Изучение генетической вариабельности возбудителя сибирской язвы

Изучение генетической вариабельности возбудителя сибирской язвы

Автор: Колбасов, Денис Владимирович

Шифр специальности: 16.00.03

Научная степень: Кандидатская

Год защиты: 2000

Место защиты: Покров

Количество страниц: 116 с. ил

Артикул: 315229

Автор: Колбасов, Денис Владимирович

Стоимость: 250 руб.

Изучение генетической вариабельности возбудителя сибирской язвы  Изучение генетической вариабельности возбудителя сибирской язвы  Изучение генетической вариабельности возбудителя сибирской язвы  Изучение генетической вариабельности возбудителя сибирской язвы 



В последние годы большое внимание уделяется исследованиям молекулярной структуры генома возбудителей особо опасных болезней животных, изучению взаимосвязи структуры и функции генома с целью создания чувствительных, специфичных диагностических тестсистем и эффективных средств специфической профилактики этой инфекции нового поколения. Для идентификации возбудителей бактериальных болезней животных широко применяют высокочувствительные методы анализа генома, такие, как рестрикционный анализ, методы молекулярной гибридизации, геномной дактилоскопии, полимеразной цепной реакции ПЦР, секвенирования и риботипирования. Разработка методов молекулярной генетики в последнее десятилетие привело к появлению нового класса молекулярных маркеров фрагментов ДНК, соответствующих нуклеотидным последовательностям, комплементар
ных генам или сцепленных с этим геном 5. Появление ДНКмаркеров радикально изменило методы оценки генетического разнообразия микроорганизмов, паспортизации и дифференциации близкородственных микроорганизмов, картирования и определения структуры генов и эпизоотологического мониторинга 2. Поскольку частоты различных классов коротких тандемных повторов значительно различаются у микроорганизмов, принадлежащих к разным таксономическим группам, для каждой группы необходимо подбирать свои наборы праймеров. Наиболее привлекательным свойством коротких тандемных повторов является то, что, они распределены по всему геному что облегчает использование этих маркеров для молекулярного картирования генома. Простота манипуляций в сравнении с КГРРанализом и значительная вариабельность, порой в раз превышающая вариабельность ШЪРфрагментов, обеспечивает высокую информативность этих маркеров. Сравнительная эффективность методов анализа генотипов бацилл с использованием четырех видов ДНКмаркеров НРЪР, КАРО, АРЬР и Кметоды показало, что ТКмаркеры короткие тандемные повторы обеспечивают наибольшую информацию, а использование АКЬРзондов наибольшее число локусов, выявляемых в одном и том же опыте . Указанные методы позволяют, прежде всего, выявлять не фенотипическое проявление, а непосредственно исследовать молекулярную структуру генома, выявлять генетическую вариабельность, устанавливать генетическую взаимосвязь штаммов и изолятов возбудителей, выделенных в разных регионах. Цель и задачи исследования. Основной целью данной работы явилось изучение вариабельности генома различных штаммов i i, выявление их различий и возможность идентификации возбудителя сибирской язвы. ПЦР для дифференциации изолятов В. Экспериментально доказана возможность использования методов ii и риботипирования для изучения геномного полиморфизма вакцинных штаммов возбудителя сибирской язвы и спорообразующих сапрофитов. Установлено наличие в хромосомной ДНК гипервариабельных последовательностей, детектируемых универсальными праймерами, а также праймерами, комплементарными вариабельной последовательности рРНК и инсерционного элемента, расположение которых имеет родовую, видовую и штаммовую специфичность. Определены оптимальные условия проведения полимеразной цепной реакции для дифференциации капсулообразующих штаммов бацилл сибирской язвы от непатогенных штаммов с использованием праймеров, комплементарных гену СарВ. ДК сибиреязвенных плазмид рХ, рХ, кодирующих гены протективпого антигена и капсулообразования, могут в дальнейшем использоваться для проведения различных генноинженерных манипуляций. ВНИИВВиМ методические указания но выявлению ДНК возбудителя сибирской язвы с помощью полимеразной цепной реакции. Изучение геномного полиморфизма хромосомной ДНК различных штаммов бацилл сибирской язвы методами КАРНГнегрпШ и риботимиро
2. Оптимизация полимеразной цепной реакции для выявления ДНК возбудителя сибирской язвы с использованием праймеров, комплементарных генам плазмид вирулентности рХ и рХ возбудителя сибирской язвы. Клонирование фрагментов ДНК сибиреязвенных плазмид рХО 1 и рХ, кодирующих гены протективпого антигена и капсулообразования, в составе плазмидного вектора риС. Апробация результатов исследований. Результаты исследований доложены и обсуждены на заседаниях Ученого Совета ВНИИВВиМ в г. Всероссийского научноисследовательского института ветеринарной вирусологии и микробиологии Покров , , .

Рекомендуемые диссертации данного раздела

28.06.2016

+ 100 бесплатных диссертаций

Дорогие друзья, в раздел "Бесплатные диссертации" добавлено 100 новых диссертаций. Желаем новых научных ...

15.02.2015

Добавлено 41611 диссертаций РГБ

В каталог сайта http://new-disser.ru добавлено новые диссертации РГБ 2013-2014 года. Желаем новых научных ...


Все новости

Время генерации: 0.318, запросов: 108