Митохондриальный геном Pisum sativum L. при стрессе

• Автор: Губайдуллин, Марат Ирекович
• Шифр специальности: 03.00.12
• Научная степень: Кандидатская
• Год защиты: 1999
• Место защиты: Уфа
• Количество страниц: 101 с. : ил.

ВВЕДЕНИЕ
I. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ
1.1. Типы реакций высших растений на стресс на молекулярном уровне
1.2. Митохондрии растительной клетки
1.2.1. Структура и количество митохондрий в клетке
1.2.2. Особенности митохондрий растений
1.2.3. Митохондрии растительной клетки при стрессе
1.3. Митохондриальный геном высших растений
1.3.1. Кольцевые и линейные митохондриальные ДНК
1.3.2. Низкомолекулярные митохондриальные ДНК
1.3.3. Модели организации митохондриального генома высших растений
II. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ
II. 1. Характеристика объекта
11.2. Выращивание гороха посевного при солевом
стрессе (NaCl)
11.3. Выращивание гороха посевного при аноксии
11.4. Культивирование клеток in vitro
II. 5. Выделение митохондриальной ДНК методом фенольной депротеинизации
11.6. Электрофоретическое разделение митохондриальной ДНК в агарозном геле
11.7. Расщепление митохондриальной ДНК рестрицирую-щими эндонуклеазами
11.8. Электроэлюция митохондриальной ДНК в агарозном геле
11.9. Обработка митохондриальной ДНК РНКазами А и Н

II. 10.Расщепление митохондриальной ДНК изошизомерами MspI и Hpall
II. 11.Реактивы
III. ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНАЯ ЧАСТЬ
III. 1. Митохондриальный геном гороха посевного при
солевом стрессе
111.2. Митохондриальный геном клеток гороха, культивируемых in vitro
111.3. Митохондриальный геном гороха при аноксии
111.4. Метилирование цитозина в митохондриальной ДНК гороха
ЗАКЛЮЧЕНИЕ

ВЫВОДЫ
СПИСОК ИСПОЛЬЗОВАННОЙ ЛИТЕРАТУРЫ

ВВЕДЕНИЕ
Актуальность. В последнее время митохондрии привлекают все большее внимание физиологов растений, молекулярных биологов, биофизиков, генетиков. Это объясняется той ролью, которую митохондрии играют в жизнедеятельности клетки и организма в целом, а также тем, что с митохондриальным геномом растений связаны такие практически важные признаки, как устойчивость к патотоксинам и цитоплазматическая мужская стерильность (ЦМС).
К настоящему времени достаточно подробно исследованы митохондриальные геномы дрожжей и млекопитающих. Структурнофункциональная организация этого генома у растений до сих пор не ясна. Имеющиеся эксперментальные данные не позволяют отдать предпочтение ни одной из доминирующих моделей организации митохондриального генома растений. Одна из них предполагает наличие активных рекомбинационных процессов в митохондриях растений, согласно другой - в этой органелле может меняться только копийность предсуществовавших классов кольцевых молекул.
Изменчивость митохондриального генома растений была показана при сравнительном анализе митохондриальной ДНК (мтДНК) целых растений и клеток, культивируемых in vitro, а также фертильных растений и растений с признаком ЦМС [Small et al., 1987; Lonsdale, 1989]. Однако эти данные укладываются в рамки каждой из этих гипотез. Поэтому необходимо привлечение новых модельных систем для углубления представлений об организации митохондриального генома растений in vivo.
Исходя из вышесказанного целью настоящей работы является исследование вариабельности структурной организации митохон-

КН2Р04
НэВОз
Мп804 4Н20
СоС12 6Н20
Си804 5Н20
гп804 7Н20
Иа2ЭДТА 2Н20
Иа2Мо04 2Н20

Ре804 7Н20
Тиамин-НС1
Пиридоксин-НС1
Никотиновая кислота
Мезо-инозит
Глицин

Кинетин
Сахароза 30000
рН= 5
11.5. Выделение митохондриальной ДНК методом фенольной депротеинизации
Митохондриальную ДНК из растительных образцов выделяли методом фенольной депротеинизации [ДупепЫ ег а1., 1979]. Приведенная