Рековерин как паранеопластический антиген при раке легких

• Автор: Бажин, Александр Владиславович
• Шифр специальности: 03.00.04
• Научная степень: Кандидатская
• Год защиты: 2002
• Место защиты: Москва
• Количество страниц: 112 с. : ил

Памяти отца Владислава Бажина посвящаю эту работу

СОДЕРЖАНИЕ
СПИСОК СОКРАЩЕНИЙ
ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ “Паранеопластические (онконевральные)
антигены”
Введение
1. РНК-связывающие белки и соответствующие им неврологические синдромы
1.1. Ни-антигены
1.2. ^-антигены
2. ДНК-связывающий белок Уо-антиген и паранеопластическая дегенерация мозжечка
3. Потенциалзависимые кальциевые каналы и миастенический синдром Ламберта-Итона
4. Потенциалзависимые калиевые каналы и нейромиотония.,
5. Ацетилхолиновый (никотиновый) рецептор и миастения
6. Амфифизин и синдром “скованного человека”
7. Рековерин и паранеопластическая дегенерация сетчатки
7.1. Рековерин как белок зрительной трансдукции
7.2. САБ-антиген
7.3. Модельные системы ретинопатии и САР-синдрома, опосредованные аутоантителами против рековерина

7.4. Экспрессия рековерина раковыми клетками приводит к появлению аутоантител против рековерина и развитию рети-
нопатии у онкологических больных
7.5. Механизмы дегенерации фоторецепторных клеток при синдроме CAR
МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ
1. Реактивы
2. Материалы
3. Аналитические процедуры
3.1. Определение концентрации белков
3.2. SDS-электрофорез в полиакриламидном геле
3.3. Нативный электрофорез в полиакриламидном геле
3.4. Иммуноблфгтйнг
3.5. ELISA
3.5.1. Определение антител
3.5.2. Определение антигена
3.6. Цитогистохимический анализ сетчатки глаза
3.7 Цитогистоиммунохимический анализ серийных парафиновых срезов опухолевых тканей
3.8 Выявление апоптотических клеток в ткани раковой опухоли
4. Получение рекомбинантного миристоилированного рековерина

Как показано в “Обзоре литературы”, было принято считать, что ААР могут быть выявлены в сыворотке крови пациентов с MKKJ1 только при одновременном присутствии у них паранеопластической дегенерации сетчатки. Однако серийный анализ сыворотки крови пациентов с MKKJ1 вне зависимости от наличия у них неврологического синдрома к моменту начала настоящей работы проведен не был. Отсюда первой задачей нашего исследования было провести такой анализ и подтвердить или опровергнуть вышеупомянутое утверждение. И в случае обнаружения ААР в отсутствие синдрома CAR оценить частоту их встречаемости у пациентов с MKKJ1. Две другие задачи состояли в оценке частоты экспрессии рековерина в клеточных линиях и опухолях МККЛ, поскольку до этого были описаны только единичные случаи подобного рода.
Итак, перед началом настоящей работы нами были поставлены следующие задачи:
1. Исследовать возможность присутствия аутоантител против рековерина в крови пациентов с диагнозом рак легких в отсутствие паранеопластической дегенерации сетчатки.
2. Провести серийный анализ образцов сыворотки крови больных мелкоклеточным и немелкокпеточным раком легких на присутствие аутоантител против рековерина и оценить частоту встречаемости этих аутоантител при раке легких.