Нейроспецифический белок 10-40-4: идентификация, выделение и некоторые физико-химические и иммунологические свойства

• Автор: Клюшник, Татьяна Павловна
• Шифр специальности: 03.00.04
• Научная степень: Кандидатская
• Год защиты: 1984
• Место защиты: Москва
• Количество страниц: 131 c. : ил

Работа выполнена в лаборатории нейрохимии и химии физиологически активных веществ (заведующий лабораторией-кандидат химических наук Дёмушкин В.П.) Всесоюзного научного центра психического здоровья АМН СССР (директор - академик Снежневский A.B.)

I. ВВЕДЕНИЕ
П. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ. Современные подходы к идентификации нейроспецифических антигенов
1. Идентификация нейроспецифических белков по их специфичности для нервной ткани
2. Направленный поиск белков, обеспечивающих уникальную структуру и организацию нервной ткани
3. Поиск нейроспецифических изоформ известных ферментов
4. Поиск нейроспецифических белков с использованием генно-инженерных методов
Ш. Материалы и методы
1У.РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЯ
§ I. Выделение нейроспецифического антигена
10-40
§ 2. Получение моноспецифических антисывороток к
нейроспецифическому антигену 10-40-4; метод иммуноферментного определения антигена
10-40
§ 3. Специфичность антигена 10-40-4 для ткани
мозга
§ 4. Видовая специфичность антигена 10-40
§ 5. Сравнительная характеристика физико-химических свойств антигена 10-40-4 из мозга
человека и крысы
§ 6. Клеточная и региональная локализация анти-

гена 10-40-4 в мозге человека
У. ОБСУЖДЕНИЕ РЕЗУЛЬТАТОВ
ВЫВОДЫ
У1 .УКАЗАТЕЛЬ ЛИТЕРАТУРЫ
на русском языке
на английском языке

ние 2-х часов 0,25 %-ным кумасси Я -250» приготовленным на 8 %-ной уксусной кислоте в 25 %-ном метаноле; избыток окраски отмывали 8 %-ной уксусной кислотой в 25 %-ном метаноле.
Окраску гелей на гликопротеиды проводили реактивом Шифф-йодная кислота (214).
Липопротеиды в гелях окрашивали реактивом Липид Кримсон
(169)
13. Электроэлюция белка из геля.
После окончания диск-электрофореза соответствующую белковую зону вырезали (положение зоны определяли в предварительных опытах), измельчали в стеклянном гомогенизаторе и проводили электроэлюцию белка из геля и концентрирование в аппарате для электрофоретического концентрирования фирмы "йско" (США.). В качестве электродного буферного раствора использовали 0,005 М натрий-фосфатный буферный раствор.
14. Аналитическое изоэлектрофокусирование.
Аналитическое изоэлектрофокусирование для определения изо-электрических точек выделенных белков проводили в аппарате "Мультифор" на фирменных пластинах 5 % полиакриламидного геля, содержащих 2 % раствор амфолинов с интервалом pH 3,5-9,5. <ш, Швеция). В качестве анодного буферного раствора использовали I М НдРО^, в качестве катодного - I М Ь1а0Н. Фокусирование проводили при постоянной мощности тока 30 ватт. Для измерения градиента pH в геле использовали поверхностный электрод 2П7-1П Швеция).