Биологические основы получения и практического применения субклеточных фракций бактерий на модели бруцелл

Биологические основы получения и практического применения субклеточных фракций бактерий на модели бруцелл

Автор: Григорьева, Галина Ивановна

Шифр специальности: 16.00.03

Научная степень: Докторская

Год защиты: 1997

Место защиты: Санкт-Петербург

Количество страниц: 465 с. ил.

Артикул: 196029

Автор: Григорьева, Галина Ивановна

Стоимость: 250 руб.

Биологические основы получения и практического применения субклеточных фракций бактерий на модели бруцелл  Биологические основы получения и практического применения субклеточных фракций бактерий на модели бруцелл 

ОГЛАВЛЕНИЕ
Введение.
1. Обзор литературы
1.1. Бруцеллез как зоонозное заболевание и его
распространение.
1.2. Биологические свойства и современная таксономия
рода
1.3. Строение клетки бруцелл и ее антигенная структура.
1.4. Сравнительное изучение белковых систем и состава жирных
кислот в аспекте идентификации и дифференциации бактерий
1.4.1. Белковые системы бактерий.
1.4.1.1. Значимость различных белковых систем в сравнительном изучении бактерий
1.4.1.2.Белковые системы в сравнительной характеристике бруцелл
1.4.2. Изучение спектров жирных кислот в целях идентификации
и дифференциации бактерий.
1.4.2.1. Применение газожидкостной хроматографии для
Ф идентификации различных групп бактерий
1.4.2.2. Газохроматографический анализ жирных кислот применительно к бруцеллам.
1.5. Некоторые аспекты иммуногенеза при бруцеллезе и проблемы диагностики.
1.5.1. Основные элементы иммунитета.
1.5.2. Стадии инфекционного бруцеллезного процесса и его иммунологические проявления.
1.5.3. Диагностика бруцеллеза
1.5.3.1. Клиническая и эпизоотологическая диагностика.
1.5.3.2. Серологическая диагностика.
1.5.3.3. Применение иммуноферментного анализа ИФА
в диагностике бруцеллеза
1.5.3.4. Аллергическая диагностика. Значение методов i vi
1.6. Особенности патогенеза при бруцеллезе. Факторы
патогенности бруцелл
1.7. Разработка средств вакцинопрофилактики бруцеллеза
1.7.1. Живые вакцины
1.7.2. Инактивированные корпускулярные вакцины
1.7.3. Молекулярные вакцины.
1.7.4. Искусственные вакцины.
1.8. Основные биотехнологические подходы к получению субклеточных фракций бруцелл различной функциональной направленности.
1.9. Основные направления национальных и региональных
программ по контролю за бруцеллезом
2. Собственные исследования
2.1. Материалы и методы исследований.
2.1.1. Эпизоотологические исследования.
2.1.2. Характеристика изучаемых культур бактерий и условия их выращивания
2.1.3. Методы фракционирования бактерий
2.1.4. Аналитические методы
2.1.5. Методы диагностических исследований.
2.1.6. Методы изучения иммуногенной активности препаратов
2.1.7. Расчеты экономической эффективности от внедрения
лротивобруцеллезных мероприятий.
2.1.8. Методы статистической обработки.
2.2. Результаты собственных исследований
2.2.1. Субклеточные структуры бактерий в приложении к решению вопросов
таксономии, идентификации и дифференциации
2.2.1.1. Сравнительный анализ белковых спектров бактерий
2.2.1.1.1. Изучение растворимых белков микобактерий
2.2.1.1.2. Белковые системы стафилококков
2.2.1.1.2.1. Сопоставление спектров мембранных белков
стафилококков6
2.2.1.1.2.2. Сопоставление спектров внеклеточных белков в
дифференциации культур стафилококков
21.2.3. Характеристика белковых систем сальмонелл
