+
Действующая цена700 499 руб.
Товаров:
На сумму:

Электронная библиотека диссертаций

Доставка любой диссертации в формате PDF и WORD за 499 руб. на e-mail - 20 мин. 800 000 наименований диссертаций и авторефератов. Все авторефераты диссертаций - БЕСПЛАТНО

Расширенный поиск

Эпитопный анализ и исследование иммунохимических свойств тропонина I из сердца человека

  • Автор:

    Филатов, Владимир Львович

  • Шифр специальности:

    03.00.04

  • Научная степень:

    Кандидатская

  • Год защиты:

    1998

  • Место защиты:

    Москва

  • Количество страниц:

    126 с. : ил.

  • Стоимость:

    700 р.

    499 руб.

до окончания действия скидки
00
00
00
00
+
Наш сайт выгодно отличается тем что при покупке, кроме PDF версии Вы в подарок получаете работу преобразованную в WORD - документ и это предоставляет качественно другие возможности при работе с документом
Страницы оглавления работы


СПИСОК ИСПОЛЬЗУЕМЫХ СОКРАЩЕНИЙ
ВВЕДЕНИЕ
ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ
Белки тропонинового комплекса и их роль в регуляции мышечного сокращения
Тропонин
Общая характеристика
Участки взаимодействия Тп1 с актином и ТпС
Участки взаимодействия Тп1 с ТпТ
Фосфорилирование Тп1
Физиологический эффект фосфорилирования Тп1
Тропонин Т
Структура и изоформный состав тропонина Т
Взаимодействие тропонина Т с тропомиозином
Взаимодействие тропонина Т с тропонином
Взаимодействие тропонина 'Г с тропонином С
Роль тропонина Т в процессе регуляции мышечного сокращения
Фосфорилирование тропонина Т
Тропонин С
Общая характеристика и изоформный состав
Пространственное строение ТпС
СООН-концевой домен
Центральная СХ-спираль
ИНг-концевой домен
Молекулярный механизм инициации сокращения. Структурные и функциональные различия скелетной и
сердечной изоформ ТпС
Участки взаимодействия ТпС с остальными компонентами тонкого филамента
Молекулярная модель мышечного сокращения
ТМ КАК БИОХИМИЧЕСКИЙ МАРКЕР ИНФАРКТА МИОКАРДА
Моноклональные антитела и способы определения их эпитопной специфичности
МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ
Материалы
Методы
Твердофазный синтез пептидов на целлюлозной основе
Определение участков взаимодействия антител и Тн1
Моделирование некроза сердечной ткани
Иммунофлуориметрия
ДСН-гель-электрофорез по методу Лэммли (ЬаеттЦ, 1970)
Вестерн-блоттинг
Иммунохимическая окраска белков, иммобилизованных на нитроцелпюлозной мембране
Илшобилизация человеческого сердечного ТпС на ВгСМ-акпшвированиой сефарозе
Исследование взаимодействия Тн1 с иммобилизованным ТпС
Фосфорилирование Тн1 сАМР-зависимой протеинкиназой
Определение участков взаимодействия Тн1 с ТпС
РЕЗУЛЬТАТЫ И ИХ ОБСУЖДЕНИЕ
Синтез библиотеки пептидов ТМ и эпитопное картирование моноклональных антител
Определение участков взаимодействия ТТЛ с ТыС
Изучение биохимических факторов, оказывающих влияние на взаимодействие ТтЛ с антителами
Протеолшпическая деградация Тп1 и ее влияние на связывание с моноклональными антителами
Фосфорилирование Тп1 сАМР-зависимой протеинкиназой и его влияние на взаимодействие с антителами
ВЫВОДЫ
СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ
БЛАГОДАРНОСТИ

Список используемых сокращений
Тп1 -Тп1 ТпС - ТпС ТпТ-ТпТ
ИП - ингибиторный пептид
АТР - аденозинтрифосфорная кислота
сАМР - цикл о -3'-5'-аденозинмонофосфорная кислота
ПКА - сАМР-зависимая протеинкиназа
ПКС - Са2+-фосфолипод-зависимая протеинкиназа
ПКв - свМР-зависимая протеинкиназа
свМР - цикпо -3'-5'-гуанозинмонофосфорная кислота
ИМ - инфаркт миокарда
СКМВ - изоформа МВ креатинфосфокиназы
ФСБТ- фосфатно-солевой буфер, содержащий Твин
ДСН - додецилсульфат натрия
ФМСФ - фенилметилсульфонилфторид
ЭГТА - (Этилендиокси)диэтилендинитрилотетрауксусная кислота
ЭДТА -этилендиаминтетрауксусная кислота
ДТТ- дитиотреитол
МАТ - моноклональные антитела
БРОТ-метод - метод одновременного множественного твердофазного синтеза пептидов на целлюлозной основе

et. al., 1998). Взаимодействие TnC с белком-мишенью, то есть с Tnl, приводит к частичному разрушению вторичной структуры центральной а-спирали на участке аминокислотной последовательности, ограниченном остатками 84-91 (Houdusse et. al., 1997). Таким образом, при образовании комплекса TnC-Tnl по-видимому, происходит сгибание центральной а-спирали, позволяющее обоим доменам ТпС вступать в контакт с белком-мишенью. Сближение двух глобулярных доменов ТпС, происходящее при взаимодействии с Tnl, детектировалось также по изменению флуоресценции пробы, ковалентно присоединенной к аминокислотному остатку Cys-98, расположенному в С-концевом домене. При этом насыщение низкоаффинных N-концевых катион-связывающих сайтов ТпС ионами Са2+ приводило к изменению параметров флуоресценции пробы, расположенной в С-концевом домене ТпС (Grabarek et. al., 1986).
NHi-кониевой домен
N-концевой домен содержит два катион-связывающих сайта, связывающих только ионы Са2+ с константой аффинности »1X105 М'1 (Potter and Gergely, 1975). Предположение о регуляторной роли этих сайтов в процессе мышечного сокращения высказывалось еще Поттером и Гергели в 1975 году на основании исследования зависимости активности акто-миозиновой АТРазы от концентрации ионов Са2+ при фиксированных концентрациях ионов Mg2+ (Potter and Gergely, 1975). В дальнейшем эта гипотеза получила многочисленные экспериментальные подтверждения и в настоящее время общепринята (Гусев, 1995, Grabarek et. al., 1992, Farah and Reinach, 1995, Tobacman, 1996). Меньшая по сравнению C-концевыми сайтами TnC аффинность N-концевых сайтов к ионам Са2+ может быть объяснена иной первичной структурой Са2+-связывающих петель (Houdusse et. al., 1997). Так, в третьем положении Са2+-связывающих петель 1 и 2 ТпС расположены аминокислотные остатки Gly-31 (петля 1) и Ser-67 (петля 2), тогда как в 3 и 4 Са2+-связывающих петлях в соответствующем положении расположены остатки аспарагиновой кислоты (Houdusse et. al., 1997). Кроме того, N-концевой домен ТпС содержит дополнительный спиральный участок - так называемую N-спираль, которая играет важную роль в стабилизации структуры всего домена, так как ее удаление путем сайт-направленного мутагенеза приводит к уменьшению сродства

Рекомендуемые диссертации данного раздела

Время генерации: 0.125, запросов: 967