Внеклеточные пептидазы грибов, образующих биотические связи с насекомыми

Внеклеточные пептидазы грибов, образующих биотические связи с насекомыми

Автор: Семенова, Татьяна Александровна

Шифр специальности: 03.02.12

Научная степень: Кандидатская

Год защиты: 2011

Место защиты: Москва

Количество страниц: 131 с. ил.

Артикул: 5079672

Автор: Семенова, Татьяна Александровна

Стоимость: 250 руб.

Введение
Глава 1 Обзор литературы
1.1. Биотические связи грибов и насекомых
1.1.1. Типы экологических взаимоотношений грибов и насекомых
1.1.2. Микофагия насекомых
1.1.3. Паразитические взаимодействия грибов и насекомых энтомолатогенные грибы
1.1.3.1. Энтомофторовые грибы
1.1.3.2. Лабульбенисвыс грибы
1.1.3.3. Энтомолатогенные клавиципитальные грибы
1.1.4. Взаимовыигрышные системы грибов и насекомых
1.1.4.1. Взаимоотношения ссптобазидиевых грибов и насеком ых
1.1.4.2. Взаимодействия офиостомовмх грибов с жукамикороедами
1.1.4.3. Биотические связи грибов и общественных насекомых термиты и ТегтИотусеБ Бр.
1.1.4.4. Биотические связи грибов и общественных насекомых
грибной сад
1.2. Сскрстируемые протсолитическис ферменты грибов
1.2.1. Определение и классификация протеолитических ферментов
1.2.1.1. Аспартильные пептидазы
1.2.1.2. Сериновыс пептидазы
1.2.1.3. Металлопротеиназы
1.2.1.4. Цистеииовые пептидазы
1.2.1.5. Треониновые пептидазы
1.2.1.6. Глутаминовые пептидазы
1.2.1.7. Экзопептидазы грибов
1.3. Влияние условий культивирования на секрецию протеолитических ферментов
1.3.1. среды
1.3.2. Влияние источников азота на величину внеклеточной
протеолитической активности
1.3.3. Влияние источников углерода на величину внеклеточной протеолитической активности
1.3.4. Влияние совместного культивирования i vi на внеклеточную протеолнтическую активность
1.4. Протеолитичсские ферменты в системах, образованных грибами
и насекомыми
1.4.1. Внеклеточные пептидазы энтомоиа гогенных грибов
1.4.2. Адсорбция пептидаз энтомопатогенных грибов на кутикуле насекомых
1.4.3. Зависимость субстратной специфичности внеклеточных пептидаз от экологических особенностей грибов
1.4.4. Связь ферментативной активности и вирулентности патогенных грибов
1.5. Экология и систематика вида iii
1.6. Протсолитическис фермеггты сапротрофных грибов в системах
i vi
1.7. Систематика и экология рода i и вида i i
1.8. Секретируемые пептидазы .i
1.9. Секретируемые гидролитические ферменты симбиотических грибов в грибных садах
Глава 2 Материалы и методы
2.1. Виды грибов, использованные в экспериментальной работе
2.2. Культивирование грибов
2.3. Определение буферных свойств
2.4 Определение протеолитической активности
2.4.1. Определение протеолитической активности грибов по пнитроанилидным субстратам
2.4.2. Определение активности по желатине
2.4.3. Определение протеолитической активности по азоказеину
2.4.3.1. Определение классспецнфичной активности пептидаз методом ингибиторного анализа
2.5. Определение хитиполитической активности С. iii
2.6. Очистка сериновой пептидазы из С. iii и
металлопротеиназы из i
2.6.1. Очистка пептидазы из С. iii аффинная
хроматография на бацитрацинсилохроме
2.6.2. Очистка пептидазы из С. iii гель хроматография на x в режиме
2.6.3. Очистка пептндзы из . i осаждение сульфатом аммония
2.6.4. Очистка пептидазы из . i процедура па
x А
2.6.5. Очистка пептидазы из . i ионообменная
хроматография на в режиме
2.6.6. Очистка пептидазы из . i гельхроматография на x в режиме
2.7. Электрофоретическое исследование полученных препаратов
2.7.1. Электрофорез в ПААГ в денатурирующих условиях
2.7.2. Электрофорез с окраской по активности
2.8. Определение физикохимических и кинетических свойств ферментов
2.8.1. Определение рНоптимумов ферментов
2.8.2. Определение стабильности ферментов
2.8.3. Определение температурного оптимума ферментов
2.8.4. Определение температурной стабильности ферментов
2.9. Адсорбция сериновой пептидазы из С. iii на кутикуле
. i в зависимости от
2 Воздействие препарата пептидаз из . iii на кутикулу
. i
2. Молекулярно филогенетический анализ грибных симбионтов
Результаты и обсуждение
Глава 3. Определение корреляций между спектром секретируемых пептидаз и таксономическим положением или принадлежностью к определенным трофическим группам грибов
3.1. Изучение способности мицелиалыгых грибов к росту на агаризованных средах, содержащих белок как единственный источник углерода иили азота
3.2. Изучение влияния состава среды на внеклеточную активность мицелиальных грибов в погруженной культуре
3.3. Определение классспецифичной активности пептидаз в культуральной жидкости мицелиальных грибов
3.4. Определение рНоптимумов общей и классспецифичной активности пептидаз в культуральной жидкости мицелиальных грибов
3.5. Экзо и эндопептидазная активность исследуемых мицелиальных грибов
Глава 4. Изучение внутривидовой изменчивости протеолитической активности у грибов на примере системы грибной сад
4.1. Определение общей и классспецифичной активности пептидаз . в водных смывах мицелия из грибных садов
4.2. Определение буферных свойств смывов мицелия . из грибных садов и мицелия чистых культур грибов
4.3. Определение рНоптимумов общей и классспецифичной активности пептидаз в водных вытяжках мицелия . из грибных садов
4.4. Корреляция между спектрами внеклеточных пептидаз и филогенетическим положением .
4.5. Определение субстратной специфичности пептидаз штаммов . в грибных садах
Глава 5. Сравнительный анализ свойств наиболее представленных пси гидаз грибов С. iii, . i и .
5.1. Изучение влияния состава среды на внеклеточную протеолитическую активность С. iii и .i
5.2. Очистка пептидазы, секретируемой С. iii
5.3. Очистка пептидазы, секретируемой . i
5.4. Определение физикохимических и кинетических свойств пептидаз С. iii, i и .
5.4.1.Температурный оптимум ферментов
5.4.2. Температурная стабильность ферментов
5.4.3. Определение оптимумов ферментов
5.4.4. Определение стабильности ферментов
5.5. Определение субстратной специфичности ферментов
5.6. Адсорбция сериновой пептидазы . iii на кутикуле
. i в зависимости от
5.7. Воздействие сериновой пептидазы . iii и препарата металлопротеиназы . i на белки кутикулы . i
Выводы
Список литературы


Изучение внеклеточных пептидаз грибного симбионта i в системе грибного сада по сравнению с близкородственным свободноживущим видом i i. Определение адаптивных изменений в спектре внеклеточных пептидаз, вызванных переходом фибов к обитанию с насекомыми. Проведение сравнительного анализа свойств наиболее представленных пептидаз грибов iii i i и i . Глава 1. Экологические взаимодействия грибов и насекомых приводят к образованию разнообразных систем, интересных с точки зрения изучения взаимоотношений между организмамипредставителями разных царств. Так, системы грибнасекомое часто оказываются лишь частью сложной сети взаимоотношений, включающих также высшие растения, бактерии, вирусы и другие организмы. Биологические системы, как правило, включают разнообразные типы экологических взаимоотношений мутуализм, антагонизм, паразитизм, форезию кратковременное использование другого организма для передвижения и. Характер взаимоотношений между организмами не всегда может быть точно определен, и исследования, проводимые на известных мутуалистических системах, часто выявляют признаки антагонистической ассоциации. Известно, что лишайники, долгое время считавшиеся мутуалистической ассоциацией, в настоящее время классифицируются как умеренный паразитизм гриба на водоросли. Взаимовыгодные отношения растений семейства бобовые и клубеньковых бактерий также поддерживаются определенными антагонистическими процессами известно, что мутации, возникающие при репликации ДНК бактерий, приводят к образованию более жизнеспособных и быстро размножающихся бактерий, практически не фиксирующих азот, а питающихся лишь за счет растенияхозяина. Однако снижение фиксации азота штаммом бактерии немедленно приводит к активации систем контроля и прекращению поступления питательных веществ растения к месту локализации эндосимбионта. Таким образом, обеспечивается устойчивость мутуалистической ассоциации и отбор штаммов бактерий, эффективно фиксирующих азот i . Возникающие системы разделяют на облигатные, в которых организмы не могут жить по отдельности, и оппортунистические. Среди систем, образуемых грибами и насекомыми, встречаются практически все типы взаимоотношений среди паразитических взаимодействий наиболее изученными являются микозы, вызываемые грибамиэнтомопатогенами. Мутуалистичсскнс системы, как правило, связаны с использованием насекомыми способности грибов к разложению целлюлозы, при этом насекомое осуществляет распространение спор гриба в новые местообитания. Наиболее интересными и изученными мутуалистическими системами являются грибные сады, создаваемые муравьями и термитами, взаимоотношения аскомицетных грибов родов i и i с жукамикороедами, эндосимбиотические дрожжи, обитающие в пищеварительном тракте некоторых жуков, и системы, включающие насекомых и базидиомицетный гриб рода ii. К практически нейтральным слабопаразитическим взаимоотношениям иногда относят взаимодействия видов лабульбениевых грибов i, которые обитают на покровах насекомых, но при этом не оказывают заметного негативного воздействия на жизнедеятельность своих хозяев. Насекомые, образующие биотические связи с грибами, в основном, встречаются среди представителей отрядов , i, , и I. Грибы, участвующие в создании таких систем, встречаются среди видов семейства , родов i и i , несовершенные стадии, лабульбениевых грибов i, дрожжей , видов iii и выделяемых в отдельную таксономическую группу энтомофторовых грибов. Облигатные взаимоотношения также известны для некоторых видов базидиомицетов ii ii и отдельных видов семейств i и II ii, . Плодовые тела и спороносные структуры грибов представляют собой пищевой субстрат и среду обитания для многих видов насекомых, однако, в отличие от высших растений, также представляющих экологическую нишу для насекомых, плодовые тела грибов существуют лишь в течение ограниченного периода времени, поэтому облигатная мнкофагия встречается относительно редко , i, . Несмотря на то, что микофагия известЕш для многих таксономических групп грибов, наибольшее число исследований посвящено развитию насекомых в плодовых телах базидиомицетов.

Рекомендуемые диссертации данного раздела

28.06.2016

+ 100 бесплатных диссертаций

Дорогие друзья, в раздел "Бесплатные диссертации" добавлено 100 новых диссертаций. Желаем новых научных ...

15.02.2015

Добавлено 41611 диссертаций РГБ

В каталог сайта http://new-disser.ru добавлено новые диссертации РГБ 2013-2014 года. Желаем новых научных ...


Все новости

Время генерации: 0.215, запросов: 165