Доставка любой диссертации в формате PDF и WORD за 499 руб. на e-mail - 20 мин. 800 000 наименований диссертаций и авторефератов. Все авторефераты диссертаций - БЕСПЛАТНО
Павлов, Евгений Владимирович
03.00.02
Кандидатская
1999
Пущино
101 с. : ил.
Стоимость:
499 руб.
СОДЕРЖАНИЕ
ВВЕДЕНИЕ
ГЛАВА 1. ЛИТЕРАТУРНЫЙ ОБЗОР
ЕЕ Роль МИТОХОНДРИЙ В РЕГУЛЯЦИИ уровня клеточного кальция
Е2.Мигохондриальные СИСТЕМЫ ТРАНСПОРТА КАЛЬЦИЯ
ЕЗ. Митохондриальная Са2+-активируемая неселективная пора
1.3.1. Факторы, влияющие на открытие поры
1.3.2. Молекулярные механизмы функционирования поры
1.3.3. Физиологическая роль поры
1.4. Фазовые переходы липидных мемеран
1.5. Осцилляции КОНЦЕНТРАЦИИ внутриклеточного кальция в электроневозбудимых клетках
ГЛАВА 2. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ
2.1. Метод выделения митохоцдрий из печени крыс
2.2. Определение митохондриального белка
2.3. Метод этанольной экстракции
2.4. Экстракция липидов по методу Фолча
2.5. Очистка гидрофобного экстракта на колонке с кремниевой кислотой
2.6. Методика проведения аналитической и препаративной тонкослойной хроматографии
2.7. Методика изучения Са2+- связывающих свойств вещества
2.8. Изучение ион- транспортирующих свойств
2.9. Получение митохондрий в различных функциональных состояниях
2. Ю.Методы изучения химической структуры вещества
2.11. Анализ активности маркерных ферментов
ГЛАВА 3. РЕЗУЛЬТАТЫ ЭКСПЕРИМЕНТОВ И ИХ ОБСУЖДЕНИЕ
3.1. Выделение и очистка Са2+-связывающего, ион- транспортирующего вещества из внутренней мембраны митохондрий
3.2. Изучение химической структуры вещества
3.3. Изучение Са-связывающихсвойств вещества
3.4. Изучение ион-транспортирующих свойств вещества
3.5. Выяснение возможной функциональной роли изучаемого вещества в митохондриях
3.6. Эффект колебаний проводимости БЛМ, модифицированной суммарным гидрофобным ЭКСТРАКТОМ
ЗАКЛЮЧЕНИЕ
ВЫВОДЫ
ЛИТЕРАТУРА
ВВЕДЕНИЕ.
Ионы кальция, как известно, участвуют в регуляции жизненно важных процессов, происходящих в клетке. Уровень кальция в цитоплазме контролируется работой Са2+-транспортирующих систем, локализованных в плазматической мембране и в мембранах клеточных органелл. Митохондрии, например, способны аккумулировать избыточный кальций цитоплазмы, что, в свою очередь, активирует Са2+- чувствительные ферменты их матрикса.
В митохондриях существует, по крайней мере, четыре системы транспорта кальция. Поглощение кальция энергизованными митохондриями происходит электрофоретически через, так называемый, кальциевый унипортер, работа которого ингибируется рутениевым красным. Выход кальция из митохондрий осуществляется, в зависимости от ткани, двумя различными антипортерами. Ыа+/Са2+ антипортер присутствует в мозге, сердце и других возбудимых тканях и, в меньшей с тепени, в печени, тогда как Н+/Са2+ обменник обнаружен в печени, легких, почках и гладких мышцах. В последнее время большое внимание уделяется изучению митохондриальной Са2+-зависимой неселективной поры, которая ингибируется циклоспорином А. Полагают, что она может участвовать в быстром выбросе кальция из митохондрий, а также белков, инициирующих апоптоз. Открытие поры связано, как правило, с увеличением концентрации кальция в митохондриях и защелачиванием их матрикса.
Несмотря на то, что параметры функционирования митохондриальных систем транспорта кальция детально охарактеризованы, молекулярный механизм их работы до конца не
Эти наблюдения показывают, каким образом открытие поры in vivo может стимулироваться повышением концентрации клеточного кальция и согласуются с данными о свойствах поры, полученными в экспериментах на изолированных митохондриях. Подобные увеличения концентрации клеточного кальция могут происходить при мышечном сокращении или гормональной стимуляции метаболизма и, возможно, могут служить сигналом к ускорению работы дыхательной цепи митохондрий и процессов митохондриального метаболизма (McCormack et al., 1992), а также приводить к увеличению вероятности открытия поры. Открытие поры может быть необходимо митохондриям для выброса тех продуктов метаболизма, для которых не существует специфических транспортных систем, но присутствие которых в матриксе может оказывать пагубное вляние на митохондрии. Действительно, было показано, что нарушение функционирования печени и почек при хронической обработке циклоспорином может быть связано с блокированием поры
циклоспорином A (Griffiths et al., 1991).
Другой возможной функцией митохондриальной поры может быть обеспечение механизма быстрого выброса избыточного кальция,
накопленного митохондриями в результате резкого увеличения его концентрации в цитоплазме (Darley-Usmar et al., 1991). Считается, что в условиях резкого повышения концентрации клеточного кальция митохондрии могут выполнять защитную
функцию, аккумулируя избыточный кальций из цитоплазмы. Обеспечивая быстрое снижение уровня клеточного кальция
митохондрии могут предотвратить развитие в клетке пагубных процессов, которые могут развиваться при его повышенных концентрациях, например при сердечной аритмии (Gettes te al., 1992) . Вполне вероятно, что после выполнения защитной функции
Название работы | Автор | Дата защиты |
---|---|---|
Исследование электрофизиологических характеристик механорецепторного нейрона речного рака при воздействии инфракрасного излучения | Кучерявых, Юрий Витальевич | 2002 |
Структурные особенности промоторной ДНК и их роль в активации транскрипции | Масулис, Ирина Станиславовна | 2000 |
Первичные физико-химические механизмы токсического действия меди на бактерии | Лебедев, Владимир Сергеевич | 1998 |