+
Действующая цена700 499 руб.
Товаров:
На сумму:

Электронная библиотека диссертаций

Доставка любой диссертации в формате PDF и WORD за 499 руб. на e-mail - 20 мин. 800 000 наименований диссертаций и авторефератов. Все авторефераты диссертаций - БЕСПЛАТНО

Расширенный поиск

Молекулярный механизм функционирования терминальных оксидаз типа bd

  • Автор:

    Борисов, Виталий Борисович

  • Шифр специальности:

    03.00.04

  • Научная степень:

    Докторская

  • Год защиты:

    2008

  • Место защиты:

    Москва

  • Количество страниц:

    232 с. : ил.

  • Стоимость:

    700 р.

    499 руб.

до окончания действия скидки
00
00
00
00
+
Наш сайт выгодно отличается тем что при покупке, кроме PDF версии Вы в подарок получаете работу преобразованную в WORD - документ и это предоставляет качественно другие возможности при работе с документом
Страницы оглавления работы


ОГЛАВЛЕНИЕ

СПИСОК СОКРАЩЕНИЙ
ВВЕДЕНИЕ
ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ
Глава 1. ДЫХАТЕЛЬНЫЕ ЦЕПИ БАКТЕРИЙ: АЭРОБНЫЕ ЭЛЕКТРОН-
ТРАНСПОРТНЫЕ ЦЕПИ Escherichia coli и Azotobacter vinelandii
Глава2. ТЕРМИНАЛЬНЫЕ ОКСИДАЗЫ И ИХ ПРОСТЕТИЧЕСКИЕ ГРУППЫ
3.1. Физиологические функции цитохрома bd
3.2. Торможение дыхательной активности цитохрома bd
3.3. Генетика
3.4. Вторая терминальная оксидаза типа bd (СухАВ) у E
3.5. Простетические группы цитохрома bd
3.6. Предполагаемая структура цитохрома bd
3.7. Предполагаемый механизм функционирования цитохрома bd
3.8. Данные ЭПР-спектроскопии
3.9. Взаимодействие цитохрома bd с лигандами
ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНАЯ ЧАСТЬ
Глава 4. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ
4.1. Реактивы
4.2. Растворы
4.3. Штаммы бактерий и выращивание клеток
4.4. Получение мембран
4.5. Выделение и очистка комплекса bd
4.6. Определение степени чистоты препарата
4.7. Определение концентрации цитохрома bd
4.8. Определение концентрации белка
4.9. Определение концентрации СО, NO и От
4.10. Встраивание цитохрома bd в липосомы
4.11. Амперометрия
4.12. Электрометрия
4.13. Методы спектроскопии
4.14. Обработка данных

4.15. Определение кажущейся константы диссоциации комплекса тема с! с кислородом (Кй(о2)) в одноэлектронной форме цитохрома Ьс1
4.16. Определение кажущейся константы диссоциации (К) комплекса тема dс СО
4.17. Обработка кривых титрования СО спектральных изменений цитохрома Ьс!
4.18. Определение кажущейся константы диссоциации (КЦ комплекса тема с!
с перекисью водорода
РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЯ
Глава 5. ОКИСЛЕНИЕ ГЕМА (1
Глава 6. ВЗАИМОДЕЙСТВИЕ ЦИТОХРОМА Ьс/С Н202
Глава 7. ИДЕНТИФИКАЦИЯ ПОЛОСЫ СОРЕ ВОССТАНОВЛЕННОГО ГЕМА Ьт
Глава 8. РЕАКЦИЯ ЦИТОХРОМА Ъс1 С СО
Глава 9. ВЗАИМОДЕЙСТВИЕ ЦИТОХРОМА Ы С ЦИАНИДОМ
Глава 10. ВЗАИМОДЕЙСТВИЕ ЦИТОХРОМА Ъс1 С КИСЛОРОДОМ
Глава 11. ВЗАИМОДЕЙСТВИЕ ЦИТОХРОМА Ь<1 С N0
Глава 12. ДИССОЦИАЦИЯ ЛИГАНДОВ (02, N0, СО) ОТ ГЕМА с1
Глава 13. СРАВНИТЕЛЬНАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА МУТАНТНОЙ ФОРМЫ
ФЕРМЕНТА Е445А И ОКСИДАЗЫ ДИКОГО ТИПА
ОБСУЖДЕНИЕ РЕЗУЛЬТАТОВ
ВЫВОДЫ
СПИСОК ЦИТИРОВАННОЙ ЛИТЕРАТУРЫ

