Фосфофруктовиназа при старении эритроцитов

• Автор: Смолина, Елизавета Викторовна
• Шифр специальности: 03.00.04
• Научная степень: Кандидатская
• Год защиты: 1985
• Место защиты: Красноярск
• Количество страниц: 139 c. : ил

ВВЕДЕНИЕ
Часть I. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ
ГЛАВА I. НЕКОТОРЫЕ АСПЕКТЫ МЕТАБОЛИЗМА ЭРИТРОЦИТОВ
1.1. Свойства фосфофруктокиназы
1.2. Аллостерические эффекторы фосфофруктокиназы
1.3. Кинетика фосфофрукгокиназной реакции
1.4. Энергетический обмен эритроцитов и ретикуло-цитов
1.5. Метаболизм АТФ в эритроцитах
1.6. Старение эритроцитов
Часть II.: ’СОБСТВЕННЫЕ НАСЛЕДОВАНИЯ
ГЛАВА 2. МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЙ
2.1. ^акционирование эритроцитов
2.2. Подсчет ретикулоцитов
2.3. Определение активности ФФК
2.4. Определение кинетических параметров ФФК
2.5. Определение содержания АТ§
2.6. Определение содержания АДФ
ГЛАВА 3. АКТИВНОСТЬ, КИНЕТИЧЕСКИЕ ПАРАМЕТРЫ ФОСФОФРУКТО-КИНАЗЫ, СОДЕРЖАНИЕ АТФ И АДФ ПРИ СТАРЕНИИ ЭРИТРОЦИТОВ, ПРОДУЦИРОВАННЫХ В УСЛОВИЯХ НОРМАЛЬНОГО ЭРИТРОПОЭЗА
3.1. Активность и кинетические свойства ФФК
3.2. Содержание АТФ и АДФ
ГЛАВА 4. АКТИВНОСТЬ, КИНЕТИЧЕСКИЕ ПАРАМЕТРЫ ФОСФОФРУКТОКИНАЗЫ, СОДЕРЖАНИЕ А1Ф И АДФ ПРИ СТАРЕНИИ ЭРИТРОЦИТОВ, ПРОДУЦИРОВАННЫХ В УСЛОВИЯХ НАПРЯЖЕННОГО ЭРИТРОПОЭЗА
4.1. Активность, кинетические свойства ФФК, содержание АТФ и АДФ на 7 сутки после кровопотери
- 3 ~

4.2. Активность, кинетические свойства Ф®, содержание АТФ и АДФ на 20 сутки после кровопотери
4.3. Активность, кинетические свойства ФФК на
30 сутки после кровопотери
ЗАКЛЮЧЕНИЕ
ВЫВОДЫ
ЛИТЕРАТУРА

СПИСОК УСЛОВНЫХ ОБОЗНАЧЕНИЙ И С СКРАЩЕНИЙ
АД Альдолаза
АДФ Аденозиндифосфат
АМФ Аденозинмонофосфат
АТФ Аденозинтрифосфат
АТФаза Аденозинтрифосфатаза
ГК Гексокиназа
ГАЗФ Глицероальдегид-3-фосфат
ГАЗФД Глицероальце гиц-3-фосфа тдегицро геназа
Г6Ф Глюкозо-6-фосфат
ДАФ Диоксиацетонфосфат
1,3-ДФГ I,3-дифосфоглицерат
2,3-ДФГ 2,3-дифоофоглицерат
ДФГМ дифосфоглицеромутаза
ДФГФ дифоефоглицерофосфатаза
% Константа Михаэлиса
лдг Лактатдегидрогеназа
М2С12 Магний хлористый
мк Молодые клетки
НАД Никотинамидаденинцицуклеотид
НАДН Никотинамидадениндицуклеотид восстановленный
НАДФ Никотинамндадениндинуклеотидфосфат
НАД® восстановленный
ГГаСІ Натрий хлористый
ОЭМ Общая эритроцитарная масса
ПФ Пирофосфат
ПК Шруваткиназа
РІФ Рибозо-1-фосфат
Р5Ф Рибозо-5-фосфат

тов измерялась оптическая плотность контрольной пробы (Е^, содержащей 2,92 мл буферного раствора, 0,04 мл гексокиназы и 0,04 мл глюкозо-6-фосфатдегидрогеназы. Полученная величина экстинкции складывалась с Е^ для получения величины начальной экстинкции реакционной пробы: Е^ = Ддлее находилось изменение оптической плотности: Е = Ез
Количество АТФ рассчитывалось по следующей формуле:
Е • 24 С
6,22 • <1 • Нъ , где
24 - коэффициент, учитывающий разведение эритроцитов в пробе;
6,22 - коэффициент экстинкции для НАДФ Н при длине волны 340 нм (см /мкмоль);
Нъ - гематокрит;
а - толщина кюветы (см).
Количество АТФ выражалось в мкмолях на I мл упакованных эритроцитов.
Результаты исследования были обработаны биометрически и оценены с помощью критерия Стьюдента (5,90,94).
11.6. Определение содержания АДф
Определение содержания АДФ во фракциях молодых, старых клеток и общей эритроцитарной массе у интактных кроликов, а затем на 7 или 20, или 30 сутки после кровопускания проводилось методом Jaworek (2X6).
В реакционной среде, содержащей фосфонолпируват, пируват-ниназу, лактатдегидрогеназу, АМФ, НАДН, АДФ под действием пируваткиназы фосфорилируется в АТФ с образованием пирувата.