Сравнительное исследование плазмалогенов в фосфолипидах морских беспозвоночных

• Автор: Дембицкий, Валерий Михайлович
• Шифр специальности: 03.00.04
• Научная степень: Кандидатская
• Год защиты: 1981
• Место защиты: Челябинск
• Количество страниц: 149 с. : ил.

ОГЛАВЛЕНИЕ
1. ВВЕДЕНИЕ
2. ЛИТЕРАТУШЫЙ ОБЗОР
2.1. Сравнительное содержание плазмалогенов и алкиловых эфиров в липидах морских беспозвоночных.
2.2. Сравнительное содержание плазмалогенов и алкиловых эфиров в липидах различных органов и тканей позвоночных.
2.3. Микросомальные ферменты, участвующие в метаболизме плазмалогенных и алкиловых глицеролипидов.
2.4. Методы анализа фосфолипидов с простой эфирной связью и их производных.
2.4.1. Хроматографические методы анализа.
2.4.2. Химические и энзиматические методы анализа.
2.4.3. Спектральные методы анализа.
3. ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНАЯ ЧАСТЬ
3.1. Получение липидных экстрактов.
3.2. Приготовление стандартных фосфолипидов из различных источников.
3.3. Тонкослойная хроматография.
3.3.1. Препаративная ТСХ.
3.3.2. Микро-ТСХ.
3.4. Хроматографические проявляющие системы.
• 3.5. Колоночная хроматография.
3.6. Реагенты для обнаружения и идентификации различных липидов на хроматограммах,
3.6.1. Неспецифические реагенты.'
, 3.6.2. Специфические реагенты.
3.7. Газо-жидкостная хроматография.
3.7.1. Получение диметилацеталей жирных альдегидов.
3.7.2. Получение метиловых эфиров жирных кислот.
3.7.3. Получение изопропилиденовых производных алкиловых эфиров глицерина.
3.8. Химические методы анализа.
3.8.1. Количественное определение фосфолипидов.
3.8.2. Количественное определение нейтральных липидов.
3.8.3. Определение алк-1-енил-глицерофосфатидов.
3.8.4. Определение алкил-глицерофосфатидов.
3.8.5. Определение сложноэфирных групп.
3.8.6. Определение этаноламина в виде динитрофенильных производных.
3.8.7. Мягкий щелочной гидролиз.
3.8.8. Восстановление липидов алюмогидридом лития.
3.9. Выделение необычных ЛИПИДОВ ИЗ губки НаИсЬ.ОП(1г1а рапд.сеа и Офиуры ОрМига вага!.
ЗЛО. Физико-химические методы анализа липидов и их производных.
3.10.1. ИК-спектроскопия.
3.10.2. Масс-спектрометрия.
3.10.3. ЯМР-спектроскопия.
4. РЕЗУЛЬТАТЫ И ИХ ОБСУЖДЕНИЕ
4.1. Разработка методов анализа плазмалогенных форм в фосфоли-пидных классах.
4.2. Сравнительно-биохимическое исследование плазмалогенов в фосфолипидных классах морских беспозвоночных.
4.3. Связь между эволюционным положением морских беспозвоноч-, ных и их плазмалогенным составом фосфолипидных классов.
4.4. Сравнительное изучение фосфолипидного и жирнокислотного состава дальневосточных морских губок.
4.5. Установление структуры необычного липида из морской губки Halichondria panicea.
4.6. Исследование фосфолипидного состава офиуры Оphiura sarsi.
4.7. Изучение плазмалогенного состава фосфолипидных классов различных органов и тканей осьминога Octopus sp..
ВЫВОДЫ
ЛИТЕРАТУРА
-целлюлозе; хроматография на бумаге, пропитанной кремневой кислотой.
В настоящее время тонкослойная хроматография считается одним из наиболее эффективных и универсальных способов разделения интак-тных смесей липидов (нейтральных и фосфолипидов). Более того, если в качестве адсорбента используется силикагель, 'обработанный нитратом серебра, то методом ТСХ можно разделять липиды одного класса по числу двойных связей. Как и колоночная хроматография, ТСХ может быть адсорбционной, ионообменной и распределительной. Подобно хроматографии на бумаге, пропитанной силикагелем, ТСХ отличается простотой, высокой разрешающей способностью и требует малых количеств вещества. Кроме того, ТСХ обладает рядом преимуществ и поэтому этот метод предпочитают другим способам для разделения сложных липидных смесей.
Индивидуальные классы диацильных фосфатидов иногда сопровождаются их аналогами: алкил-ацил- и алкенил-ацил-фосфатидами. При изучении метаболизма этерных липидов иногда необходимо знать процент распределения всех этих субклассов. Такие проблемы хорошо решаются при использовании техники Давсона ( Dawson, 1967, 1976 )', сущность которой состоит в селективном гидролизе различных гидрофобных остатков в молекуле липида, которые .обладают различной растворимостью в водной и органической фазах. Водорастворимые компоненты, содержащие фосфор, разделяют хроматографией на бумаге или ТСХ и определяют содержание в них фосфора. Сначала с помощью мягкого щелочного гидролиза расщепляют сложноэфирные связи в ди-ацилах-, моно-ацилах-, алкенил-аццлах-, и алкил-ацилах-фосфатидов и при этом освобождаются также водорастворимые производные диаци-лов- и моно-ацилов-фосфатидов - фосфорилглицериды. Специальная обработка ионами двухвалентной ртути в кислой среде при 40°С