Анализ фармацевтических веществ методами газовой хромато-масс-спектрометрии и капиллярной хромадистилляции-масс-спектрометрии

• Автор: Гуляев, Иван Владимирович
• Шифр специальности: 02.00.02
• Научная степень: Кандидатская
• Год защиты: 2012
• Место защиты: Москва
• Количество страниц: 168 с. : ил.

Содержание
СПИСОК СОКРАЩЕНИЙ
ВВЕДЕНИЕ
ГЛАВА 1. ЛИТЕРАТУРНЫЙ ОБЗОР
1.1. Типы и источники примесей
1.2. Методы обнаружения и идентификации органических примесей в фармацевтических препаратах
1.2.1. Высокоэффективная жидкостная хроматография
1.2.2. Тонкослойная хроматография
1.2.3. Газовая хроматография
1.2.3.1. Дериватизация в газовой хроматографии
1.2.3.2. Основные методы дериватизации в газовой хроматографии
1.2.4. Двухколоночные системы
1.2.5. Использование компьютерного моделирования масс-спектров для идентификации неизвестных примесей
1.3. Хромадистилляция
1.3.1. Виды хромадистилляции
1.3.2. Физические основы хромадистилляции. Качественные и количественные характеристики
1.3.3. Определение примесей непосредственно методом ХД
1.3.4. Определение примесей методом ХД в сочетании с газовой хроматографией
1.3.5. Распределение примесей при элюировании из колонок без НФ
ГЛАВА 2. ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНАЯ ЧАСТЬ
2.1. Оборудование
2.2. Исходные вещества и материалы
2.2.1. Дериватизация фармсубстанций
2.2.2. Капиллярная хромадистилляция с масс-спектрометрическим детектированием
2.2.3. Идентификация с использованием компьютерного моделирования
2.3. Методика эксперимента
2.3.1. Дериватизация фармсубстанций и их ГХ/МС анализ
2.3.2. Капиллярная хромадистилляция в сочетании с масс-спектрометрией
2.3.2.1. Регистрация сигнала менее и более летучих, чем основной компонент, примесей разной летучести
2.3.2.2. Профиль распределения легких и тяжелых примесей разной летучести в зависимости от условий опыта
2.3.2.3. Профиль распределения компонента в зависимости от его концентрации
2.3.2.4. Исследование возможности определения примесей методом КХД/МС
2.3.2.5. Обнаружение примесей в фармсубстанциях методом КХД/МС
2.3.2.6. Сочетание КХД и метода ГХ/МС off-line для обнаружения и идентификации примесей в фармсубстанциях

2.3.3. ГХ/МС анализ растворов модельных фармсубстанций для идентификации с использованием компьютерного моделирования
ГЛАВА 3. ИЗУЧЕНИЕ ВОЗМОЖНОСТИ ГХ/МС ОБНАРУЖЕНИЯ РЯДА ПОЛИФУНКЦИОНАЛЬНЫХ ФАРМАЦЕВТИЧЕСКИХ СУБСТАНЦИЙ С ИСПОЛЬЗОВАНИЕМ ДЕРИВАТИЗАЦИИ
3.1. Хромато-масс-спектрометрический анализ недериватизированных фармсубстанций
3.2. Хромато-масс-спектрометрический анализ дериватизированных фармсубстанций
3.2.1. Дериватизация каптоприла
3.2.2. Дериватизация метокпопрамида
3.2.3. Дериватизация соталола
3.2.4. Дериватизация гидрохпортиазида
3.2.5. Дериватизация налидиксовой кислоты
3.2.6. Дериватизация ставудина
ГЛАВА 4. РАЗРАБОТКА МЕТОДА КАПИЛЛЯРНОЙ ХРОМАДИСТИЛЛЯЦИИ В СОЧЕТАНИИ С МАСС-СПЕКТРОМЕТРИЕЙ С ЭЛЕКТРОННОЙ ИОНИЗАЦИЕЙ
4.1. Регистрация сигнала легких и тяжелых примесей разной летучести
4.2. Профиль распределения легких и тяжелых примесей разной летучести в зависимости от условий опыта
4.2.1. Зависимость профиля распределения от температуры в процессе изотермической КХД
4.2.2. Зависимость профиля распределения от наличия/отсутствия градиента температуры в КХД
4.2.3. Зависимость профиля распределения от величины градиента температуры в термической КХД
4.2.4. Зависимость профиля распределения от скорости потока элюента в изотермической КХД
4.2.5. Зависимость степени отделения примеси от ее концентрации в процессе КХД
4.3. Изучение возможности определения примесей методом КХД/МС
4.4. Обнаружение примесей в фармсубстанциях этиловый эфир бромизовалериановой кислоты и ментол методом КХД/МС on-line
4.5. Обнаружение и идентификация примесей в фармсубстанций этиловый эфир бромизовалериановой кислоты, основанное на сочетании КХД и ГХ/МС off-line
ГЛАВА 5. РАЗРАБОТКА ПОДХОДА К БЫСТРОЙ ПРЕДВАРИТЕЛЬНОЙ ИДЕНТИФИКАЦИИ НЕИЗВЕСТНЫХ СОЕДИНЕНИЙ НА ОСНОВЕ СРАВНЕНИЯ ИХ ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНЫХ МАСС-СПЕКТРОВ ЭЛЕКТРОННОЙ ИОНИЗАЦИИ С МОДЕЛИРОВАННЫМИ МАСС-СПЕКТРАМИ ВЕРОЯТНЫХ СТРУКТУР-КАНДИДАТОВ

ЗАКЛЮЧЕНИЕ
ВЫВОДЫ
СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ
ПРИЛОЖЕНИЕ

Объем пробы, подаваемой на первую колонку составлял 1 мкл. Для снижения пределов обнаружения осуществляли 10-кратное концентрирование примесей на картридж, после чего осуществляли анализ всей собранной фракции.
На модельной смеси, имитирующей экстракт из фармпрепарата, и включающей в себя диазепам ("основной компонент", концентрация 10'5 г/мкл), 4 бензодиазепина и феназепам ("примеси", концентрации 10"в - 10'7 г/мкл) была показана возможность определения примесей, в т.ч. элюируемых одновременно с основным компонентом.
Кроме того, на реальном экстратке из диазепама и феназепама была продемонстрирована возможность обнаружения и идентификации примесей. Так, при использовании стандартного ГХ/МС метода в диазепаме были обнаружены только 3 примеси, а при использовании описанной ГХ/ГХ/МС системы с 10-кратным концентрированием на картридже 28 примесей с содержанием в диапазоне 10"4 - 1СГ2 %, из которых 13 было
идентифицировано с помощью библиотеки масс-спектров NIST.
Преимуществом предложенного ГХ/ГХ/МС подхода по сравнению с ВЭЖХ/ВЭЖХ/МС и ВЭЖХ/ГХ/МС являются:
1. более простая конструкция прибора;
2. отсутствует вероятность загрязнения примесями из элюента (чистота органических элюентов для ВЭЖХ не превышает 99,8-99,9%, чистота элюента гелия для ГХ может составлять до 99,99999%);
3. большая эффективность отделения примесей от основного компонента в первой колонке (эффективность ГХ выше, чем ВЭЖХ);
4. возможность быстрой идентификации с использованием библиотек масс-спектров электронной ионизации (также присутствует в ВЭЖХ/ГХ/МС);
5. ниже предел обнаружения.
Главным ограничением предоженного подхода является малый объем пробы, вводимой в первый хроматограф (1 мкл), что ограничивает пределы обнаружения примесей. Для их повышения приходится проводить многократное концентрирование примесей на картридже, что очень трудо- и времязатратно.