2.2.1.1.4. Белковые системы бруцелл в сравнительном аспекте
2.2.1.1.4.1. Анализ экзобелков бруцелл
2.2.1.1.4.2. Белки наружной мембраны бруцелл
2.2.1.1.4.3. Анализ суммарных белков клетки СБК.
2.2.1.1.5. Перспективные подходы к сравнительному
изучениюбелковых спектров бактерий на основе многомерного статистического анализа
2.2.1.2. Сравнительный анализ жирных кислот бруцелл с приме
нением метода газохроматографического анализа
2.2.2. Разработка и оптимизация технологической схемы получения из клетки бруцелл субклеточных
фракций различной функциональной направленности .
2.2.2.1. Оптимизация технологии получения протективного
антигена бруцелл и его применение в составе бруцеллезной искусственной вакцины.
2.2.2.1.1. Изучение структурных и функциональных особен
ностей экстрацеллюлярного антигена бруцелл
2.2.2.1.2. Получение протективного антигена бруцелл
и его характеристика.
2.2.2.1.3. Получение бруцеллезной искусственной вакцины БИВ на основе протективного антигена
2.2.2.1.4. Изучение иммуногенных свойств БИВ в
условиях эксперимента
2.2.2.2. Фракционирование клетки бруцелл с целью получения
антигенных препаратов
2.2.2.2.1. Выделение серологически активных фракций
и их использование.
2.2.2.2.1.1. Получение и испытание эритроцитарных антигенных бруцеллезных диагностикумов на основе Б
и Вантигенов бруцелл
2.2.2.2.1.2. Разработка и применение метода экспрессРПГА
ЭРПГА
2.2.2.2.1.3. Применение выделенных антигенных фракций в
иммуноферментном анализе ИФА
2.2.2.2.2. Получение белковой фракции клеток бруцелл со
свойствами аллергена.
2.2.2.2.2.1. Получение белковых фракций и их характеристика
22.2.2. Испытание полученных белковых препаратов в
качестве аллергенов
2.2.2.2.2.3. Применение аллергенных препаратов в непрямой
реакции лизиса лейкоцитов как аллерготеста при
бруцеллеза 1
2.2.2.2.3. Обобщение способа поэтапного фракционирования клетки бруцелл.
2.2.3. Разработка и применение научнообоснованных систем лротивобруцеллезных мероприятий в хозяйствах Нечерноземной зоны России.
2.2.3.1. Комплексный подход к диагностике бруцеллеза в
неблагополучной зоне как метод эпизоотологического надзора.
2.2.3.1.1. Изучение эпизоотологии бруцеллеза крупного
рогатого скота Нечерноземной зоне РФ
2.2.3.1.2. Эпизоотический бруцелезный процесс в Рязанской области
2.2.3.1.3. Изучение гостальности возбудителя бруцеллеза крупного рогатого скота
2.2.3.1.4. Комплексный подход к серологической диагностике бруцеллеза крупного рогатого скота.
2.2.3.1.4.1. Сравнительная оценка некоторых серологических
реакций при диагностике бруцеллеза.
2.2.3.1.4.2. Изучение эффективности РБП с молоком при диагностике бруцеллеза крупного рогатого скота
2.2.3.1.4.3. Изучение влияния гетерогенных вакцин на
показатели серологической диагностики бруцеллеза у коров, иммунизированных против бруцеллеза
2.2.3.2. Вопросы дифференциальной диагностики бруцеллеза в благополучной зоне.
2.2.3.3. Эпизоотологический надзор в конкретных схемах противобруцеллезных мероприятий для зон с различной степенью благополучия по бруцеллезу
2.2.3.3.1. Разработка и внедрение системы противобруцеллезных мероприятий в хозяйствах Рязанской области
2.2.3.3.2. Разработка и внедрение системы противобруцеллезных мероприятий в хозяйствах Нечерноземной зоны РФ
2.2.3.3.3. Разработка системы дифференциальной диагностики бруцеллеза и иерсиниоза и мер по их профилактике.
3. Обсуждение результатов
Выводы
Практические рекомендации
Список литературы


