
Изменение кислотно-щелочного и газового состава консервированной крови при малопоточной мембранной оксигенации
Собственные исследования. Иммунокоррегирующая роль изолированной ММОК в комплексе детоксикационных мероприятий при остром разлитом гнойном перитоните
Воздействие малопоточной мембранной оксигенации на клеточное звено иммунитета
Влияние малопоточной мембранной оксигенации на морфометрические показатели мононуклеаров периферической крови
4.3. Влияние малопоточной мембранной оксигенации на внутриклеточную динамику мононуклеаров периферической крови
4.4. Изменение фагоцитарной активности нейтрофилов периферической крови под воздействием малопоточной мембранной оксигенации
4.5. Влияние малопоточной мембранной оксигенации на динамику изменения концентраций ЦИК, компонентов комплемента, иммуноглобулинов и Т№-а
V глава Заключение Выводы
Практические рекомендации Список литературы

разведённой сыворотки вносили в две пробирки. После чего в первую пробирку добавляли 2,25 мл. боратного буфера - она в дальнейшем использовалась в качестве фона. Во вторую и третью - вносили по 1,3 мл. и 1,0 мл. буфера. В них добавляли 8% ПЭГ 6000 до конечной концентрации 3% и 4% соответственно. Приготовленные для исследования пробы встряхивали и оставляли на 2-4 часа при комнатной температуре. Оптическая плотность образцов измерялась и автоматически подсчитывалась на спектрофотометре «СФ-46» при длине волны 450 нм.
Значения светорассеяния в пробах, содержащих ПЭГ, соответствуют концентрации иммунных комплексов. 3% ПЭГ преципитируются высокомолекулярные комплексы, их количество не должно превышать 0,03 у.е.; 4% ПЭГ преципитируются низкомолекулярные комплексы, их количество не должно превышать 0,07 у.е.
2.7. ОПРЕДЕЛЕНИЕ КОЛИЧЕСТВА В СЫВОРОТКЕ КРОВИ ФАКТОРА НЕКРОЗА
ОПУХОЛИ-АЛЬФА
Количественное определение фактора некроза опухоли альфа проводили с использованием коммерческого набора реагентов «РгоСоп ТЫй-ос», выпускаемого ТОО «Протеиновый контур» г. С.-Петербург. Набор позволяет определять количество ФНО в интервале концентраций 20-2000 рс/ш1.
Для измерения уровня фактора некроза опухоли альфа использовался твёрдофазный иммуноферментный метод с применением пероксидазы хрена в качестве индикаторного фермента. Один тип моноклональных антител иммобилизовался на внутренних поверхностях ячеек планшетов для микротитрования. Другой тип моноклональных антител к независимому эпитопу молекулы ФНО находился в виде коньюгата с биотином. Индикаторным компонентом являлся коньюгат пероксидазы хрена со стрептавидином, имеющим очень большое сродство к биотину. После ряда последовательных инкубаций и промывок в ячейки вносили коньюгат пероксидазы со стрептавидином, вновь инкубировали и промывали, вносили