Влияние клонированного фрагмента ДНК, содержащего детерминант устойчивости к актиномицину, на биосинтез макротетролидов

• Автор: Русанова, Елена Петровна
• Шифр специальности: 03.00.07
• Научная степень: Кандидатская
• Год защиты: 2000
• Место защиты: Москва
• Количество страниц: 108 с. : ил.

СОДЕРЖАНИЕ

ВВЕДЕНИЕ
ГЛАВА 1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ
1. Элементы систем регуляции биосинтеза антибиотиков
1.1. Принцип организации генов биосинтеза антибиотиков
1.2. Роль А-фактора в регуляции биосинтеза антибиотических структур
1.3. Распространение регуляторов, подобных А-фактору, среди
стрептомицетов и других микроорганизмов
1.4. Роль гена устойчивости в регуляции антибиотической продукции
1.5. Механизмы инициации и системы генетического контроля
биосинтеза антибиотиков у Лгерйз/яусет
2. Методы клеточной и генной инженерии для получения новых
антибиотиков и повышения продуктивности штаммов 81щПотусе$
2.1. Методы клеточной инженерии
2.2. Методы генной инженерии
а) использование ДНК-зондов для обнаружения потенциальных продуцентов
б) использование клонированных генов вторичного метаболизма для повышения продуктивности штаммов
в) гибридные антибиотики
3. Антибиотики макротетролиды
3.1. Строение и физико-химические свойства
3.2. Биосинтез
3.1. Строение и физико-химические свойства
3.2. Биосинтез
3.3. Антибиотическое действие и применение
4. Продигиозины
4.1. Строение и физико-химические свойства
4.2. Биосинтез
4.3. Антибиотическое действие и применение
5. Заключение и задачи исследований
ГЛАВА 2. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ
2.1. Объекты исследования
2.2. Среды и условия культивирования
2.3. Определение уровня и типов устойчивости к антибиотикам
стрептомицетных штаммов
2.4. Трансформация
2.5. Выделение экстрохромосомной ДНК
2.6. Выделение антибиотических веществ
2.7. Реактивы и приборы
ГЛАВА 3. РЕЗУЛЬТАТЫ И ОБСУЖДЕНИЕ
3.1. Выбор объекта исследования
3.2. Определение типов устойчивости к актиномицину исходного
типового штамма
3.3 Трансформация протопластов 8. verraensis 1365 плазмидой
рН702 (ас1г) и анализ трансформантов:
а) электрофоретический анализ экстрохромосомной ДНК трансформанта
б) изучение антибиотической активности и антибиотического
исходного типового штамма
3.5. Выделение полученных антибиотических веществ из штамма-
-трансформанта
3.6. Идентификация компонента X
3.7. Идентификация компонента А,
3.8. Идентификация компонента В
3.9. Изучение некоторых физико-химических характеристик компонента С
3.10. Поиск эндогенных регуляторов типа А-фактора среди исследуемых
сгрептомицетных штаммов
ЗАКЛЮЧЕНИЕ
ВЫВОДЫ
ЛИТЕРАТУРА
ПРИЛОЖЕНИЯ

Таблица 1.
Антимикробный спектр антибиотика-макротетролида (Нефёдова, 1985).
МИКРООРГАНИЗМ Макротетролид (МИК, мкгмл)
Staphylococcus aureus 0
Bacillus subtilis 0
Bacillus cereus 0
Bacillus megatherium 0
Micrococcus luteus 0
Mycobacterium phlei 0
Pseudomonas fluorescens 25
Escherichia coli 25
Proteus vulgaris 25
Streptomyces globisporus 18
Trichothecium roseum 20
Penecillium sp. 20
Saccharomyces cerevisiae 25
Candida albicus 9
В процессе поиска антибиотиков-инсектицидов были обнаружены макротетролиды, имеющие противоклещевую активность. Продуцент S. aureus, показал активность против Gallosofnichue chiensis, "Azukibean weeuil". Активное вещество, выделенное из этого штамма, состояло из динактина, тринактина и тетронактина (Oichi et. al., 1970; Tanaka, Omura, 1993).