Биологическая активность и восстановление засоленных почв при нефтяном загрязнении

• Автор: Ибатуллина, Инна Зайтуновна
• Шифр специальности: 03.02.08, 03.02.03
• Научная степень: Кандидатская
• Год защиты: 2012
• Место защиты: Москва
• Количество страниц: 175 с. : ил.

1.2.6. Определение ферментативной активности почв.
Дегидрогеназная активность почвы. Для определения актуальной дегидрогеназной активности (ДА акт) по 1 г воздушно-сухой почвы помещали в стеклянные пробирки и прибавляли по 2 мл 0.5%-ого водного раствора ТТХ (2,3,5-трифенил-тетразолий хлористый).
Суспензии тщательно перемешивали и помещали в водяной термостат на 24 часа при температуре +30° С. После инкубации смеси центрифугировали в течение 20 мин при 3000 об/мин; над осадочные жидкости сливали. Для извлечения трифенилформазана (ТФФ), образовавшегося при восстановлении ТТХ, осадки заливали 7.5 мл ацетона. Экстракцию ацетоном проводили в течение 1 ч при периодическом перемешивании, после чего смеси центрифугировали 20 мин при 3000 об/мин. Окрашенные надосадочные жидкости сливали в чистые стеклянные пробирки и колориметрировали на ФЭК-2 при длине волны 490 нм, в кюветах толщиной 5 мм.
Количество ТФФ рассчитывали по калибровочной кривой и выражали в микролитрах водорода (мкл Н2/г субстрата/ч) с расчетом, что на образование 1 мг ТФФ необходимо 150.35 мкл Н2.
Расчет активности дегидрогеназы в почве проводили по формуле:
АД = (150.35 с-Ъ)/(Р-Т- 10)
где с - концентрация формазана, найденная по калибровочной кривой; а - навеска субстрата (1 г); Т - время инкубации (24 ч); 10 мл - объем формазана, используемый при построении калибровочной кривой; Ь -количество ацетона, пошедшее на извлечение формазана (7.5 мл).