Взаимодействие рицина с клетками гибридом, секретирующих антитела против его каталитической субъединицы

Взаимодействие рицина с клетками гибридом, секретирующих антитела против его каталитической субъединицы

Автор: Попова, Екатерина Николаевна

Шифр специальности: 14.00.36

Научная степень: Кандидатская

Год защиты: 2004

Место защиты: Москва

Количество страниц: 160 с. ил.

Артикул: 2618176

Автор: Попова, Екатерина Николаевна

Стоимость: 250 руб.

1. Обзор литературы. II
1.1 Токсичные пектины из семян клещевины. Особенности трехмерной организации их молекул.
1.2 Транспорт токсинов в клеткемишени.
Синтез и секреция иммуноглобулинов.
2. Материалы и методы. 4
Материалы.
Выделение токсинов и их субъединиц.
Получение гибридом
Очистка мАт.
Биотинилирование белков
Иммобилизация мАт ВсН и 2ВВК1 на ВгСVактивированную сефарозу 4В.
ПлКаПААГ электрофорез.
Системы ТИФА.
Изучение диссоциации субъединиц В и В
Оценка устойчивости клеток к токсинам с помощью МТТтеста
Выявление признаков апоптоза.
Определение ИбО и ИТ А в супернатантах и лизатах клеток нр и гибридами IВАКЗ,
предобработанных 0.
Получение конъюгатов с флуорохро.мами ФИТЦ и А1еха5б8.
Конфокальная лазерная сканирующая микроскопия.
Предсказание анпи,енных детерминант ВТ А в области, экранированной ВТ В.
3 Результаты и обсуждение результатов.
3.1 Гибридомы. продуцирующие мАт против нативного рицина и гибридомы. продуцирующие мАт против нативного агглютинина рицина.
3.2 Гибридомы. продуцирующие мАт против частично денатурированной Асубъединицы
рицина.
З 3 Гибридомы, продуцирующие мАт, реагирующие с изолированной Асубъединицей рицина, но
не с гояотоксином
Выводы.
Список литературы


Строение углеводсвязывающих центров в 1а и 2у субдоменах В субъединиц рицина и агглютинина рицина Савочкина Ю. А, г с любезного согласия автора. Согласно данным Е. С. , Савочкина Ю. А., г, в молекуле функционирует только один углеводсвязывающий центр, расположенный в субдомене 1а. Его структура представлена на рис. В , как и в , Тгр образует гидрофобный контакт с молекулой галактозы. Аналогично i и , 2 и i 2 в , в 0ГС4 , 3 , 3 и 4 образуют водородные связи рис. Боковая группа фиксирована в нужном положении водородной связью с . Таким образом, различия в формировании водородных связей с галактозой в рицине и агглютинине рицина обусловлены заменами на и на . В области 2у субдомена 0, соответствующей второму углеводсвязывающему центру , галактоза отсутствует, хотя внешняя поверхность сохраняет форму открытого кармана рис. Вероятно, утрата углеводсвязывающей активности в 2у субдомене 0 связана с заменами Туг8 на i8 и А1а7 на 7. Обе указанные замены приводят к увеличению положительного заряда на данном участке, что препятствует правильной ориентации молекулы галактозы, и, следовательно, образованию водородных связей с соответствующими боковыми группами аминокислотных остатков. Кроме того, результаты, полученные на мутантных , свидетельствуют о том, что гидрофобный контакт Туг8 с молекулой галактозы во втором углеводсвязывающем цен тре рицина необходим для удержания сахара в зоне контакта . Согласно данным сайтспецифического мутагенеза, рекомбинантные , несущие замены в субдоменах 1а и 2у, сохраняли лектиновую активность.

Рекомендуемые диссертации данного раздела

28.06.2016

+ 100 бесплатных диссертаций

Дорогие друзья, в раздел "Бесплатные диссертации" добавлено 100 новых диссертаций. Желаем новых научных ...

15.02.2015

Добавлено 41611 диссертаций РГБ

В каталог сайта http://new-disser.ru добавлено новые диссертации РГБ 2013-2014 года. Желаем новых научных ...


Все новости

Время генерации: 0.327, запросов: 198