Доставка любой диссертации в формате PDF и WORD за 499 руб. на e-mail - 20 мин. 800 000 наименований диссертаций и авторефератов. Все авторефераты диссертаций - БЕСПЛАТНО
Мудрикова, Ольга Викторовна
05.18.15
Кандидатская
2012
Кемерово
121 с. : ил.
Стоимость:
499 руб.
СОДЕРЖАНИЕ
СПИСОК СОКРАЩЕНИЙ
ВВЕДЕНИЕ
1 ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ
1.1 Основные положения об идентификации и фальсификации пищевого сырья и готовой продукции
1.2 Физико-химические методы оценки видовой принадлежности плодово-ягодного сырья
1.3 Принцип полимеразной цепной реакции
1.4 Структура генома растений
1.5 Применение методов ДНК-диагностики для видовой идентификации плодово-ягодного сырья
1.6 Заключение по обзору литературы и задачи исследований
2 МЕТОДИКА ВЫПОЛНЕНИЯ РАБОТЫ
2.1 Организация экспериментальных работ
2.2 Объекты исследований
2.3 Основные методы исследований
3 РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЙ И ИХ АНАЛИЗ
3.1 Анализ нуклеотидных последовательностей ДНК Fragaria moschata, Pyrus, Malus, Ribes nigrum, Vaccinium myrtillus, Prunus armeniaca, Prunus persica
3.2 Конструирование универсальных праймеров для амплификации кластера ITS 1 ; 5.8S рРНК; ITS2 Fragaria moschata, Pyrus,
Malus, Ribes nigrum, Vaccinium myrtillus, Prunus armeniaca,
Prunus persica
3.3 Определение оптимальных параметров проведения ПЦР для идентификации Fragaria moschata, Pyrus, Malus, Ribes nigrum,
Vaccinium myrtillus, Prunus armeniaca, Prunus persica
3.3.1 Выделение ДНК
3.3.2 Выбор параметров и оптимизация процессов амплификации
3.3.3 Выбор условий для проведения электрофореза в агарозном геле
3.3.4 Влияние технологической обработки образцов на эффективность ПЦР идентификации плодово-ягодного сырья
3.3.5 Сравнение специфичности ПЦР-идентификации плодово-ягодного сырья и физико-химических методов
4 ПРАКТИЧЕСКАЯ РЕАЛИЗАЦИЯ РЕЗУЛЬТАТОВ РАБОТЫ
4.1 Методика изготовления ПЦР тест-системы и ее описание
4.2 Расчет затрат на проведение исследования с помощью ПЦР-
тест-системы
ВЫВОДЫ
СПИСОК ИСПОЛЬЗОВАННЫХ ИСТОЧНИКОВ
ПРИЛОЖЕНИЕ
СПИСОК СОКРАЩЕНИЙ
ВЭЖХ Высокоэффективная жидкостная хроматография
ДНК Дезоксирибонуклеиновая кислота
ЕС Европейский союз
ИФА Иммуноферментный анализ
КЭ Капиллярный электрофорез
МВИ Методика выполнения испытаний
М Моль/л
мМ Миллимоль/л
нг Нанограмм
ПААГ Полиакриламидный гель
ПЦР Полимеразная цепная реакция
пг Пикограмм
пмоль Пикомоль
ПДРФ Полиморфизм длин рестрикционных фрагментов
ПКО Положительный контрольный образец
п.н. Пар нулеотидов
п.а. Продукт амплификации
РНК Рибонуклеииновая кислота
т.п.о. Тысячи пар олигонуклеотидов
ТЕ-буфер Трис-ЭДТА буфер
Трис-НС1 Трис-(оксиметил)-аминометан гидрохлорид
Тая Ткегтш aquaticus
ЭДТА Этилендиаминтетрацетат натрия
1 ООО п.н. ананас апельсин яблоко малина смородина черника клубника апельсин ежевика СІ С2
Рис. 1.5.2 Амплификационный профиль некоторых ДНК образцов при использовании праймеров для 5 Б рРНК
Таким образом, используя в качестве ДНК-мишени 5S рРНК последовательности и последовательность антоцианидиновой синтазы, можно добиться внутриродового и внутривидового разделения продуктов амплификации плодово-ягодного сырья. Практическое применение данной методики для лабораторного контроля поступающего сырья и качества выпускаемой продукции затрудняется тем, что необходимо создать огромную базу данных, которая позволила бы оперативно идентифицировать получаемые данные. Не вполне понятно и поведение предложенных праймеров в случае анализа ГМО-про ду ктов.
Китайские ученые предложили использовать для идентификации сырья в продуктах питания целый комплекс, содержащий ITS (спейсер внутренней трансляции) регион (некодируемый и переменный) и ген 5.8S рРНК (кодируемый), поскольку они обеспечивают значительно большие различия [80, 115, 120, 121]. Так как рибосональные области согласованы таким образом, что обеспечивают низкий внутривидовой полиморфизм и высокую межвидовую изменчивость [109, 126], значительно больше чем 18S рРНК и 25S рРНК.
Ученые использовали в качестве объектов исследования распространенные пищевые аллергены, всего 20 видов (морской гребешок, кальмар,
Название работы | Автор | Дата защиты |
---|---|---|
Комплексная оценка потребительских свойств мяса молодняка овец разных направлений продуктивности | Колотова, Наталья Андреевна | 2013 |
Разработка и применение методологии моделирования безалкогольных напитков с учетом сенсорных предпочтений потребителей | Заворохина, Наталия Валерьевна | 2014 |
Изучение пищевой ценности и потребительских свойств консервов для детского питания с применением CO2-экстрактов | Ашраф Шабан Таха Бакр | 2008 |