Гуморальный иммунный ответ на токсины из омелы белой (Viscum album)

• Автор: Солопова, Ольга Николаевна
• Шифр специальности: 03.00.03
• Научная степень: Кандидатская
• Год защиты: 1999
• Место защиты: Москва
• Количество страниц: 110 с. : ил.

СОДЕРЖАНИЕ

Список сокращений
Введение
Глава 1. Обзор литературы. Иммунный ответ на белковые токсины различного происхождения
1.1.Введени е
1.2.Иммунный ответ на токсины бактерий
1.2.1 .Воздействие Шига-токсина на организм млекопитающих
1.2.1.1.Строение и характеристика Шига-токсина
1.2.1.2.Гуморальный иммунный ответ на Shigella dysenteriae
1.2.1.3.Клеточный иммунитет к Shigella dysenteriae
1,2.2.Иммунологические характеристики коклюшного токсина и его искусственных аналогов, полученных при производстве противококлюшных вакцин
1.2.2.1.Строение и действие коклюшного токсина
1.2.2.2.Влияние коклюшного токсина на продукцию антител в организме
1.2.2.3.Клеточный иммунитет на коклюшный токсин
1.2.3.Температуро-лабильный энтеротоксин Escherichia coli и холерный токсин: строение, биологическая активность и воздействие на иммунную систему
1.2.3.1.Сравнительные характеристики эндотоксина Е.соК и холерного токсина
1.2.3.2.Гуморальный иммунный ответ на эндотоксин E.coli
1.2.3.3.Гуморальный иммунный ответ на холерный токсин
1.2.3.4.Клеточный иммунитет к эндотоксину E.coli и холерному токсину
1.2.4.Ботулиновые нейротоксины, иммуногенные свойства
1.2.4.1.Происхождение, строение и биологическое действие ботулиновыхтоксинов22

1.2.4.2.Гуморальный иммунный ответ на ботулиновые токсины
1.2.5.0бщие черты воздействия бактериальных токсинов на иммунную систему
млекопитающих
1.3.Растительные токсины. Воздействие растительных токсинов на организм
млекопитающих

1.3.1.1.Рицин- белковый токсин из семян Ricinus communis. Строение и биологические свойства
1.3.1.2.Гуморальный иммунный ответ на рицин
1.3.1.3.Клеточный иммунный ответ на рицин
1.3.2.Влияние гелонина на клеточный иммунитет
1.3.3.Токсические белки из листьев и побегов омелы белой (Viscum Album L.)
1.3.3.1.Характеристики и биологическое действие
1.3.3.2.Гуморальный иммунный ответ на белки водного экстракта омелы
1.3.3.3.Воздействие антител против MLI на иммунокомпетентные клетки в экспериментах in vitro
1.3.3.4.Анализ антигенных детерминант молекул ML
1.3.3.5.Модуляция антителообразования компонентами экстракта омелы
1.3.3.6.Воздействие токсинов омелы на клетки иммунной системы млекопитающих. Изменение уровня пролиферации мононуклеарных клеток периферической крови
1.3.3.7.Изменение секреции лимфокиноцшод воздействием экстракта омелы
1.3.3.8.Изменение концентрации и цитотоксической активности естественных киллеров под воздействием экстракта омелы
1.3.3.9.Изменение количества макрофагов и их фагоцитирующей активности под воздействием экстракта омелы

1.3.3.10.Корреляция между гуморальным и клеточным иммунными ответами на

1.3.4.0бщие черты взаимодействия растительных токсинов на иммунную систему
млекопитающих
1.4.3аключение
ГЛАВА 2. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ
2Л. Культивирование клеточных линий
2.2.Выделение токсинов и их субъединиц из растения Viscum album
2.3.Иммунизация крыс и мышей нативным токсином MLIII или изолированными субъединицами токсина MLI
2.4.1.Получение гибридом, продуцирующих моноклональные антитела против вискумина
2.4.2.Клонирование гибридом методом лимитирующих разведений
2.4.3. Криоконсервирование клеток
2.5.Наработка и очистка антител
2.5.1.0чистка антител ионнообменной хроматографией
2.5.2.0чистка антител хроматографией на протеин А-сефарозе
2.6.Радиоактивное мечение белков
2.7.Иммуноферментный анализ
2.7.1.Иммуноферментный анализ с антигеном, сорбированным на планшете
2.7.2.Иммунноферментный анализ с антигеном в растворе
2.8.Изучение диссоциации и реассоциации тетрамерных токсинов и их
изолированных субъединиц
2.9.0ценка галактозосвязывающей активности токсинов
2.10.Получение иммунотоксинов

на содержание антител против MLI. (52). Эксперименты по изучению специфичности антител против препарата Helixor с применением метода иммунодиффкзии показали, что антитела в сыворотках направлены, главным образом, против MLI.
В следующем эксперименте авторы пытались получить более полную информацию о продукции антител у людей, получавших инъекции препарата из омелы. (53). По результатам предварительных тестов стало ясно, что сыворотки пациентов, получавших инъекции препарата без MLI и с незначительным содержанием MLII и MLIII, имеют низкий титр антилектиновых антител. Напротив, пациенты, получавшие экстракт омелы с натуральными волокнами и высоким содержанием лектинов свыше двух лет, имеют сыворотки с очень высоким титром антилектиновых антител IgG, а большая часть таких пациентов (60%) имеет в сыворотках также и иммуноглобулины класса Е. Кроме того, у 40% этих пациентов в сыворотках обнаружили антитела IgA, такая же частота присутствия в сыворотках IgA оказалась у пациентов, получавших препарат Helixor Mali свыше двух лет. Эти данные указывают на зависимость типа иммунного ответа от свойств применяемых препаратов и от схемы и продолжительности терапии.
1.3.3.3. Воздействие антител против MLI на иммунокомпетентные клетки в экспериментах in vitro.
MLI оказывает цитотоксическое действие на выделенные из крови здоровых доноров нормальные лимфоциты и на лимфоциты, стимулированные фитогемагглютинином (ФГА). Предварительная инкубация MLI с антителами против MLI полностью нейтрализует цитотоксическое действие MLI на ФГА-стимулированные лимфоциты здоровых доноров в концентрации от 15пг/мл до 8нг/мл. При более высоких концентрациях цитотоксичность MLI лишь частично