Влияние партеногенетических активаторов на преобразования хроматина и цитоплазматические изменения в ооцитах коров и свиней

• Автор: Федосков, Евгений Дмитриевич
• Шифр специальности: 03.00.15
• Научная степень: Кандидатская
• Год защиты: 1999
• Место защиты: Санкт-Петербург, Пушкин
• Количество страниц: 138 с. : ил.

СОДЕРЖАНИЕ.

СПИСОК СОКРАЩЕНИЙ
ВВЕДЕНИЕ
1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ
1.1. Вид и пути партеногенетического развития млекопитающих
1.2. Кариология раннего развития млекопитающих
1.3. Причины гибели партеногенетических зародышей млекопитающих
1.4. Механизм активации партеногенетического развития
1.5. Участие кальция в раннем развитии млекопитающих
1.5.1. Роль кальция при оплодотворении ооцитов
1.5.2. Роль кальция при партеногенетической активации ооцитов
1.6. Митохондриальная активность в ооцитах млекопитающих
2. МАТЕРИАЛ И МЕТОДИКА ИССЛЕДОВАНИЙ
2.1. Материал исследований
2.2. Методы исследований
2.2.1. Выделение ооцит-кумулюсных комплексов и их оценка
2.2.2. Культивирование ооцит-кумулюсных комплексов коров и свиней
2.2.3. Способы активации ооцитов крупного рогатого скота и свиней
2.2.3.1. Активация ооцитов крупного рогатого скота и свиней этиловым спиртом
2.2.3.1. Активация ооцитов коров электрическим током
2.2.4. Капацитация сперматозоидов и оплодотворение ооцитов
in vitro

2.2.5. Получение монослоя клеток гранулезы и кумулюса крупного рогатого скота и кондиционированных сред для культивирования ооцитов свиней
2.2.6. Измерение уровня кальция внутриклеточных депо в ооцитах и зиготах крупного рогатого скота
2.2.7. Измерение уровня интенсивности флуоресценции родамина 123 в
митохондриях яйцеклеток коров, активированных 8,0% этанолом
2.2.8. Цитогенетические исследования ооцитов, зигот и эмбрионов крупного рогатого скота и свиней
2.2.9. Микроскопирование, микрофотосъемка и статистическая обработка полученных данных
3. РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЙ
3.1. Модификация методов активации ооцитов крупного рогатого скота
3.1.1 спиртом.

током.
Активация ооцитов крупного рогатого скота этиловым Активация ооцитов крупного рогатого скота электрическим

3.1.2.1. Влияние ионов Са 2+ на активацию ооцитов крупного рогатого скота электрическим током
3.1.2.2. Влияние числа электрических импульсов на активацию ооцитов крупного рогатого скота
3.1.3. Влияние этилового спирта и электрического тока на ооциты коров
3.2. Партеногенетическое развитие ооцитов свиней
3.2.1. Активация ооцитов свиней этиловым спиртом
3.2.2. Влияние кондиционированных сред, полученных с монослоев клеток гранулезы или кумулюса коров, на созревание и партеногенетическое развитие ооцитов свиней
3.3. Динамика накопления кальция во внутриклеточных депо ооцитов коров после их активации или осеменения in vitro
3.4. Интенсивность флуоресценции родамина 123 в митохондриях ооцитов крупного рогатого скота после их стимуляции к партеногенети-ческому развитию и в интактных ооцитах
ОБСУЖДЕНИЕ
ВЫВОДЫ
ПРАКТИЧЕСКИЕ ПРЕДЛОЖЕНИЯ
СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ

митотического аппарата, движение хромосом к полюсам и завершение первого клеточного деления (Danphy, Newport, 1988 ). В яйцеклетках происходит цитоплазматическая реорганизация посредством передвижений, связанных с вхождением сперматозоида.
1.5.2. Роль кальция при партеногенетической активации ооцитов.
У млекопитающих ооциты приобретают способность к активации только после завершения первого деления созревания, т.е. у млекопитающих описан только мейотический партеногенез. Случаи спонтанной или индуцированной активации незрелых яйцеклеток млекопитающих не описаны, тогда как яйца тутового шелкопряда при очень сильных воздействиях способны вступить в амейотический партеногенез (Струнников В.А., 1986).
Не зависимо от природы импульса активации в яйцеклетках происходит последовательная цепь событий, которые принято подразделять на первичные, вторичные и третичные (Whittingham D.G., 1980). Первичный эффект активирующего стимула реализуется в локальных изменениях плазматической мембраны, изменения мембранных потенциалов и увеличении ее текучести. После этого возрастает содержание свободных ионов кальция (Cuthbertson K.S.R., et al., 1981; Barboni В and Mattioli М., 1996).
Возрастание в цитоплазме активировавшихся яйцеклеток свободных ионов кальция происходит предположительно, путем вытеснения их из фосфолипидных комплексов плазматических мембран, что, по-видимому, является пусковым механизмом, триггером активации (Дыбан А.П., Нониашвили Е.М., 1988).
Кальций активирует целый ряд метаболических реакций. Например увеличение потребления яйцеклеткой кислорода, который, вероятно