+
Действующая цена700 499 руб.
Товаров:
На сумму:

Электронная библиотека диссертаций

Доставка любой диссертации в формате PDF и WORD за 499 руб. на e-mail - 20 мин. 800 000 наименований диссертаций и авторефератов. Все авторефераты диссертаций - БЕСПЛАТНО

Расширенный поиск

Регуляция полиферментных комплексов дегидрогеназ 2-оксокислот

  • Автор:

    Буник, Виктория-Лариса Ивановна

  • Шифр специальности:

    03.00.04

  • Научная степень:

    Докторская

  • Год защиты:

    2001

  • Место защиты:

    Москва

  • Количество страниц:

    319 с. : ил

  • Стоимость:

    700 р.

    499 руб.

до окончания действия скидки
00
00
00
00
+
Наш сайт выгодно отличается тем что при покупке, кроме PDF версии Вы в подарок получаете работу преобразованную в WORD - документ и это предоставляет качественно другие возможности при работе с документом
Страницы оглавления работы

СПИСОК ИСПОЛЬЗУЕМЫХ СОКРАЩЕНИЙ
ВВЕДЕНИЕ
1 ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ
1.1 Общие сведения о комплексах дегидрогеназ 2-оксокислот и катализируемом ими процессе
1.2 Архитектура комплексов
1.3 Механизм сопряжения каталитических стадий
1.4 Механизм отдельных реакций, катализируемых компонентами комплекса
1.4.1 Окислительное декарбоксилирование 2-оксокислот с участием El и липоильного домена Е2 (Реакции 1 и 2)
1.4.2 Деацилирование ацилдигидролипоильного остатка в каталитическом центре Е2 (Реакция 3)
1.4.3 Окисление дигидролипоильного остатка в активном центре ЕЗ (Реакции 4 и 5)
1.5 Положение комплексов дегидрогеназ 2-оксокислот в системе метаболизма и общие принципы регуляции комплексов
2 МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ
2.1 Выделение ферментных препаратов
2.1.1 Выделение полных комплексов дегидрогеназ 2-оксокислот
2.1.2 Выделение индивидуальных дегидрогеназ 2-оксокислот
2.1.3 Выделение митохондриального тиоредоксина из сердца свиньи
2.2 Сайт-направленный мутагенез Е1 о E. coli
2.3 Химическая модификация белка
2.4 Определение ферментативных активностей
2.5 Анализ ингибирования начальных скоростей реакции
2.6 Анализ кривых хода реакции
2.7 Моделирование трехмерных структур белков
2.8 Электронный парамагнитный резонанс и ловушки радикалов
2.9 Измерение продукции комплексами супероксид анион радикала

2.10 Иммобилизация 2-оксоглутаратдегидрогеназы и получение активного
мономера
3 РЕЗУЛЬТАТЫ И ОБСУЖДЕНИЕ
3.1 Структурно-функциональная роль гетерологических взаимодействий дегидрогеназ 2-оксокислот в составе комплексов
3.2 Структура активного центра и фермент-субстратного комплекса дегидрогеназ 2-оксокислот
3.2.1 Анализ гомологии первичных структур
3.2.2 Связывание кофермента
3.2.3 Химическая модификация в выявлении функциональных групп
3.2.4 Структура комплекса с 2-оксосубстратом по данным ингибирования начальной скорости реакции структурными аналогами субстрата
3.2.5 Образование медленно диссоциирующих комплексов со структурными аналогами субстрата, содержащими 2-оксо группу
3.2.6 Инактивация 2-оксоглутаратдегидрогеназы в ходе ферментативной реакции
3.2.7 Детерминанты специфичности дегидрогеназ 2-оксокислот в отношении 2-оксосубстратов
3.2.8 Механизм взаимодействия дегидрогеназ 2-оксокислот с 2-оксо субстратом и роль медленных по сравнению с катализом конформационных изменений в регуляции
3.3 Сопряжение каталитических стадий в регуляции активности комплексов дегидрогеназ 2-оксокислот
3.3.1 Инактивация при накоплении интермедиата реакции - связанного с Е2 дигидролипоата
3.3.2 Образование радикалов в ходе анаэробного катализа
3.3.3 Продукция активных форм кислорода
3.4 Регуляция комплексов в системе метаболизма

3.4.1 Ингибирование в результате метаболизма фосфонопроизводных
аминокислот
3.4.2 Ингибирование продуктами метаболизма галогенированных алкенов.
3.4.3 Ти^едоксин-зависимая регуляция
ЗАКЛЮЧЕНИЕ
ВЫВОДЫ
СПИСОК ЦИТИРУЕМОЙ ЛИТЕРАТУРЫ
ПРИЛОЖЕНИЕ

соединения и в среду освобождается ацетальдегид. Таков механизм реакции, катализируемой бактериальными пируват-, 2-оксоглутарат- и бензоилформат-декарбоксилазами, продуцирующими соответствующие альдегиды (Iding et al., 1998). Промежуточный интермедиат может также вступать в реакцию конденсации с карбонильными соединениями типа ацетальдегида и глиоксиловой кислоты (Рис.5, путь 4). Такие реакции ацилоиновой конденсации катализируются, в частности, Е1р и Elo (Schlossberg ct al, 1970; O'Fallon and Brosemer, 1977; Khailova et al., 1983) и могут иметь физиологическое значение (Немеря и др., 1988). В случае окислительного пути превращения активного альдегида (Рис.5, пути 7-10) необходимо присутствие акцепторов восстановительных эквивалентов. Возможно как одноэлектронное (пути 7, 10), так и двухэлектронное (пути 8, 9) окисление. Первое наблюдали при электрохимическом окислении (Barletta et al., 1990; Nakanishi et al., 1997) и при действии ферредоксин-зависимых оксидаз 2-оксокислот (Docampo et al., 1987; Menon and Ragsdale, 1997; Adams and Kletzin, 1996). Очевидно, такой тип окисления наблюдается и при окислении интермедиата одноэлектронными акцепторами типа феррицианида. При действии двухэлектронных акцепторов интермедиат также может окисляться путем двух последовательных одноэлектронных переносов, как в пируватоксидазах (Tittman et al., 2000). С другой стороны, в этом случае возможно и восстановление путем переноса гидрид-иона, как, по-видимому, происходит при восстановлении липоата (Frey et al., 1989) или дихлорфенолиндофенола. Использование искусственных акцепторов электронов: феррицианида и дихлорфенолиндофенола - для исследования окислительного декарбоксилирования 2-оксокислот было предложено Сэнэди (Sanadi et al., 1952; Sanadi, 1953) и широко применяется при измерении активности Е1 как в изолированном состоянии, так и в составе комплекса. При этом ТПФ регенерируется вследствии гидролиза. По результатам модельных исследований, связь окисленного субстратного фрагмента - ацила - с ТПФ легко гидролизуется и не должна лимитировать скорость модельной реакции ферментативного окисления 2-оксокислот (White and Ingraham, 1962). Таким образом, применение

Рекомендуемые диссертации данного раздела

Название работыАвторДата защиты
Характеристика эякулята в оценке репродуктивных возможностей человека Комарова, Марина Валериевна 1999
Межмолекулярное узнавание в глобулярных белках Брукхейвенского банка данных Линде, Дмитрий Михайлович 1999
Сателлитные ДНК цитрусовых растений Брагвадзе, Георгий Парнаозович 1983
Время генерации: 0.172, запросов: 967