Сохранение митохондриальной сети как основы для исследований участия митохондрий в физиологической регуляции

• Автор: Захарченко, Марина Владимировна
• Шифр специальности: 03.03.01
• Научная степень: Кандидатская
• Год защиты: 2012
• Место защиты: Пущино
• Количество страниц: 135 с. : ил.

ОГЛАВЛЕНИЕ
Оглавление
Список сокращений
Введение
Глава 1. Обзор литературы по теме исследования
1.1 Организация МХ в клетке и важность этой организции для функционального состояния МХ
1.1.1 Существование МХ в виде ретикулума
1.1.2 Организация МХ ретикулума в различных типах клеток
1.1.3 Ассоциация МХ с другими клеточными структурами и ее функциональное значение
1.1.4 Регуляция динамики МХ сетей
1.1.5 Роль сбалансированных деления и слияния МХ в физиологии клетки
1.1.6 Взаимосвязь структурных и функциональных изменений МХ
1.2 Обзор современных методов исследования функций МХ и возможности их применения в клинических исследованиях
1.2.1 Гистологический метод определения «красных рваных волокон»
1.2.2 Биохимические методы определения функциональной активности митохондрий
1.2.3 Цитохимические методы
1.3 Физиологическая регуляция на уровне МХ
1.3.1 Взаимосвязь симпатоадреналовой и холинэргической систем с функциями митохондрий. Субстратно-гормональная система
1.3.2 Выбор СДГ как ключевого фермента в обеспечении энергией физиологических функций
1.3.3 Роль КДГ как «представителя» парасимпатической регуляции в митохондриях
1.3.4 Выбор моделей для исследования разных уровней физиологической регуляции
Выводы по главе

Глава 2. Материалы и методы исследования
2.1 Животные и обращение с ними
2.2 Видеомикроскопические измерения гомогената печени
2.3 Цитобиохимические исследования дегидрогеназ лимфоцитов
2.4 Измерение дыхания митохондрий
2.5 Окраска родамином
Глава 3. Исследования митохондрий в концентрированном гомогенате
3.1 Наблюдение ансамблей МХ в гомогенатах с помощью световой и электронной микроскопии
3.1.1 Микроскопия в темном поле
3.1.2 Электронная микроскопия гомогената печени крысы
3.1.3 Самоорганизация МХ в процессе хранения гомогената
3.2 Изучение факторов среды выделения, влияющих на ассоциацию митохондрий
3.2.1 Влияние сахарозы
3.2.2 Разведение гомогената
3.2.3 Рассыпание сети под воздействием холода
3.2.4 Влияние веществ, используемых в полярографических исследованиях на биофизическую организацию МХ
3.3 Влияние физиологических факторов in vivo на процессы ассоциации/диссоциации MX in vitro
3.3.1 Иммобилизационный стресс
3.3.2 Введение различных доз адреналина
3.4 Изучение действия биологически активных веществ на процессы самоорганизации ансамблей МХ
3.4.1 Влияние прекондиционирования животных приемом Натурального Экстракта Доктора Мухина на структурные и функциональные характеристики МХ при ИС
3.4.2 Влияние окислительного стресса, вызванного длительным приемом препаратов железа на структурную организацию МХ
3.4.3 Влияние карнозина на самоорганизацию МХ в гомогенате печени крысы

Выводы по главе
Глава 4. Исследования митохондрий в лимфоцитах на мазке крови
4.1 Разработка нового чувствительного к физиологическим изменениям в организме и сохраняющего структуру МХ метода
4.1.1 Преимущества и недостатки цитохимического и биохимического методов исследования митохондрий
4.1.2 Влияние компонентов буферного раствора на физиологическую
чувствительность метода
4.1.4 Выявление структуры и нативности митохондрий потенциалзависимым флуоресцентным красителем родамином
4.2 Взаимосвязанные ответы СДГ и КДГ при изменении адренергической регуляции в организме
4.2.1 Изменения активности СДГ и КДГ при использовании моделей стресса, выходящих за границы адаптации организма
4.2.2 Изменения активности СДГ и КДГ при использовании моделей стресса в диапазоне физиологической адаптации
4.2.3 Исследования ответа на стресс в зависимости от исходного физиологического состояния
4.3 Коррекция патологических состояний биологически активными препаратами
4.3.1 Изучение механизмов лечебного действия препарата из гусениц восковой моли (НЭДМ) по реакциям ДГ митохондрий цитобиохимическим методом
4.3.4 Изучение препаратов кверцетина по реакциям ДГ митохондрий цитобиохимическим методом
Заключение
Выводы
Список литературы

гормонов адреналина и норадреналина привело к представлению о существовании в организме субстратно-гормональной системы регуляции.
Позже было установлено, что существует аналогичное взаимно-усиливающее взаимодействие медиатора парасимпатической нервной системы ацетилхолина (АЦХ) с окислением другого субстрата КГЛ, а именно: введение КГЛ повышает уровень АЦХ, а введенный или эндогенный
АЦХ активирует образование и окисление КДГ (Шостаковская и др., 1986).
Таким образом, образуются две субстратно - гормональные пары (рис. 3). Было обнаружено, что их партнеры равноправны - не только гормон управляет окислением субстрата, но и
Рисунок 3. Субстратно - гормональная
система взаимодействия вегетативной субстрат активирует повышение регуляции и митохондриальных процессов уровня «своего» партнера
характерно для совершенной
регуляторной системы, реципрокные пары, активируя друг друга,
притормаживают активность противоположной пары.
Сигнальное действие субстратов предполагало существование
рецепторов к ним, подобно рецепторам к гормонам.
Начало 2000-ых годов ознаменовалось в области изучения митохондрий
появлением зарубежных публикаций о неизвестной ранее физиологической
функции ЯНТ и КГЛ как регуляторных сигнальных молекул, помимо их
известной роли в качестве субстратов окисления (Не et al., 2004; Hebert,
2004). Очень важной независимой поддержкой представления о
существовании субстратно - гормональной системы было обнаружение в