Исследование нейропротекторных свойств фуллеренов С60 на модели болезни Альцгеймера у крыс

• Автор: Макарова, Екатерина Григорьевна
• Шифр специальности: 03.03.01
• Научная степень: Кандидатская
• Год защиты: 2012
• Место защиты: Пущино
• Количество страниц: 112 с. : ил.

Оглавление
Список сокращений
ВВЕДЕНИЕ
I. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ
ГЛАВА 1. БОЛЕЗНЬ АЛЬЦГЕЙМЕРА
1.1. Амилоидозы - конформационые болезни
1.2. Болезнь Альцгеймера: эпидемиология и социальная значимость
1.3. Генетическая и спорадическая формы Б А
1.4. Клинические признаки. Факторы риска. Диагностика
1.5. Гистопатологические признаки и повреждение структур мозга. Нарушение памяти
1.6. Маркеры болезни Альцгеймера
1.6.1. Бета-амилоидные пептиды
1.6.2. Тау и нейрофибриллярные узелки. Нарушение внутриклеточного транспорта
1.6.3. Окислительный стресс. Нарушение синтеза белка
1.6.4. Воспалительные процессы. Роль астроцитов и микроглии
1.6.5. Нарушение автофагии
1.6.5. Дисфункция синапсов. Клеточная гибель
1.7. Гипотезы
1.8. Модели БА: достоинства и недостатки
1.8.1. Трансгеные животные
1.8.2. Введение агрегированного бета-амилоида
1.8.3. Бульбэктомированные животные
1.9. Исследование пространственной памяти в водном лабиринте Морриса на
моделях БА
ПО.Терапия БА
ГЛАВА 2. ФУЛЛЕРЕНЫ С60 КАК ВОЗМОЖНЫЕ НЕЙРОПРОТЕКТОРЫ ДЛЯ ПРОФИЛАКТИКИ И ЛЕЧЕНИЯ БА
2.1. Физико-химические свойства С60
2.2. Биологическая активность фуллеренов
2.2.1. О вероятных механизмах проникновения в клетку и распределения в организме
2.2.2. О токсичности фуллеренов
2.3. Гидратированный фуллерен
2.4. Эффекты фуллеренов на моделях БА in vitro
КРАТКОЕ ЗАКЛЮЧЕНИЕ

ЦЕЛЬ И ЗАДАЧИ ИССЛЕДОВАНИЯ
II. ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНАЯ ЧАСТЬ
ГЛАВА 3. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ
3.1. Животные
3.2. Вещества и способ введения
3.3. Переживающие срезы
3.4. Приготовление образцов ткани
3.5. Исследование состояния рРНК
3.6. Световая микроскопия и иммуногистохимия
3.7. Исследование пространственной памяти в водном лабиринте Морриса
3.7.1. Водный лабиринт и установка для видеорегистрации
3.7.2. Вероятностная задача
3.7.3. Тест на пространственное обучение с одной пробы
3.8. Статистический анализ
ГЛАВА 4. РЕЗУЛЬТАТЫ И ОБСУЖДЕНИЕ
4.1. Влияние предварительного введения С60НуГп на пространственную память
при случайном положении цели в водном лабиринте Морриса и синтез белка пирамидных нейронов поля СА1 гиппокампа, нарушенные на ранней стадии после интравентрикулярного введения агрегированного Ар25„35 У взрослых и старых крыс
4.1.1. Влияние предварительного введения СУЦуГп на пространственную память при случайном положении цели в водном лабиринте Морриса у взрослых и старых крыс на ранней стадии действия АР
4.1.2. Влияние предварительного введения СбоНуБп на морфологическое состояние пирамидных нейронов поля СА1 гиппокампа и синтез белка в этих нейронах у взрослых и старых крыс на ранней стадии после интравентрикулярного введения Ар25„35
4.2. Влияние предварительной инкубации переживающих срезов гиппокампа в среде, содержащей СбоНуГп, на морфологическое состояние пирамидных нейронов поля СА1 гиппокампа, нарушенное инкубацией с Ар25
4.3. Влияние предварительного введения С60НуГп на морфологическое состояние пирамидных нейронов поля СА1 гиппокампа и синтез белка в этих нейронах у

взрослых крыс на ранней стадии после интрагиппокампальной микроинъекции

4.4. Влияние предварительного введения С6оНуГп на пространственное обучение
и память у взрослых крыс на ранней стадии после интрагиппокампальной
микроинъекции АР)
ВЫВОДЫ
СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ
ФИНАНСОВАЯ ПОДДЕРЖКА РАБОТЫ
БЛАГОДАРНОСТИ

протеазу вируса HIV-1, специфически блокируя внутреннюю цилиндрическую полость этого фермента (Schinazi et al., 1993).
Липофильность молекулы играет важную роль в распределении лекарственного вещества в организме. Фуллерен обладает высокой липофильностью, присоединение фуллеренового остатка приводит к сильному повышению гидрофобности органической молекулы, модифицированной фуллереном, и позволяет таким молекулам проникать почти во все ткани организма. Однако в головной мозг проникает всего 1% фуллерена, введенного в организм (Yamago et al., 1995).
Кроме того, высокая липофильность молекул фуллерена лежит в основе их плохой растворимости в полярных растворителях (Сидоров и др., 2005), а также в основе высокой склонности молекул фуллеренов к образованию агрегатов (Guldi et al., 2005).
Однако в организме достаточно много структур, образованных неполярными молекулами, в первую очередь, мембраны. Показано, что препараты фуллерена, содержащие небольшие агрегаты, способны проникать в мембраны и менять их свойства, т.е. обладают мембранотропным действием. Этим объясняется противовирусный механизм фуллерена. В пересчете на фуллерен его эффективная доза составляет примерно 5 мкг/мл, что значительно ниже соответствующего показателя для ремантадина (25 мкг/мл), традиционно используемого в борьбе с вирусом гриппа. В отличие от ремантадина, наиболее эффективного в ранний период заражения, аддукт С60/ПВП обладает устойчивым действием в течение всего цикла размножения вируса (Piotrovsky and Kiselev, 2004).
Антиоксидантная активность фуллеренов позволяет считать их перспективными для регуляции свободно радикальных процессов и снижения уровня окислительного стресса, при различных патологиях, связанных с повреждающим действием радикалов (при болезни Паркинсона, болезни Альцгеймера или ишемии тканей) (Tsai et al., 1997; Dugan et al., 1997; Gharbi et al., 2005; Nielsen et al., 2008). Фуллерен проявил in vitro антирадикальную активность против гидроксил радикалов, защищал ДНК от окислительного повреждения, вызванного ионизирующей радиацией, а также повышал выживаемость мышей после облучения (Andrievsky et al., 2009). На модели алкогольной интоксикации