Липиды эритроцитов крови при формировании наследуемой кардиальной патологии

• Автор: Новгородцева, Татьяна Павловна
• Шифр специальности: 03.00.04
• Научная степень: Докторская
• Год защиты: 1999
• Место защиты: Владивосток
• Количество страниц: 268 с. : ил.

Глава 1. Обзор литературы
1.1 .Липиды крови. Общие сведения
1.2.Дислиидемии
1.3 .Фенотипические факторы и обмен липидов
1.3.1.Возрастные и половые различия в уровнях липидов крови
1.3.2.Влияние генетических и средовых факторов на уровень и состав липидов крови
Глава 2. Материалы и методы исследования
2.1.Биологические объекты
2.1.1 .Лабораторные животные'
2.1.2.Объекты клинических исследований
2.2.Исследуемый материал
2.2.1 .Получение фракций крови
2.2.2.Выделение и культивирование гладкомышечных клеток интимы аорты человека
2.3.Приборы и оборудование
2.4.Методы исследования
2.4.1 .Клинико-лабораторные методы исследования
2.4.2.Клинико-биохимические методы определения показателей липидного обмена
2.4.3.Экстракция липидов из эритроцитов
2.4.4.Микротонкослойная хроматография липидов
2.4.5.Анализ состава жирных кислот
2.4.6.Определение факторов атерогенности крови
2.4.7.Морфологические исследования
2.4.8.Методы математической обработки данных
2.5.Объем выполненных исследований

Результаты и обсуждение
Глава 3. Характеристика групп наблюдения
3.1. Характеристика экспериментальных моделей
3.1.1.Формирование экспериментальных групп наблюде- 64 ния
3.1.1.1.Характеристика состава липидов сыворотки крови 68 экспериментальных животных
3.1.1.2.Морфологическое исследование сердца у экспери- 70 ментальных животных с моделированной кардио-вазопатией
3.2.Формирование клинических групп наблюдения
3.2.1 .Формирование группы здоровых лиц
3.2.2 .Клиническая характеристика членов семей
Глава 4. Состав липидов эритроцитов при развитии семейной
кардиальной патологии
4.1 .Выделение диагностических маркеров
4.2.Онтогенетические и половые закономерности формирования состава липидов эритроцитов в норме
4.2.1.Характеристика состава липидов эритроцитов у ин-тактных крыс различных возрастно-половых групп
4.2.2.Характеристика состава липидов эритроцитов группы здоровых лиц
4.2.2.1.Характеристика состава липидов эритроцитов здоровых лиц различных возрастно-половых групп
4.3.Закономерности наследования состава липидов эритроцитов при формировании кардиальной патологии
4.3.1.Закономерности наследования состава липидов эрит
роцитов у экспериментальных крыс
4.3.1.1.Характеристика состава липидов эритроцитов крыс
с моделированной кардиовазопатией
4.3.1.2.Характеристика состава липидов эритроцитов у потомства крыс с инфарктоидной кардиовазопатией
в различных периодах постнатального онтогенеза
4.3.1.3.Наследование изменений состава липидов эритроцитов крыс с моделированной кардиовазопатией в последующее поколение
4.3.2.Закономерности наследования состава липидов эритроцитов в семьях больных кардиальной патологией
4.3.2.1.Характеристика состава липидов эритроцитов у пробандов с кардиальной патологией
4.3.2.2.Характеристика состава липидов эритроцитов у потомков больных кардиальной патологией
4.3.2.3.Атерогенный эффект сыворотки крови членов семей с наследуемой кардиальной патологией (in vitro)
4.4.Многомерный статистический анализ для выделения вариантов нарушений состава липидов в семьях с кардиальной патологией
4.5.Взаимосвязь факторов образа жизни и наследуемых изменений показателей липидного обмена в семьях с кардиальной патологией
Заключение
Выводы
Список используемой литературы

рошо перемешивая, осаждали центрифугированием, супернатант отбрасывали.
2.2.2. Выделение и культивирование гладкомышечных клеток интимы аорты человека
Клетки получали из аорт мужчин и женщин возраста 40-65 лет в течение 1,5-3 часов после внезапной смерти. Причиной смерти в подавляющем большинстве случаев была острая сердечно-сосудистая недостаточность. Субэндотелиальные гладкомышечные клетки выделяли из непораженных участков интимы путем обработки коллагеназой и культивировали в соответствии с методом А.Н. Орехова и соавторов (Orekhov A.N. et al., 1985). В стерильных условиях после механического удаления адвентиции аорту рассекали вдоль и промывали в среде 199, содержащей по 100 ед/мл пенициллина, стрептомицина и 2,5 мкг/мл фунгизона. Из лоскута аорты вырезали участки, не имеющие видимых атеросклеротических поражений. Затем, с помощью пинцетов интиму отделяли от медии. Полученный материал пинцетом разделяли на волокна. К измельченной интиме добавляли 0,15% раствор коллагеназы II типа (Worthington Diagnostic System, США) в среде 199, содержащей 10% эмбриональной телячьей сыворотки (Flow, Великобритания), 2 мМ L-глутамин, 100 ед/мл пенициллина, 100 ед/мл стрептомицина, 2.5 мкг/мл фунгизона (все реактивы Grand Island Biological Company GIBCO, СП1А) из расчета 10 мл раствора фермента на 1 г сырой ткани. Инкубацию интимы с коллагеназой проводили на водяной бане при 37°С с постоянным перемешиванием до практически полного растворения ткани, что обычно занимало 2-3 часа. Полученную суспензию клеток фильтровали через нейлоновую сетку и центрифугировали при 4°С в течение 20 мин при 200 g. Осажденные клетки промывали в 10 мл ростовой среды 199, содержащей антибиотики и 10% эмбриональную телячью сыворотку, повторно центрифугировали при тех же условиях. Осадок ресуспендировали в 10 мл ростовой среды и производили подсчет полученного количества клеток в счетной