Характеристика и регуляция кардиального пейсмекерного канала I#3f#1/HCN, разработка научных подходов к созданию биологических пейсмекеров

• Автор: Загидуллин, Науфаль Шамилевич
• Шифр специальности: 14.00.16
• Научная степень: Докторская
• Год защиты: 2009
• Место защиты: Санкт-Петербург
• Количество страниц: 188 с. : 67 ил.

Глава 1. Обзор литературы. Глава 2. Материалы и методы исследования. Молекулярнобиологические эксперименты. Глава 3. Свойства изоформ НСЫ 1, 2, 4 по данным метода вся клетка в высококалиевом растворе. Глава 4. Глава 5. Кальций проницаем для I тока в нативных крысиных и человеческих кардиомиоцитах. Влияние кальция на ионную селективность и проводимость канала. Глава 6. Использование предсердного натрийуретичсского протеина в качестве промотора для идентификации пейсмекероподобных клеток. Создание эмбриональных тел и визуализация клеток с
Широко известна способность высоких концентраций калия в плазме крови замедлять ритм сердца и даже останавливать его в диастоле , . В то же время, не достаточно данных о воздействии экстрацеллюлярноего высококалиевого раствора на экспрессированные в клеточных системах каналы . Остается неясным, какая изоформа ответственна за подобный эффект пейсмекерного узла. Таким образом, для изучения механизмов функционирования и модуляции канала существует потребность в электрофизиологической характеристике изоформ в контроле, экспрессированных в единой клеточной системе как в физиологических условиях, так и в условиях изменения электролитного состава растворов например, при повышении уровня калия.


В то же время, как при недостаточности кровообращения, так и гипертрофии миокарда достоверно увеличивается частота серьезных нарушений ритма, таких как фибрилляция предсердий, летальные желудочковые аритмии. Поэтому была выдвинута гипотеза, что I ток может принимать участие в аритмогенезе при подобных заболеваниях. Считается, что в физиологических условиях ток I создается движением ионов калия и натрия через мембрану в соотношении 5 i . Но . Однако впервые в I каналах нейронов дорсальных ганглий была найдена фракция ионов кальция X. В другом исследовании при экспрессии тока НСИ2 в человеческих эмбриональных клетках почек проводились микроэлектродные эксперименты типа вся клетка и измерение тока кальция с помощью вещества Гига2 денситометрическим способом Уи X. Фракция ионов кальция Са2 определялась во время активации канала, причем ток усиливался при сильной гиперполяризации или более длительной продолжительности сигнала рис. Количественный анализ показал, что доля кальциевого тока составляет примерно 0,5 от тока, продуцируемого НСЫ2 или 1Г. Более того, в присутствии ЭДТА этилендиаминтетрауксусная кислота хелатора Са2 продолжительность потенциала действия увеличивалась, а перемещение кальция через мембрану клетки блокировалось селективным блокатором тока 1г гО. Рис. Индукция тока ионов кальция через канал НСЫ, экспрессированный в человеческих эмбриональных клетках почек, трансфицированных изоформой НСМ. В ответ на гиперполяризующий импульс 0 мВ в течение 5 секунд с потенциалом покоя мВ появлялся ток кальция стрелка 1, который исчезал при вымывании кальция из внеклеточного раствора стрелка 2 и появлялся вновь после того, как кальций был повторно добавлен в раствор стрелка 3.