+
Действующая цена700 499 руб.
Товаров:
На сумму:

Электронная библиотека диссертаций

Доставка любой диссертации в формате PDF и WORD за 499 руб. на e-mail - 20 мин. 800 000 наименований диссертаций и авторефератов. Все авторефераты диссертаций - БЕСПЛАТНО

Расширенный поиск

Разработка иммунохимических методов определения гербицидов

  • Автор:

    Язынина, Елена Валентиновна

  • Шифр специальности:

    03.00.04

  • Научная степень:

    Кандидатская

  • Год защиты:

    2003

  • Место защиты:

    Москва

  • Количество страниц:

    165 с. : ил

  • Стоимость:

    700 р.

    499 руб.

до окончания действия скидки
00
00
00
00
+
Наш сайт выгодно отличается тем что при покупке, кроме PDF версии Вы в подарок получаете работу преобразованную в WORD - документ и это предоставляет качественно другие возможности при работе с документом
Страницы оглавления работы


ОГЛАВЛЕНИЕ
СПИСОК СОКРАЩЕНИЙ
ВВЕДЕНИЕ
Глава 1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ
Экологический мониторинг гербицидов
Характеристика объектов исследования
Производные симм-1,3,5-триазина
Производные сульфонилмочевины
Иммунохимические методы определения триазиновых
и сульфонилмочевинных гербицидов
Молекулярные основы иммунного распознавания
Основные этапы разработки систем иммуноанализа
Выбор гаптена и метода его конъюгации
Получение и характеристика антител
Иммуноферментные методы анализа: основные форматы, аналитические
характеристики
Поляризационный флуоресцентный иммуноанализ
Влияние органических растворителей на основные компоненты
иммуноферментных систем
Полимерные носители как эффективное средство разделения
иммунореагентов
Глава 2. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ
Материалы
Методы исследования
Глава 3. РЕЗУЛЬТАТЫ И ИХ ОБСУЖДЕНИЕ
Получение и характеристика иммунореагентов
Количественные закономерности гомогенного иммуноанализа атразина
и хлорсульфурона
Твердофазный иммуноферментный анализ гербицидов: кинетические
закономерности и аналитические характеристики
Изучение влияния органических растворителей на иммунореагенты

3.4.1. Изучение влияния органических растворителей на активность
ферментов
3.4.2. Изучение влияния органических растворителей на иммунореагенты в
системе твердофазного иммуноферментного анализа
3.5. Твердофазный иммуноферментный анализ на основе полиэлектролитов
3.5.1. Выбор поликатиона для иммобилизации в твердофазном иммуноанализе
3.5.2. Изучение кинетики иммунохимических реакций с использованием
полиэлектролитов
3.5.3. Оптимизация твердофазного полиэлектролитного иммуноанализа
триазиновых гербицидов
3.6. Мембранный иммунофильтрационный анализ
3.7. Применение полученных иммунореагентов для определения гербицидов
с помощью электрохимических иммуносенсоров
ВЫВОДЫ
СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ

СПИСОК СОКРАЩЕНИЙ
АБТС - диаммониевая соль 2,2'-азино-бис(3-этилбензтиазолин-6-сульфоновой кислоты)
АБТС’+ - катион-радикал АБТС
БСА - бычий сывороточный альбумин
ГО — глюкозооксидаза Aspergillus niger
ГЦ - гемоцианин из гепатопанкреаса краба Paralithodes camtschatica
ДМСО - диметилсульфоксид
ДМФА - диметилформамид
ДАБ - 3,3'-диаминобензидин
IgG - иммуноглобулин G
ИФА - иммуноферментный анализ
ИХМ - иммунохимический метод
Ка - равновесная константа ассоциации
КПА - карбоксильное производное атразина
КПС - карбоксильное производное симазина
КПХ - карбоксильное производное хлорсульфурона
НАФ - неполный адъювант Фрейнда
ПАФ - полный адъювант Фрейнда
ПМА - полиметакрилат натрия
ПТ - иммуносенсор на основе полевого транзистора
ПФИА - поляризационный флуоресцентный иммуноанализ
ПО - пероксидаза из корней хрена
ПЭ - иммуносенсор на основе золотого планарного электрода
ПЭВП - поли-(БТ-этил-4-винилпиридиний)
ПЭГ - полиэтиленгликоль
ПЭК - полиэлектролитный комплекс
СИТ - соевый ингибитор трипсина
СПЭ - иммуносенсор на основе скрин-принт электрода
ФБ - 50 мМ К-фосфатный буфер, pH 7,4, содержащий 0,1 М NaCl
ТНБС - тринитробензолсульфокислота
ТМБ - 3,3',5,5'-тетраметилбензидин
ТСХ - тонкослойная хроматография
ТФБ - ФБ, содержащий 0,05% детергента Тритон X-
ЭДФ - этилендиаминфлуоресцеинтиокарбамат
ЯА - яичный альбумин

Рис. 7. Активированные производные атразина (а) и хлорсульфурона (б), использованные в работах [68, 100, 105, 107, 121].
высокую чувствительность определения хлорсульфурона в экстрактах почвы, которая в зависимости от типа тестируемого образца составляла 0,1-1,2 нг/мл [107] и 0,5 мкг/кг почвы [121]. В работе [68] была изучена специфичность метода по отношению к сульфонилмочевинам, производным мочевины и триазиновым гербицидам. Наиболее высокий уровень перекрестных реакций показали гербициды элли (ОРХ-Т6376) и хармони (ОРХ-М6316) и продукт деградации хлорсульфурона - 2-амино-4-метокси-6-метил-1,3,5-триазин. Перекрестное реагирование наблюдалось также с симазином. Таким образом, антитела против конъюгата 4-аминозамегценного хлорсульфурона характеризовались высоким уровнем перекрестных реакций с соединениями, идентичными хлорсульфурону по триазиновому фрагменту.
Синтез гаптена в случае сложной структуры анализируемого соединения (например, токсины грибов, антибиотики, стероидные гормоны) может оказаться достаточно сложным. Чтобы избежать многостадийного синтеза, в качестве гаптена для иммунизации используют один или несколько структурных фрагментов анализируемого соединения с активной функциональной группой. Эффективность такого подхода была показана на примере получения антител против гербицидов класса сульфонилмочевин, в структуре которых можно выделить два элемента - остаток сульфофенилмочевины и триазиновый фрагмент. Помимо сложности химического синтеза реакционоспособных производных сульфонилмочевин, еще одной проблемой при получении высокоспецифичных антител является присутствие в структуре сульфонилмочевин триазинового фрагмента, что может привести к значительному перекрестному реагированию с гербицидами группы 1,3,5-триазинов. Для преодоления этих трудностей было предложено использовать сульфонамидный фрагмент молекулы
сульфонилмочевин в качестве гаптена для иммунизации. Например, для

Рекомендуемые диссертации данного раздела

Время генерации: 0.157, запросов: 967