Влияние тиолмодифицирующих и полмерных соединений на глутатион-S-трансферазную систему эритроцитов крыс

• Автор: Смертина, Маргарита Николаевна
• Шифр специальности: 03.00.04
• Научная степень: Кандидатская
• Год защиты: 2000
• Место защиты: Санкт-Петербург
• Количество страниц: 135 с.

ОББО -ГП ГР
2,4ДНХБ 1,2ДХНБ ЭК

АЗПО -ИЕМ -БСФ
бимв
СПИСОК СОКРАЩЕНИЙ
глутатион-Б-трансфераза дисульфид
глутатион восстановленный глутатион окисленный глутатионпероксидаза глутатионредуктаза
- 2,4 - динитро-1-хлорбензол
- 1,2 - дихлор-4-нитробензол этакриновая кислота микросомальная ГТ перекисное окисление аскорбатзависимое перекисное окисление И-этилмалеимид бромсульфофталеин
1,4-дитиотреитол
5,5 '-дитиобис(2-нитробензойная) кислота нитробензоат-анион
ОГЛАВЛЕНИЕ
ВВЕДЕНИЕ
ГЛАВА 1. ОБЗОР ЛИТУРАТУРЫ.
СТРОЕНИЕ ГЛУТАТИОН-Б-ТРАНСФЕРАЗЫ. ВЛИЯНИЕ ЭФФЕКТОРОВ НА АКТИВНОСТЬ ИЗОФОРМ ГТ
1Л. Структура фермента
1.2. Классификация и номенклатура
1.3. Множественные формы ГТ млекопитающих
1.3.1. Изоформы ГТ крысы
1.3.2. Изоформы ГТ человека
1.3.3. Микросомальные формы ГТ млекопитающих
1.4.1. Сравнительная характеристика ГТ Pi класса
1.4.2. Глутатион-Б-трансфераза эритроцитов человека и крысы
1.5. Влияние ингибиторов на активность ГТ крысы и человека
1.6. Влияние активаторов на активность МГТ
ГЛАВА 2. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ
2.1. Исследования in vitro
2.1.1. Тиолмодифицирующие соединения
2.1.2. Определение типа активации ГТ под действием ДФДС
2.1.3. Полимерные и мономерные соединения
2.2. Исследования in vivo
2.3. Подготовка биологического материала
2.4. Определение активности ГТ
2.5. Определение количества GSH в крови
2.6. Классификация реактивов
РЕЗУЛЬТАТЫ И ОБСУЖДЕНИЕ.
ГЛАВА 3. ВЛИЯНИЕ ТИОЛМОДИФИЦИРУЮЩИХ СОЕДИНЕНИЙ НА АКТИВНОСТЬ ГТ И СОДЕРЖАНИЕ GSH ЭРИТРОЦИТОВ КРЫС

3.1. Влияние ароматических тиолов на активность ГТ и содержание GSH эритроцитов крыс
3.2. Влияние ПО на активность ГТ и содержание GSH эритроцитов крыс
3.3. Влияние алифатических ДС и SH-модификаторов на активность ГТ и содержание GSH эритроцитов крыс
3.4. Структурно-кинетические аспекты модифицирующего действия ДС на активность ГТ
3.5. Заключение ГЛАВЫ
ГЛАВА 4. ВЛИЯНИЕ ПРОИЗВОДНЫХ ИМИДАЗОЛА И ФЕНОЛЬНЫХ АНТИОКСИДАНТОВ НА АКТИВНОСТЬ ГТ И СОДЕРЖАНИЕ GSH ЭРИТРОЦИТОВ КРЫС
4.1. Влияние полимерных и мономерных соединений на активность ферментов системы глутатиона и содержание GSH эритроцитов крыс
4.1.1. Действием препаратов in vivo
4.1.2. Действие препаратов на активность ГТ in vitro
ВЫВОДЫ
СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ

ностью ингибируют трансфертную активность 3-3 и 3-4 форм ГТ крысы по отношению к 3,4-динитрохлорбензолу [24]. ЭК является конкурентным ингибитором ГТ Alpha и Ми классов крысы и человека по отношению к 2,4ДНХБ, J50 = 0,3-6,0 рМ. Прединкуба-ция с S - гексилглутатионом снимает ингибирование ЭК. Монобром-производное ЭК не приводит к ингибированию, тогда как дибром -и дигидробромпроизводное ЭК ингибируют ГТ Pi крысы и человека на 90-96 % к 2,4ДНХБ; а дибромпроизводное ЭК также является сильным ингибитором для ГТМи класса [140]. Гидроперекись кумо-ла является субстратом для ГТ Alpha и в тоже время селективным ингибитором ГТ Ми класса человека по отношению к 2,4ДНХБ. Гидроперекись кумола наиболее интенсивно ингибирует Ми-форму тех индивидуумов, у которых снижена экспрессия ферментов класса Ми и поэтому это вещество может быть использовано для обнаружения индивидуумов с дефицитом Ми формы ГТ [166].
В список ингибиторов ГТ также входят метаболиты эндогенного происхождения, называемые несубстратными лигандами. Билирубин и биливердин, образующиеся в ходе распада гема, являются ингибиторами катионных ГТ печени человека по отношению к 2,4ДНХБ (К* = 6,0 и1,5 рМ соответственно) [44, 91, 167]. Некоторые эндогенные порфирины ингибируют активность ГТ по неконкурентному типу в зависимости от концентрации. Субьединицы 1, 2, 3 крысы имеют гидрофобные участки для связывания гема и порфиринов. Изменение ферментативной активности под действием порфиринов различны при использовании различных субстратов. Изоформа 2-2 крысы ингибируется под действием порфиринов по отношению к 2,4ДНХБ в качестве субстрата, а при использовании гидроперекиси