СПИСОК СОКРАЩЕНИЙ
АЭБСФ - аминоэтилбензенсульфонил фторид
БСА - бычий сывороточный альбумин
ДНКаза I - дезоксирибонуклеаза I
ДСН - додецилсульфат натрия
ДТТ - дитиотреитол
КД - круговой дихроизм
МКД - магнитный круговой дихроизм
ТМФД - КМ.М-тетраметил-и-фенилендиамин
трис - трис(гидроксиметил)метиламин
трицин - Ы-[(трисгидроксиметил)метил]глицин
ТТФА - 2-теноилтрифтороацетон
ФМС - феназинметосульфат
ФМСФ - фенилметансульфонилфторид
ЭДТА - этилендиаминтетрауксусная кислота
BQ - 1,4-бензохинон
BQCI4 - тетрахлоро-1,4-бензохинон
CHES - 2-(циклогексиламино)этансульфоновая кислота
Ес - потенциал полувосстановления
HEPES - М-2-гидроксиэтилпиперазин-М'-2-этансульфоновая кислота HOQNO - 2-я-гептил-4-гидроксихинолин-М-оксид НЬ - гемоглобин
Кд - кажущаяся константа диссоциации
К - кажущаяся константа ингибирования
к0„ - константа скорости связывания второго порядка
k0tг - константа скорости диссоциации
Mb - миоглобин
SB-12 - М-додецил-М,М-диметиламин-3-пропан-сульфонат
SVD (singular value decomposition) - разложение по сингулярным значениям
UHDBT - ундецилгидроксидиоксобензотиазол
Дф - разность электрических потенциалов
Дрн+ - разность электрохимических потенциалов ионов водорода А - оксигенированная форма фермента F - оксоферрильная форма фермента
О - окисленная форма фермента
Р - перекисная форма фермента R - восстановленная форма фермента
MV - форма фермента смешанной валентности (гемы Ь окислены, гем d восстановлен)

= 2-109 rvT'c'1). Последующее исчезновение пика при 645 нм сопровождается нарастанием оптической плотности при 680 нм, что, вероятно, связано с переходом тема d в оксоферрильную форму. Эта реакция не зависит от концентрации кислорода (начиная с 50 мкМ Ог); константа скорости первого порядка достигает НО4 с1.. Одновременно с образованием оксоферрильного комплекса тема d происходит окисление низкоспинового гема 6558 (110).
Связывание СО. Добавление СО к полностью восстановленному цитохрому bd E. coli вызывает длинноволновый сдвиг полосы при 630 нм гема d24 на 5 нм в абсолютном спектре поглощения, что в разностном спектре соответствует появлению пика с максимумом при 642 нм и минимумом около 622 нм (7, 42). В области Соре разностного спектра поглощения также наблюдается возникновение характерной кривой W-образной формы с провалами при 430 и 442-444 нм (116). Считается, что красный сдвиг а-полосы гема d отражает образование его комплекса с СО, тогда как сложный рисунок ответа в у-области объясняют участием в связывании окиси углерода гема 6595 (46, 116).
Полностью восстановленный фермент способен к образованию фоточувствительного комплекса гема d с СО. Вслед за вызванным лазерной вспышкой фотолизом окиси углерода происходит ее рекомбинация с восстановленным гемом d, скорость которой пропорциональна концентрации СО с ко„ = 8-107 IVT'c'1 (110). Это гораздо быстрее, чем в случае терминальных оксидаз типа ааз (7-104 Nf'c", (150)) и Ьоз (6-104 M'V1, (151)). СО может также образовывать фоточувствительный комплекс с гемом d в цитохроме bd A. vinelandii в редокс-состоянии «смешанной валентности» (MV, - оба гема b окислены, гем d восстановлен) (152). При этом в абсолютном спектре поглощения а-полоса гема d также имеет максимум при 635-636 нм.
По данным Дж.Хилла с сотр., около 15% гема 6595 в замороженных мембранах E.coli при криогенных температурах (4К) может медленно присоединять молекулу СО, фотодиссоциирующую от гема d (125)
Взаимодействие с некоторыми азотосодержащими лигандами. Ряд небольших азотосодержащих молекул способен взаимодействовать с полностью восстановленным цитохромом bd. NO3', N02', N2O32' (триоксодинитрат), NH:OH и N0, добавленные к

Рекомендуемые диссертации данного раздела

Время генерации: 0.176, запросов: 967