Доставка любой диссертации в формате PDF и WORD за 499 руб. на e-mail - 20 мин. 800 000 наименований диссертаций и авторефератов. Все авторефераты диссертаций - БЕСПЛАТНО
Геворкян, Маргарита Левоновна
03.00.04
Кандидатская
1984
Ереван
158 c. : ил
Стоимость:
499 руб.
ГЛАВА I. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ
1.1. Аргиназа печени млекопитающих
1.1.1. Физико-химические и кинетические свойства
1.1.2. Иммунохимические свойства и регуляция
1.1.3. Изоферменты
1.2. Неуреотелическая аргиназа
1.2.1. Физико-химические и кинетические свойства
1.2.2. Изоферменты и регуляция
1.3. Роль некоторых функциональных групп в проявлении активности и особенности функционирования аргиназы
1.3.1. Химическая модификация
1.3.2. Действие ультрафиолетового и ионизирующих излучений
1.3.3. Зависимость кинетических параметров каталитической реакции от pH среды
ГЛАВА II. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ
ГЛАВА III. РЕЗУЛЬТАТЫ ЭКСПЕРИМЕНТОВ И ИХ ОБСУЖДЕНИЕ
3.1. Изучение роли остатков триптофана в аргиназе
3.1.1. Влияние ультрафиолетового облучения
3.1.2. Сенсибилизированное эозином фотоокисление
3.1.3. Химическая модификация N - бромсукцинимидом
3.2. Влияние сульфгидрильных реагентов
3.2.1. Химическая модификация аргиназы ПХМБ
3.2.2. Влияние меркаптоэтанола и дитиотреитола
3.3. Химическая модификация остатков тирозина тет-
ранитрометаном
3.4. Изучение роли остатков гистидина в аргиназе
3.4.1. Сенсибилизированная метиленовым синим фо-тоинактивация
3.4.2. Химическая модификация диэтилпирокарбонатом
3.5. Изучение зависимости величины от pH
3.6. Определение молекулярной массы субъединицы аргиназы
ЗАКЛЮЧЕНИЕ
ВЫВОДЫ
СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ
Принятые сокращения
БСИ - N - бромсукцинимид
ДПК - диэтилпирокарбонат
дсн - додещлсульфат натрия
дтт - дитиотреитол
мэ - 2 - меркаптоэтанол
ПААТ - полиакриламидный гель
ПНМБ - р - гидроксимеркурибензоат
ПЖБ - р - хлормеркурибензоат
САЧ - сывороточный альбумин человека
тнм - тетранитрометан
ФЛ - флуоресценция
ФМСФ - фенилметилсу льфонилфторид
ФХЛ - фотохемилюминесценция
ЭДТА - этилендиаминтетраацетат
№ — ЕМ - к - этилмалеинимид
мощью диэтилпирокарбоната - реагента, избирательно взаимодействующего с остатками гистидина в белках, показали, что эти аминокислотные остатки играют существенную роль в проявлении активности фермента (64). Наиболее подробное исследование роли отдельных функциональных групп в аргиназе с помощью метода химической модификации проведено на аргиназе печени крыс (82). Результаты карба-моилирования, нитрования и диазотирования показали, что остатки лизина и тирозина не входят в состав активного центра фермента. Добавление 300-кратного избытка ТНМ снижает активность аргиназы всего на 20$ при модификации 4-х остатков тирозина на молекулу. Карбамоилирование с помощью КС1ТО приводит к модификации остатков лизина с образованием гомоцитруллина, однако, активность при этом не снижается, а наоборот, возрастает /137$/. Авторы считают, что образование гомоцитруллина стабилизирует молекулу фермента в результате сильного гидрофобного взаимодействия. Исследование свойств аргиназы печени крыс, иммобилизованной на сефарозе 4В показало, что £ - аминогруппы лизина удалены от активного центра фермента (179).
Под действием БСИ /pH 5/ в молекуле аргиназы печени крыс модифицируется 5-6 остатков триптофана, что сопровождается снижением активности на 90$. Авторы считают, что триптофановые остатки могут играть роль в образовании специального неполярного окружения, в котором формируется фермент-субстратный комплекс (176).
При модификации остатков гистидина с помощью сенсибилизированного метиленовым синим фотоокисления аргиназы /pH 7,5/ активность снижается на 80$. Фотоинактивация становится значительно более эффективной при повышении температуры до 45°С (82). Изучение зависимости степени инактивации от pH показало, что наибольшая скорость инактивации наблюдается при pH 7-9. По мнению авторов модификации подвергается протонированная форма имидазольного кольца,
Название работы | Автор | Дата защиты |
---|---|---|
Химические основы спектральных превращений флуоресцентных белков из коралловых полипов | Пахомов, Алексей Александрович | 2007 |
Нуклеазные активности антител и лактоферрина молока человека | Канышкова, Татьяна Геннадьевна | 1999 |
Сателлитные ДНК цитрусовых растений | Брагвадзе, Георгий Парнаозович | 1983 |