Психоэмоциональный ответ на стресс и экспрессия генов нейропластичности в мозге

• Автор: Берёзова, Инна Валерьевна
• Шифр специальности: 03.03.01
• Научная степень: Кандидатская
• Год защиты: 2011
• Место защиты: Новосибирск
• Количество страниц: 97 с. : ил.

ОГЛАВЛЕНИЕ
Список использованных сокращений
ВВЕДЕНИЕ
ГЛАВА 1. Обзор литературы. РЕГУЛЯТОРЫ НЕЙРОПЛАСТИЧНОСТИ В ПОВЕДЕНЧЕСКИХ ЭФФЕКТАХ СТРЕССА И АНТИДЕПРЕССАНТОВ
1.1. Стресс как фактор, провоцирующий депрессию
1.2. Индуцируемые стрессом структурные изменения в мозге
1.3. Регуляторы нейропластичности в возникновении индуцируемой стрессом депрессии
1.3.1. Мозговой нейротрофический фактор
1.3.1.1. Строение и функции ВБ1ЧР
1.3.1.2. Нейротрофическая теория депрессии
1.3.1.3. Механизмы влияния стресса на экспрессию генов нейропластичности
1.3.2. Белки апоптоза
1.3.2.1. Строение и функции Вс1-х1
1.3.2.2. Строение и функции Вах
1.3.2.3. Механизмы влияния стресса на экспрессию генов ключевых регуляторов апоптоза
1.4. Влияние антидепрессантов на нейропластические процессы в мозге
1.5. Механизмы устойчивости к индуцируемой стрессом депрессии
ГЛАВА 2. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ
2.1. Экспериментальные воздействия
2.1.1. Животные
2.1.2. Процедура вынужденного плавания
2.2. Анализ экспрессии генов ВОЖ, Вс1-х1, ВАХ и Р-актина в отделах мозга
2.2.1. Выделение РНК
2.2.2. Метод 11Т-ПЦР

2.2.3. ПЦР в реальном времени
2.3. Анализ экспрессии белка Вс1-х1
2.4. Определение уровней АКТГ и кортикостерона в плазме крови
2.5. Статистическая обработка данных
ГЛАВА 3. РЕЗУЛЬТАТЫ
3.1. Влияние однократного и повторного стресса вынужденного плавания на экспрессию генов ЕШ№, Вс1-х1 и Вах, а также отношение Вс1-х1/Вах в отделах мозга
3.1.1. ВЭ№
3.1.2. Вс1-х1

3.1.4. Вс1-х1/Вах
3.1.5. Анализ взаимосвязи между уровнем экспрессии генов нейропластичности и продолжительностью депрессивноподобного поведения
3.2. Уровень гормонов стресса и экспрессия генов нейропластичности после повторной процедуры вынужденного плавания
3.2.1. АКТГ и кортикостерон
3.2.2. ВБ№
3.2.3. Вс1-х1

3.2.5. Анализ взаимосвязи между экспрессией генов нейропластичности в мозге и уровнями гормонов ГГАС в плазме крови
3.3. Анализ возможного вовлечения генов нейропластичности, а также гормонов стресса, в механизмы чувствительности или устойчивости к формированию индуцируемого стрессом депрессивноподобного состояния на модели вынужденного плавания
3.3.1. Поведение животных в претесте и тесте вынужденного плавания

3.3.2. Индивидуальная вариабельность по чувствительности к развитию индуцированного стрессом вынужденного плавания
депрессивноподобного состояния
3.3.3. Анализ возможного вовлечения обнаруженных изменений в экспрессии генов нейропластичности и гормонов стресса в формирование устойчивости/чувствительности к стрессу
3.3.4. Анализ экспрессии белка Вс1-х1 в гиппокампе
3.4. Эффекты антидепрессанта флуоксетина на экспрессию генов белков-
регуляторов апоптоза в мозге в условиях покоя и после стресса вынужденного
плавания
3.4.1. Влияние повторного стресса вынужденного плавания и введения флуоксетина на уровень мРНК Вс1-х1
3.4.2. Влияние повторного стресса вынужденного плавания и приема флуоксетина на уровень экспрессии гена Вах
3.4.3. Влияние повторного стресса вынужденного плавания и приема флуоксетина на отношение мРНК Вс1-х1/Вах
ГЛАВА 4. ОБСУЖДЕНИЕ РЕЗУЛЬТАТОВ
ЗАКЛЮЧЕНИЕ
ВЫВОДЫ
СПИСОК ЦИТИРОВАННОЙ ЛИТЕРАТУРЫ

ГЛАВА 2. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ
2Л. Экспериментальные воздействия 2ЛЛ. Животные
В работе использовали взрослых самцов крыс линии Вистар массой 220-240 г. Всего в работе было использовано 75 животных. Животных содержали в течение эксперимента по одному в клетке в стандартных условиях вивария ИЦиГ СО РАН при температуре 22-24 °С, естественном освещении и свободном доступе к воде и корму.
Первой задачей работы было исследовать влияние однократного и повторного стрессорного воздействия на экспрессию генов нейропластичности, а также содержание гормонов в плазме крови. Для выяснения этого вопроса животных подвергали однократной и повторной процедуре вынужденного плавания.
2Л.2. Процедура вынужденного плавания
Это стрессорное воздействие является основой широко используемого для оценки депрессивноподобного состояния теста вынужденного плавания. Этот тест состоит из 15-минутного претеста и следующего за ним через 24 часа 5-минутного теста, во время которых животное помещали в стеклянный цилиндр (высота -46см, диаметр - 20 см), наполненный водой (24-26 °С) до высоты 30 см. Неизбегаемые условия, в которые помещали животное, являются для грызунов стрессорными, и в многочисленных исследованиях обнаружено значительное увеличение уровней гормонов ГГАС - адренокортикотропного гормона и кортикостерона в крови после вынужденного плавания.
Процедуры плавания регистрировали на видеокамеру и в дальнейшем анализировали на видеозаписях суммарную продолжительность пассивного поведения за первые пять минут претеста и теста. При повторной процедуре плавания по сравнению с первой значительно увеличивается продолжительность относительной неподвижности животного в воде, характеризующейся только движениями, необходимыми для поддерживания головы над водой. Именно продолжительность пассивного поведения является оценочным критерием и