Генотипирование чёрно-пёстрого скота по локусам каппа-казеина, бета-лактоглобулина и BLAD-мутации методами ДНК-технологии

• Автор: Валиуллина, Эльвира Фанилевна
• Шифр специальности: 06.02.07
• Научная степень: Кандидатская
• Год защиты: 2012
• Место защиты: Казань
• Количество страниц: 158 с. : ил.

СОДЕРЖАНИЕ

ВВЕДЕНИЕ
1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ
1.1. Молочная продуктивность, качество и технологические свойства
молока коров чёрно-пёстрой и голштинской пород и их помесей
1.2. Аллельный полиморфизм генов каппа-казеина, бета-лактоглобулина и его влияние на молочную
продуктивность, качество и технологические свойства молока
1.3. Распространенность рецессивных мутаций на примере
BLAD в стадах крупного рогатого скота
2. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ
3. РЕЗУЛЬТАТЫ СОБСТВЕННЫХ ИССЛЕДОВАНИЙ
3.1. Разработка и совершенствование техники выделения
ДНК из крови и спермы
3.2. Совершенствование техники ПЦР-ПДРФ для генотипирования
крупного рогатого скота по гену каппа-казеина
3.3. Разработка способа проведения высокоточной ПЦР для генотипирования крупного рогатого скота
по гену каппа-казеина
3.4. Разработка способа проведения аллель-специфичной ПЦР
для генотипирования крупного рогатого скота по аллелям А и В
гена каппа-казеина
3.5. Совершенствование техники ПЦР-ПДРФ для генотипирования
крупного рогатого скота по гену бета-лактоглобулина
3.6. Совершенствование техники ПЦР-ПДРФ для выявления у
крупного рогатого скота ЖЛП-мутации
3.7. Оценка полиморфизма генов каппа-казеина и
бета-лактоглобулина у крупного рогатого скота
3.7.1. Полиморфизм гена каппа-казеина у быков-производителей
3.7.2. Полиморфизм гена каппа-казеина у коров
3.7.3. Полиморфизм гена бета-лактоглобулина
у быков-производителей
3.7.4. Полиморфизм гена бета-лактоглобулина у коров
3.8. Встречаемость комплексных генотипов каппа-казеина и
бета-лактоглобулина у крупного рогатого скота
3.8.1. Встречаемость разных комбинаций генотипов каппа-казеина и
бета-лактоглобулина у быков-производителей
3.8.2. Встречаемость разных комбинаций генотипов каппа-казеина и
бета-лактоглобулина у коров
3.9. Характеристика быков-производителей с разными генотипами каппа-казеина и бета-лактоглобулина
по молочной продуктивности их матерей

