Исследование влияния пептидных гормонов и биогенных аминов на активность ферментов углеводного и липидного обменов Periplaneta americana и Tenebrio molitor

• Автор: Семина, Наталья Владимировна
• Шифр специальности: 03.00.04
• Научная степень: Кандидатская
• Год защиты: 2000
• Место защиты: Москва
• Количество страниц: 151 с. : ил.

Содержание
ВВЕДЕНИЕ
Глава 1. Структура и физиолого-биохимические функции пептидных гормонов и биогенных аминов у насекомых (обзор литературы)
1.1 Структура и функции пептидных гормонов насекомых
1.1.1 Адипокинетические гормоны насекомых
1.1.2 Миотронные пептиды насекомых. Структура, метаболизм и механизм действия
1.1.2.1. Проктолин
1.1.2.2 Тахикинины
1.1.2.3 Пирокинины
1.1.2.4 Лейкокинины и ахетакинины
1.1.2.5 Сульфакининподобные олигопептиды
1.1.2.6 Г руппа Г: М М -ам и д-1 юдоб 11 ы х пептидов; кардиоактивные
пептиды
1.1.2.7 Опиоидныс пептиды насекомых
1.1.3 Прочие белковые и пептидные гормоны насекомых
(диуретические и вазопрессинподобные пептиды, гормоны стероидогенеза, нейропарсины, аллатотропины и аллагостатины, феромонотропные гормоны )
1.2 Биогенные амины насекомых и их функции
1.3. Пептидные гормоны и биогенные амины как инсектициды V
поколения
1.4. Гормональная регуляция активности ферментов у насекомых
и проблемы резистентности
Глава 2. Материалы и методы.
2.1 Материал для исследования.

2.2 Введение насекомым гормональных препаратов
2.3 Приготовление экстракта растворимых белков
2.4. Определение активности ферментов
2.4.1 Электрофоретические методы определения активности а-
глицерофосфатдегидрогеназы, лактатдегидрогеназы, малатдегидрогеназы, комплекса кислых фосфатаз
2.4.2 Спсктрофотометрические методы определения активности а-глицерофосфатдегидрогеназы, лактатдегидрогеназы, малатдегидрогеназы и комплекса кислых фосфатаз.
Определение активности множественных форм ферментов, расчет денситограмм. Определение и расчет относительной электрофоретической подвижности белковых фракций
2.5 Исследование влияния пептидных гормонов на уровне
транскрипции и трансляции
2.6. Статистическая обработка полученных данных
1 лава 3. Сравнительное исследование воздействия адипокинетичеких гормонов II (Ь и 8), нроктолииа и октопамина на активность ферментов насекомых
3.1 Сравнительное исследование влияния адипокинетических
гормонов 11 Ьоси81а пнцга1опа (АКГ II Ь) и БсЫзШсегса gregaria (АКТ II Б) на активность кислофосфатазного и дег идрогеназного комплекса ферментов жирового тела и грудных мышц имаго Репр1апе1а атепсапа
3.2. Сравнительное исследование влияния пентапептида проктолина
и адипокинетического гормона II (Б) на активность кислофосфатазного и дегидрог еназного комплекса ферментов жирового тела и грудных мышц имаго Репр1апе1а атепсапа
3.3. Сравнительное исследование воздействия адипокинетического
гормона АКГ (Б) и биогенных аминов (октопамина) на активность ферментов
дегидрогеназного комплекса жирового тела и грудных мышц имаго американского таракана
3.4. Исследование механизма действия адипокинетического
гормона II (Б)
3.4.1 Влияние АКГ II (Б), актиномицина Д и пуромицина на
активность а-глицерофосфатдегидрогеназы, малатдегидрогеназы и лактатдегидрогеназы жирового тела имаго Репр1апе1а атепсапа
3.4.2 Влияние АКГ II (Б), акгиномицина Д и пуромицина на активность а-глицерофосфатдегидрогеназы, малатдегидрогеназы и лактатдегидрогеназы грудных мышц имаго Репр1апе!а
атепсапа
Глава 4. Сравнительное исследование биохимического эффекта опиоидных пептидов и их аналогов у насекомых.
4.1 Сравнительное исследование влияния природных (мет- и лей-
энкефалинов) и синтетического опиоида (Д(ала)2-энкефалина) на активность кислофосфатазного комплекса ферментов жирового тела и ірудньїх мышц имаго американского таракана и мучного хрущака
4.2. Исследование механизмов действия мет- и лей-
энкефалинов по отношению к кислой фосфатазе жирового тела и грудных мышц имаго американского таракана с использованием ингибиторов транскрипции и трансляции
4.3. Сравнительный анализ влияния мет-, лей- и Д(ала)2-энкефали-
на на активность дегидрогеназного комплекса ферментов жирового тела и грудных мышц имаго американского таракана и мучного хрущака
4.3.1 Сравнительный анализ влияния мет-, лей- и Д(ала)2
энкефалина на активность а-глицерофосфатдегидрогеназы жирового тела и грудных мышц имаго американского таракана и мучного хрущака
4.3.2 Сравнительный анализ влияния мет-, лей- и Д(ала)2
энкефалина на активность малатдегидрогеназы жирового тела и грудных мышц имаго американского таракана и мучного хрущака
4.3.3 Сравнительный анализ влияния мет-, лей- и Д(ала)2
энкефалина на акгивность лактатдегидрогеназы жирового тела и грудных мышц имаго американского таракана и мучного хрущака

рецепторами, а также идентифицировать среди модифицированных С-
терминальных аналогов ахетакининов - суперагониста следующей структуры:
Ала - Фен - Фен - Про - Три - Глу - №Ь.
Молекулярные механизмы трансмембранного поведения лейкокининов опосредованы аденилатциклазной системой, фосфоинозитидной (фосфолипаза С-зависимая) и системой Са2+-зависимых каналов как гладкомышечных, так и скелетных клеток, что обеспечивает при отмеченной гетерогенности кининовых рецепторов и наличие видовой специфичности, способ участия нейропептидов этого семейства в регуляции множества физиологических процессов (Fogg et al, 1990; Schoofs et al, 1992; 1997).
1.1.2.5. Сульфакининподобные олигопептиды.
Группу сульфакининовых олигопептидов насекомых, подобных гастрин-холецистокининам позвоночных, представляется целесооборазным выделить в отдельное семейство миотропных пептидов. Гастрин и родственные ему пептиды, а также холецистокинины позвоночных по спектру регуляторных функций представляют собой поливалентные олигопептиды. Физиологические эффекты пептидов этой группы связаны с регуляцией функций пищеварительной системы, сократительной активности гладкой мускулатуры, секрецией пищеварительных ферментов и поведенческих физиологических актов (Гомазков, 1995).
Первые сульфакинины были выделены из таракана Leucophada maderae в 1986 году и получили название лейкосульфакинин и лейкосульфакинин II (Nachman et al, 1986). К настоящему времени установлена структура сульфакининподобных пептидов из трех видов отряда Blattodea, двух видов Ortlioptera и Diptera и близка к расшифровке структура сульфакипинов предтавителя Lepidoptera - Helicoverpa annigera (East et al, 1997). Первичная структура 6-ти сульфакипинов насекомых, а также гастрина II и холецистокинина ХЦК-12 позвоночных животных приведена ниже: