Особенности взаимодействия культивируемых мезенхимальных и гемопоэтических стволовых клеток человека в условиях пониженного содержания кислорода

Особенности взаимодействия культивируемых мезенхимальных и гемопоэтических стволовых клеток человека в условиях пониженного содержания кислорода

Автор: Жамбалова, Арюна Пурбодоржиевна

Шифр специальности: 03.03.01

Научная степень: Кандидатская

Год защиты: 2010

Место защиты: Москва

Количество страниц: 151 с. ил.

Артикул: 4638202

Автор: Жамбалова, Арюна Пурбодоржиевна

Стоимость: 250 руб.

ВВЕДЕНИЕ
ГЛАВА I. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ.
1. Стволовые клетки человека
1.1. Типы стволовых клеток источники, изучение и практическое
применение.
1.2. Мезенхимальные стволовые клетки костного мозга человека
1.2.1. Характеристика мезенхимальных стволовых клеток костного .
1.2.2. Особенности культивирования мезенхимальных стволовых клеток
костного мозга человека.
1.3. Гемопоэтические стволовые клетки человека
1.3.1. Характеристика гемопоэтических стволовых клеток из пуповинной
крови человека
1.3.2. Особенности культивирования гемопоэтических стволовых
2. Взаимодействие мезенхимальных и гемопоэтических стволовых клеток человека
2.1. Стимуляция гемопоэза факторами, синтезируемыми
мезенхимальными стволовыми клетками костного мозга человека
2.2. Молекулы адгезии и фенотип мезенхимальнх стволовых клеток при взаимодействии с гемопоэтическими стволовыми
клетками
2.3. Участие мезенхимальных стволовых клеток костного мозга
человека в активации гемопоэза в условиях пониженного содержания кислорода
3. Влияние пониженного содержания кислорода на культивируемые прогениторные клетки
3.1. Эффекты гипоксии на мезенхимальные стволовые клетки костного
мозга человека i vi.
3.2. Возможные механизмы реализации действия пониженного
содержания кислорода на клетки
ГЛАВА 2. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ.
2.1. Культуры мезенхимальных стволовых клеток костного мозга и эмбриональных фибробластов человека
2.1.1. Культуральные среды, реактивы, пластик, оборудование
2.1.2. Выделение и культивирование мезенхимальных стволовых клеток
костного мозга человека.
2.1.3. Культивирование эмбриональных фибробластов человека.
2.1.4. Криоконсервация клеток
2.2. Исследование свойств мезенхимальных стволовых клеток костного мозга человека в нормоксии и при пониженном содержании кислорода
2.2.1. Культивирование клеток при пониженном содержании
кислорода.
2.2.2. Анализ пролиферативной активности мезенхимальных стволовых
клеток костного мозга человека
2.2.3. Иммуноцитофлюориметрический анализ клеток
Иммунофенотипирование мезенхимальных стволовых клеток костного мозга человека.
2.2.4. Иммунофермснтный анализ продукции цитокинов в среде
культивирования мезенхимальных стволовых клеток костного мозга человека
2.2.5. Оценка остеогенного дифференцировочного потенциала
мезенхимальных стволовых клеток костного мозга человека.
2.2.6. Оценка адипогенного дифференцировочного потенциала мезенхимальных стволовых клеток костного мозга
человека
2.2.7. Оценка способности мезенхимальных стволовых клеток и
эмбриональных фибробластов человека образовывать капилляроиодобные структуры.
2.2.8. Цитофлюриметрический анализ уровня транскрипционного
фактора, индуцируемого при гипоксии НИМа в цитоплазме мезенхимальных стволовых клеток
2.3. Сокультивированис мезенхимальных клеток предшественников и гемопоэтических стволовых клеток
2.3.1. Выделение и культивирование гемопоэтических стволовых клеток
пуповинной крови человека
2.3.2. Выявление начальных этапов дифференцировки гемопоэтических стволовых клеток постановка теста на колониеобразованис
2.3.3. Сокультивирование эмбриональных фибробластов человека и
гемопоэтических стволовых клеток.
2.4. Статистическая обработка данных.
ГЛАВА 3. РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЙ
3.1. Характеристика культивируемых мезенхимальных стволовых клеток костного мозга человека
3.1.1. Морфофункциональная характеристика мезенхимальных
стволовых клеток i vi
3.1.2. Анализ кинетики роста мезенхимальных стволовых клеток в
культуре.
3.1.3. Иммунофенотипическая характеристика культивируемых
мезенхимальных стволовых клеток
3.1.4. Оценка дифференцировочного потенциала мезенхимальных
стволовых клеток i vi
3.1.5. Анализ продукции мезенхимальных стволовых клеток в среде
культивирования
3.2. Сравнительная характеристика морфофункциональных и
иммунофенотнпичсских особенностей мезенхимальных стволовых клеток, культивируемых в нормоксии О2 и в условиях пониженного содержания кислорода 1 и 5 О
3.2.1. Морфофункциональная характеристика и оценка
жизнеспособности мезенхимальных стволовых клеток, культивируемых в нормоксии и при пониженном содержании кислорода
3.2.2. Анализ кинетики роста мезенхимальных стволовых клеток в нормоксии и при пониженном содержании кислорода.
3.2.3. Анализ иммунофенотипа мезенхимальных стволовых клеток, культивируемых в нормоксии и при пониженном содержании кислорода.
3.2.4. Оценка дифференцировочного потенциала мезенхимальных стволовых клеток в нормоскии и при пониженном содержании кислорода.
3.2.5. Анализ продукции цитокинов в среде культивирования мезенхимальных стволовых клеток в нормоксии и при пониженном содержании кислорода.
3.2.6. Цитофлюриметрический анализ уровня транскрипционного
фактора, индуцируемого при гипоксии НИМ а в мезенхимальных стволовых клетках, культивируемых в нормоксии и при пониженном содержании кислорода
3.3. Сокультивироваиис мезенхимальных клстокпрсдшественников и
гсмопоэтических стволовых клеток в пуповинной крови человека
3.3.1. Формирование гсмопоэтических островков при совместном
культивировании мезенхимальных и гемопоэтических стволовых клеток в нормоксии и в условиях пониженного содержания кислорода
3.3.2. Цитофлюориметрический анализ экспрессии поверхностных
маркеров мезенхимальных стволовых клеток при сокульгивировашш с гемоноэтическими стволовыми клетками в нормоксии и при пониженном содержании кислорода
3.3.3. Выявление способности гемопоэтических стволовых клеток к
колониеобразованию в нормоксических условиях и при пониженном содержании кислорода после сокультивирования с мезенхимальными стволовыми клетками.
3.3.4. Анализ продукции цитокинов при сокультивнровании
мезенхимальных и гемопоэтических стволовых клеток в нормоксии и при пониженном содержании кислорода.
3.3.5. Сокультивироваиис эмбриональных фибробластов человека и
гсмопоэтических стволовых клеток в нормоксии и при пониженном содержании кислорода.
Глава 4. ОБСУЖДЕНИЕ РЕЗУЛЬТАТОВ
ВЫВОДЫ.
СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ


Мезенхимальные стволовые клетки костного мозга человека способны i vi к созданию кроветворного микроокружения и поддержанию гемопоэза путем прямых межклеточных контактов с кроветворными элементами и посредством продукции гемопоэтических ростовых факторов. ГЛАВА 1. СТВОЛОВЫЕ КЛЕТКИ ЧЕЛОВЕКА. Типы стволовых клеток источники, изучение и практическое применение. В последние годы большое внимание уделяется исследованию стволовых клеток, к детальному изучению которых в е годы XX века впервые обратились представители отечественной науки А. Я. Фриденштейн и И. Л. Чертков с сотрудниками. В монографии, посвященной клеточным основам иммунитета, дана подробная характеристика стволовых клеток, которые дают начало кроветворной и лимфоидной ткани, в том числе и клеткам, осуществляющим иммунологические реакции, и сделана попытка классифицировать их но степени дифференцирования Фриденштейн, Чертков, . Изучая кроветворную стволовую клетку, авторы пришли к убеждению, что удалось экспериментально подтвердить унитарную теорию кроветворения, предложенную в году А. А. Максимовым, в которой говорилось о единой родоначальной клетке. Кроме того, в году А. А. Максимовым было выдвинуто предположение о том, что родоначальными функциями в системе кроветворения обладают не только подвижные, но и оседлые клетки, которые были названы недифференцированными ретикулярными элементами. Таким образом, еще в начале XX века была сформулирована концепция о наиболее ранних клеточных элементах организма стволовых клетках, способных давать начало специфическим клеточным линиям. Согласно современным данным, стволовые клетки СК это специализированные клетки, отличающиеся наличием трех главных свойств 1 СК способны к делению и самообновлению на протяжении неопределенно длительного периода 2 они могут дифференцироваться в клетки специализированных типов 3 их деление может происходить асимметрично, в результате которого вместо образования двух одинаковых дочерних клеток обычно одна дочерняя клетка является более специализированной, а другая остается недифференцированной. Дочерняя клетка, развивающаяся после деления СК по нуги дифференцировки в специализированную клетку, называется клсткойпредшественницей, а также прскурсорной или прогениторной , i, . Вермель, . Пальцев, Смирнов, Романов и др. Кроме того, появились сообщения о том, что в году из фибробластов мыши, а в году из человеческих фибробластов, с помощью трансдукции отдельных генов, получены, так называемые, индуцированные плюрипотентные стволовые клетки i i i i, , i, , i , , Vi, , . Известно, что все перечисленные типы СК существенно различаются по одному из основных признаков этих клеток дифференцировочному потенциалу. Тотипотентностыо от лаг. Термин плюрипотентность используют для описания свойств клетки, которая может быть источником клеток производных любого из трех зародышевых слоев мезодермы, эндодермы и эктодермы, к таким клеткам относят эмбриональные I. Мультипотентность способность продуцировать определенное количество клеточных линий дифференцировки, соотвсгствующих их месторасположению. Определение унипотентная СК относится к клеткам взрослых организмов, дифференцирующихся в обычных условиях только в специализированные клетки одного определенного типа i, i, . К ним принадлежат эпидермальные стволовые клетки , i, , а также нейрональные стволовые клетки , i, , . Имеющиеся в литературе данные свидетельствуют о том, что СК в организме находятся в постоянном контакте со специфическим микроокружением, или нишей i, транслирующей внешние сигналы и регулирующей самообновление и дифференцировку , , , i, . Для ниши характерны наличие молекул внеклеточного матрикса и присутствие соседних клеток, продуцирующих факторы роста и другие регуляторные молекулы i, , i, i, , , . Ниша активно участвует в регуляции пролиферации и дифференциации СК, она обеспечивает самоподдержанис стволовых клеток и длительное их пребывание в состоянии покоя фаза . Основное назначение ниши создание условий для максимальной защищенности стволовых клеток от внешних воздействий Терских, Васильев, Ворогеляк, . Известно, что СК обладают некоторыми характерными морфологическими признаками, типичными для дифференцированных клеток.

Рекомендуемые диссертации данного раздела

28.06.2016

+ 100 бесплатных диссертаций

Дорогие друзья, в раздел "Бесплатные диссертации" добавлено 100 новых диссертаций. Желаем новых научных ...

15.02.2015

Добавлено 41611 диссертаций РГБ

В каталог сайта http://new-disser.ru добавлено новые диссертации РГБ 2013-2014 года. Желаем новых научных ...


Все новости

Время генерации: 0.200, запросов: 157