+
Действующая цена700 499 руб.
Товаров:
На сумму:

Электронная библиотека диссертаций

Доставка любой диссертации в формате PDF и WORD за 499 руб. на e-mail - 20 мин. 800 000 наименований диссертаций и авторефератов. Все авторефераты диссертаций - БЕСПЛАТНО

Расширенный поиск

Циркулирующие внеклеточные нуклеиновые кислоты в крови здоровых доноров и онкологических больных

  • Автор:

    Тамкович, Светлана Николаевна

  • Шифр специальности:

    03.00.04

  • Научная степень:

    Кандидатская

  • Год защиты:

    2005

  • Место защиты:

    Новосибирск

  • Количество страниц:

    156 с. : ил.

  • Стоимость:

    700 р.

    499 руб.

до окончания действия скидки
00
00
00
00
+
Наш сайт выгодно отличается тем что при покупке, кроме PDF версии Вы в подарок получаете работу преобразованную в WORD - документ и это предоставляет качественно другие возможности при работе с документом
Страницы оглавления работы

СПИСОК СОКРАЩЕНИЙ
ГЛАВА 1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ
1.1. Особенности циркуляции внеклеточных нуклеиновых кислот 9 крови
1.1.1. Методологические подходы к исследованию концентрации 9 циркулирующей ДНК в плазме крови в норме и при патологии
1.1.2. Форма циркуляции и особенности строения внеклеточных 19 дезоксирибонуклеиновых кислот крови
1.1.3. Методологические подходы к исследованию концентрации 27 циркулирующей РНК в плазме крови в норме и при патологии
1.1.4. Форма циркуляции и особенности строения внеклеточных 30 рибонуклеиновых кислот крови
1.1.5. Факторы, влияющие на циркуляцию нуклеиновых кислот в крови
1.1.5.1. Влияние нуклеаз на циркуляцию нуклеиновых кислот в крови
1.1.5.2. Влияние протеаз на циркуляцию нуклеиновых кислот в крови
1.2. Механизмы, приводящие к появлению в крови циркулирующих 40 нуклеиновых кислот
1.2.1. Апоптоз и некроз как - возможные источники появления внеклеточных 42 нуклеиновых кислот в крови
1.2.2. Активная секреция нуклеиновых кислот во внеклеточную среду
1.3. Биологическая роль внеклеточных нуклеиновых кислот в крови
1.4. Использование внеклеточных нуклеиновых кислот крови В 51 практической медицине
ГЛАВА 2. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ
2.1. Материалы
2.1.1. Реактивы и препараты
2.1.2. Лабораторные животные
2.1.3. Образцы крови
2.1.4. Оборудование
2.2. Методы

2.2.1. Приготовление 32Р меченых фрагментов ДНК
2.2.2. Методы выделения ДНК из плазмы крови
2.2.2.1. Выделение ДНК методом фенольной очистки
2.2.2.2.Метод выделения ДНК после осаждения комплексов белков с БОБ
2.2.2.3. Метод выделения ДНК осаждением комплексов белков с БИБ и 62 осаждения полисахаридов обработкой перхлоратом натрия
2.2.2.4. Метод выделения ДНК осаждением комплексов белков с БЭБ и осаждения 62 полисахаридов обработкой перхлоратом натрия, с последующей экстракцией липидов смесью хлороформ : изоамшовый спирт
2.2.2.5. Метод сорбции ДНК на стеклянные частицы
2.2.2.6. Метод сорбции ДНК на модифицированном стекле
2.2.3. Культивирование клеток
2.2.4. Методы выделения РНК из мембранно-цитозольной фракции клеток 64 линии А431
2.2.4.1. Метод фенольной экстракции
2.2.4.2. Фенол-гуанидиновый метод
2.2.4.3. Выделение РНК при помощи модифицированнго стекла
2.2.5. Оценка эффективности выделения РНК длиной 96 и. при помощи сорбции 66 на модифицированном стекле
2.2.6. Приготовление растворов ДНК и РНК для построения калибровочных 66 кривых
2.2.7. Взятие крови и приготовление элюатов с поверхности эритроцитов и
лейкоцитов
2.2.8. Определение концентрации внеклеточных нуклеиновых кислот в плазме 68 крови и клеточных элюатах
2.2.9. Исследование размера внеклеточных нуклеиновых кислот в плазме и 69 элюатах с поверхностей клеток крови
2.2.10. Изготовление конъюгатов и иммунизация животных
2.2.11. Изготовление сорбентов и выделение антител методом аффинной 71 хроматографии
2.2.12. Выделение специфических антител
2.2.13. Изготовление конъюгатов антител с пероксидазой хрена
2.2.14. Определение протеазной активности при помощи иммуноферментного 75 анализа

2.2.15. Приготовление модифицированного субстрата для определения
дезоксирибонуклеазной активности
2.2.16. Определение нуклеазной активности при помощи иммуноферментного 78 анализа
2.2.17. Статистическая обработка данных
ГЛАВА 3. РЕЗУЛЬТАТЫ И ОБСУЖДЕНИЕ
3.1. Разработка методов выделения и определения концентраций 80 циркулирующих нуклеиновых кислот
3.2. Определение концентрации ДНК и РНК при помощи флуоресцентных 88 красителей Hoechst 33258 и SYBR Green II
3.3. Влияние метода сбора крови и хранения образцов на концентрацию 93 внеклеточных нуклеиновых кислот
3.4. Свободные и связанные с поверхностью клеток внеклеточные нуклеиновые 97 кислоты в крови здоровых доноров
3.5. Особенности циркуляции внеклеточных нуклеиновых кислот у больных 102 с доброкачественными и злокачественными опухолями молочной железы
3.6. Исследование размера внеклеточных нуклеиновых кислот крови
3.7. Исследование факторов, влияющих на длительность циркуляции 113 внеклеточных нуклеиновых кислот
3.7.1. Исследование нуклеазной активности плазмы крови и ФБ-ЭДТА элюатов 113 здоровых доноров и больных с опухолями молочной железы
3.7.2. Определение протеазной активности плазмы крови и ФБ-ЭДТА элюатах 119 здоровых доноров и больных с опухолями молочной железы
ВЫВОДЫ
СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ

неделе в легком у 2 крыс из 6 и в печени у 4 крыс из 5. Более того, нативные ЭГО клетки могут трансфецироваться плазмидной ДНК при культивировании ЮНБ клеток в течение недели в присутствии 10 % плазмы от крыс с развившимися метастазами (от введенных животным ПЕШ-САТ клеток). Кроме того, при введении внутрибрюшинно здоровым крысам плазмы от животных, содержащих ОНБ-САТ-к летки, маркер С АТ обнаруживался в плазме крови реципиентов (рис .1).
Рис . 1. Схема горизонтального переноса ДНК (цитируется по [2]).
Таким образом, внеклеточные нуклеиновые кислоты в крови не являются биологически инертным материалом. Внеклеточные РНК способны осуществлять контрольные функции за развитием C. elegans и эмбриональным развитием Drosophila, а мигрирующая во флоэме растений мРНК может контролировать процессы развития в удаленных тканях и органах. Кроме того, по данным некоторых авторов, внеклеточные нуклеиновые кислоты являются сигнальными молекулами, перенося информацию в иммунном ответе от Т к В-лимфоцитам, а горизонтальный перенос ДНК при развитии онкопатологии способствует появлению метастазов.

Рекомендуемые диссертации данного раздела

Время генерации: 0.158, запросов: 967