Установлено, что это явление связано прежде всего с изменениями в структуре ЛПС рис. В клетках Бформ ЛПС включает полный набор структурных элементов. Яформы имеют ЛПС, в котором отсутствуют Оспецифические боковые цепи 1, 6 . Разная степень деградации Оцепей обеспечивает существование промежуточных БЯЯБформ. ЯЛПС бруцелл в отличие от БЛПС отсутствовал хиновозамин ЯЛПС более специфичен, чем БЛПС, повидимому, за счет потери общих полисахаридных участков. Так, моноспецифические антисыворотки, полученные к ЯЛПС Вг. Яфазе, агглютинировали только клетки гомологичного штамма и не реагировали с Яклетками других видов бруцелл. Из существующих видов бруцелл только Вг. Вг. Яформе, остальные виды могут реверсировать в исходную форму в разной степени в зависимости от воздействия внешних факторов. Давно известно, что одна из основных причин, вызывающих диссоциацию бруцелл в естественных условиях, воздействие фагов 6. Диссоциация бруцелл и трансформация в 1формы может происходить и под влиянием различных лекарственных препаратов, особенно антибиотиков, действие которых опосредуется клеточной стенкой бактерий , 9 . Явление диссоциации, на наш вгляд, демонстрирует высокую лабильность антигенных структур этих бактерий, которые приобрели способность изменять или терять в первую очередь жесткие структурные антигены, на которые в макроорганизме формируется выраженный иммунный ответ. Таким образом, антигенную дезориентацию иммунной системы макроорганизма можно, повидимому, считать одним из важнейших факторов защиты микроба от иммунных реакций хозяина. Диссоциация бруцелл значительно затрудняет проведение бактериологической и серологической диагностики бруцеллеза, поскольку диагностические препараты, применяемые на практике, изготовляются из типичных 8форм бруцелл. А диссоциированные формы, несмотря на многократное ослабление вирулентных свойств, все же остаются патогенными и при реверсии способны вызвать эпизотический бруцеллезный процесс 4. Таким образом, анализ данных литературы показал, что ультраструктура клетки бруцелл имеет как общие с другими грамотрицательными бактериями черты, так и свои специфические особенности, обнаруживаемые часто лишь на тонком уровне организации. Знание антигенного состава клетки, способов связи антигенных комплексов необходимо для выбора правильного методического подхода к процессу их выделения и очистки в целях практического использования при конструировании профилактических и диагностических препаратов и для других практических задач. В последнее время, наряду с изучением генома бактерий и получением информации о. Этот интерес основан на том, что между последовательностью нуклеотидов в ДНК и аминокислотной последовательностью в белках существует прямая связь 3. Однако, сопоставление белков по сходству в чередовании аминокислот слишком сложно. Широкое применение при сравнительном изучении белков нашли методы гельэлектрофореза, так как установлено, что весьма чувствительным показателем структурных различий близкородственных белков является разница в их электрическом заряде и величине молекулы. К настоящему времени разработано множество вариантов электрофореза белков и эти методы стали на сегодняшний день рутинными. Электрофорез в полиакриламидном геле ПААГ занимает ведущее положение среди аналитических методов фракционирования белковых молекул за счет высокой разрешающей способности и возможности получения таких характеристик белков, как заряд, молекулярная масса, изоэлектрическая точка, конформация. Широкое распространение находит двумерный электрофорез, позволяющий проводить так называемое картирование сложных белковых смесей , 2. Специфическое расположение фракций, полученное при электрофоретическом разделении получило название электрофореграмма, как синоним применяются термины протеннограмма, белковый спектр. В настоящее время накоплен обширный материал по применению анализа белковых спектров в характеристике самых разнообразных микроорганизмов. Установлена значимость различных белковых систем, организованных в клетке в конкретные структуры, в определении уровня дифференциации бактерий.

Рекомендуемые диссертации данного раздела

28.06.2016

+ 100 бесплатных диссертаций

Дорогие друзья, в раздел "Бесплатные диссертации" добавлено 100 новых диссертаций. Желаем новых научных ...

15.02.2015

Добавлено 41611 диссертаций РГБ

В каталог сайта http://new-disser.ru добавлено новые диссертации РГБ 2013-2014 года. Желаем новых научных ...


Все новости

Время генерации: 0.207, запросов: 108