Фенотипические эффекты гетерозиготного носительства мутаций гена фенилаланингидроксилазы

• Автор: Сарычева, Елена Алексеевна
• Шифр специальности: 03.00.15
• Научная степень: Кандидатская
• Год защиты: 1999
• Место защиты: Москва
• Количество страниц: 182 с. : ил.

СОДЕРЖАНИЕ
СПИСОК СОКРАЩЕНИЙ
ВВЕДЕНИЕ
Глава I.. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ.
1.1. Фенилаланин, его характеристика и метаболизм в организме
1.1.1. Общая характеристика аминокислоты фенилаланин
1.1.2. Метаболизм фенилаланина в организме человека
1.2. Состояния обмена фенилаланина в организме беременных женщин
в норме и при патологиях
1.3. Фенилаланингидроксилаза - мажорный фермент фенилаланингидрокси лазной системы
1.4. Локусы и гены ФАГ-системы
1.4.1. Ген ФАГ
1.4.2. Мутации в гене ФАГ
1.4.3. Мутации в генах РЕЕ и
1.5. Фенилкетонурия, особенности ее клинического проявления и популя-
ционная характеристика,
1.6. Гетерозиготное яосительсгво мутаций генов «ФАГ-системы, медицинские и социальные аспекты
1.6.1 .Общая характеристика гетерозиготных носителей мутаций генов
ФАГ-системы
1,6,2. Гетерозиготное носительегво мутаций генов ФАГ-системы беременным и женщинами
Глава 2. МАТЕРИАЛ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ
2.1. Характеристика изучаемых выборок и программ исследования
2.2. Метод анкетирования
2.3. Биохимические методы
2.4. Молекулярно-генетические мегоды
2.5. Методы статистической обработки
РЕЗУЛЬТАТЫ СОБСТВЕННЫХ ИССЛЕДОВАНИЙ.
Глава 3. Биохимическое и молехулярно- генетическое обследование в
семьях больных фенилкетонурией
3.1. Результаты молекулярно-генетического анализа семей больных фенилкетонурией,
3.2. Изучение количественного содержания фенилаланина в крови больных фенилкетонурией,
3.3. Изучение показателей ФЕИ-ТИР обмена у родителем больных ФКУ (гетерозиготные носители)
3.4. Сравнительное изучение содержания фенилаланина в цельной крови гетерозиготных носителей мутаций генов ФАГ-системы, определенное разны ми биохи м ичеекими методам и
3.5. Обсуждение
Глава. 4. Пилотный скрининг беременных женщин на содержание фенилаланина
4.1, Концентрация фенилаланина и возраст беременных женщин
4.2, Вариабельность содержания фенилаланина в зависимости от времени
с момента последнего приема пиши до забора крови
4.3, Содержание фенилаланина и срок беременности
4.4, Многомерный анализ вариабельности содержания фенилаланина у беременных женщин
4.5, Обсуждение
Глава 5. Изучение количественного содержания показателей ФЕН-ТИР обмена у женщин на различных сроках беременности и оценка их влияния на концентрацию фенилаланина в крови новорожденных
5,1. Вариабельность содержания фенилаланина у женщин на разных сроках беременности
5-2, Оценка вариабельность содержания тирозина и количественного соотношения содержания фенилаланина и тирозина у женщин на разных сроках беременности
5.3. Многомерный анализ вариабельности содержания показателей ФЕН-ТИР обмена и ряда, фенотипических характеристик женщин во время беременности и оценка их взаимосвязи с концентрацией фенилаланина новорожденных
5.4, Обсуждение
Глава 6, Молекулярно-генетический анализ малых мутаций 5, 7 и 12 эк-
зонов гена фенилаланингидроксилазы у беременных женщин.,!
6.1. Результаты детекции мажорной мутации R408W
6.2. Результаты детекции генетических повреждений в 5 и 7 экзонах гена ФАГ
6.3. Обсуждение
Глава 7. Изучение количественного содержания показателей ФЕН-ТИР
обмена у женщин гетерозиготных носителей мутации гена фенилаланингидроксилазы и оценка их взаимосвязи с концентрацией фенилаланина и росто-весовыми показателями новорожденных
7,1.Оценка вариабельности количественных показателей ФЕН-ТИР обмена у женщин гетерозиготных носителей мутации R408W гена ФАГ на различных сроках берем енности
7.2. Оценка количественного содержания показателей ФЕН-ТИР обмена у беременных женщин носителей фрагментов ДНК с аномальной подвижностью, включающие 5 и 7 экзоны гена ФАГ
7.3. Многомерный сравнительно-статистический анализ показателей ФЕН-ТИР обмена у беременных женщин и оценка их влияния на фенотипические показатели новорожденных
7.4. Обсуждение
ЗАКЛЮЧЕНИЕ
ВЫВОДЫ
ПРАКТИЧЕСКИЕ РЕКОМЕНДАЦИИ
СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ
ПРИЛОЖЕНИЕ
Европейских популяциях, с большей частотой в Швейцарии и Турции. Генетический дефект обусловлен транзицией G на А в седьмом экзоне, ведущей к замене аргинина на глутамин в белке, в результате которой происходит значительное снижение активности фермента ФАГ (до 30%). Сцепление между« R261 W-мутацией и галлотипом 1 также строго определенно. Мутация R158Q тоже описана для Европейских популяций. Замена затрагивает гуанин на аденнн пятого экзона гена ФАГ, обусловливая замещение аргинина на глутамин в 158 положении в белке. Сцепление R158Q-мутации с галлотипом 4 очень схоже с тем, что наблюдается между R26JQ и гапло-типом 1 [182. 185].
Нейтральный полиморфизм V245V представляет замену G на А в третьем нуклеотиде 7 экзона, которая не приводит к изменению смысла кодона на аминокислотном уровне, но нарушает один из двух присутствующих в 7 экзоне сайтов рестрикции для ресгриктазы Alu Ï. Данный нейтральный полиморфизм описан ранее .для ряда европейских и восточных популяций. Аллель, несущий V245V образует сцепление с мутациями R261Q в 7 экзоне и RÎ58Q в 5 экзоне [6. 7].
Показана высокая сопряженность между клиническими и биохимическими показателями заболевания и типом мутационных повреждений в ФАГ -гене у больных фенилкетонурией [143, 181, 200]. В результате разных молекулярных повреждений ФАГ-гене и их сочетаний происходит либо синтез полностью неактивного продукта, либо синтез нестабильной фени-лаланиягидроксилазы или фермента со значительно сниженной активностью [120].
1,4.3. Мутации € генах РЕЕ и DHPR.
Причинами ФКУ могут быть дефекты дигидроптеридинредуктазы (ДГПР, D.HPR) и кофермента тетраг’идробионтерина (ВЩ). ВВЦ является кофактором не только для фенилаланин-4-гидроксилазы, но также для тирозин-3-гидроксилазы и триптофан-5-гидроксилазы. Около 1-3 % пациен-