3.9.1. Характеристика быков-производителей с разными генотипами
каппа-казеина по молочной продуктивности их матерей
3.9.2. Характеристика быков-производителей с разными генотипами
бета-лактоглобулина по молочной продуктивности их матерей
3.9.3. Характеристика быков-производителей с разными комбинациями
генотипов каппа-казеина и бета-лактоглобулина по молочной продуктивности их матерей
3.10 Молочная продуктивность коров с разными генотипами
каппа-казеина и бета-лактоглобулина
3.10.1. Молочная продуктивность коров с разными
генотипами каппа-казеина
3.10.2. Молочная продуктивность коров с разными
генотипами бета-лактоглобулина
3.10.3. Молочная продуктивность коров с разными комбинациями
генотипов каппа-казеина и бета-лактоглобулина
3.11. Технологические свойства молока коров с разными
генотипами каппа-казеина и бета-лактоглобулина
3.11.1. Сыропригодность молока коров с разными генотипами
каппа-казеина и бета-лактоглобулина
3.11.1.1. Сыропригодность молока коров с разными генотипами
каппа-казеина
3.11.1.2. Сыропригодность молока коров с разными генотипами
бета-лактоглобулина
3.11.1.3. Сыропригодность молока коров с разными комбинациями
генотипов каппа-казеина и бета-лактоглобулина
3.11.2. Термоустойчивость молока коров с разными генотипами
каппа-казеина и бета-лактоглобулина
3.11.2.1. Термоустойчивость молока коров с разными генотипами
каппа-казеина
3.11.2.2. Термоустойчивость молока коров с разными генотипами
бета-лактоглобулина
3.11.2.3. Термоустойчивость молока коров с разными комбинациями
генотипов каппа-казеина и бета-лактоглобулина
3.12. Диагностика ВЬАБ-мутации у крупного рогатого скота
4. ОБСУЖДЕНИЕ РЕЗУЛЬТАТОВ ИССЛЕДОВАНИЯ
5. ВЫВОДЫ
6. ПРЕДЛОЖЕНИЯ ПРОИЗВОДСТВУ
СПИСОК ИСПОЛЬЗОВАННОЙ ЛИТЕРАТУРЫ
ПРИЛОЖЕНИЯ
СПИСОК СОКРАЩЕНИЙ
ДНК - дезоксирибонуклеиновая кислота.
ДСН - додецилсульфат натрия (SDS - sodium dodecyl sulfate).
ДТТ - дитиотрейтол (DTT - dithiotreitol).
МДЖ - массовая доля жира.
ПДРФ - полиморфизм длины рестрикционных фргаментов (RFLP -Restriction Fragment Length Polymorphism).
ПЦР - полимеразная цепная реакция (PCR - Polymerase Chain Reaction). ЭДТА - этилендиаминтетрауксуая кислота (EDTA - ethylenediaminetetraacetic acid).
ЭКЕ - энергетическая кормовая единица.
А - adenosine (А - аденозин).
BLAD - bovine leukocyte adhesion deficiency (дефицит адгезии лейкоцитов у крупного рогатого скота).
Ьр - base pair (п.о. - пары оснований).
С - cytosine (Ц - цитозин).
CSN3 (к-Сп) - каппа-казеин.
СУМ - complex vertebral malformation (сложное позвоночное уродство). dNTPs - deoxynucleosidtriphosphates (дНТФ - дезоксинуклеозидтрифосфаты). G - guanosine (Г - гуанозин).
Т - thymidine (Т - тимидин).
TULIPS-PCR - Touch-Up and Loop Incorporated PrimerS (разновидность «Touch-Up» ПЦР с инвертированными праймерами). ß-LGB (ß-Lg) - бета-лактоглобулин.

У матерей, матерей матерей и матерей отцов чёрно-пестрых голштинских быков-производителей генотипа каппа-казеина ВВ очевидно уменьшение количества молочного жира - на 74,7, 122,5 и 10,1 кг соответственно в сравнении с генотипом АА. Однако анализ каталога быков-производителей фирмы «Semex» показал, что у дочерей быков с генотипом ВВ индекс EBV выше, чем у коров с генотипом АА, на 469 кг (Р<0,01) по удою и на 19 кг (Р<0,001) по молочному жиру (Т.А. Шендакова, 2010).
Матери быков-производителей симментальской породы с ВВ генотипом каппа-казеина превосходили по содержанию белка матерей быков с генотипами АА и AB на 0,11% (Р<0,05) и 0,10%, соответственно. Аналогичное превосходство было по содержанию жира, по выходу молочного жира и белка (A.B. Баршинова, 2005).
У ярославских чистопородных быков нами установлена положительная взаимосвязь генотипа каппа-казеина с содержанием белка в молоке их матерей. В среднем МДБ за наивысшую лактацию у матерей 3,42%, в том числе у матерей быков с генотипом АА - 3,39% (от 3,01% до 3,80%), AB - 3,41% (от 3,23% до 3,72%), ВВ - 3,49% (от 3,27% до 3,87%). Это свидетельствует о наследуемости сыновьями этого признака от матерей и соответствует теоретической предпосылке обусловленности белковомолочности генотипом каппа-казеина (Н.Г. Ярлыков, 2010).
Результаты исследований P.A. Хаертдинова и др. (2000), Т.М. Ахметова (2009) коров холмогорской породы татарстанского типа по молочной продуктивности и качеству молока показали, что наличие в геноме животных аллеля В гена каппа-казеина оказало положительное влияние на удой и содержание в пробах молока сухих веществ, СОМО, лактозы, а также на содержание казеина и его фракций в молоке (asj-казеин, ü-казеин, к-казеин).
Более высокие удои у голштинизированных коров с генотипом АА по каппа-казеину (5473-6106 кг). Содержание жира и белка в молоке достоверно выше у коров с ü-аллельным вариантом по каппа-казеину: у ярославских чистопородных МДЖ составила от 4,07% до 4,68%, МДБ — от 3,27 до 3,56%;