Селекция производственно-перспективных штаммов бифидобактерий, выделенных от детей

Селекция производственно-перспективных штаммов бифидобактерий, выделенных от детей

Автор: Жиленкова, Ольга Геннадьевна

Шифр специальности: 03.02.03

Научная степень: Кандидатская

Год защиты: 2011

Место защиты: Москва

Количество страниц: 176 с. ил.

Артикул: 4918573

Автор: Жиленкова, Ольга Геннадьевна

Стоимость: 250 руб.

ВВЕДЕНИЕ
ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ
ГЛАВА 1. ХАРАКТЕРИСТИКА БИФИДОБАКТЕРИЙ
1.1. Анатомоморфологические свойства бифидобактерий
1.2. Цикл развития бифидобактерий
1.3. Культуральные свойства бифидобактерий
1.4. Ферментативные свойства
1.5. Экологические ниши обитания бифидобактерий
1.6. Антибиотикочувствительность бифидобактерий
ГЛАВА 2. СОСТОЯНИЕ БИФИДОФЛОРЫ ДЕТЕЙ И ЭТАПЫ Е ФОРМИРОВАНИЯ
2.1 .Характеристика микрофлоры желудочнокишечного тракта
2.2. Физиологические функции бифидобактерий
2.3. Формирование бифидофлоры в организме ребенка
ГЛАВА 3. ОТБОР ПРОБИОТИЧЕСКИХ ШТАММОВ
БИФИДОБАКТЕРИЙ
СОБСТВЕННЫЕ ИССЛЕДОВАНИЯ
ГЛАВА 4. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ
4.1. МАТЕРИАЛЫ
4.1.1 .Объекты исследования
4.1.2. Штаммы микроорганизмов
4.1.3. Синбиотик
4.1.4. Животные
4.1.5. Питательные среды
4.1.6. Антибиотики
4.1.7. Биохимические микротестсистемы
4.1.8. Реактивы
4.1.9. Приборы и оборудование
4.2. МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЙ
4.2.1. Отбор и транспортировка материала
4.2.2. Выделение и культивирование бифидобактерий
4.2.3. Изучение культуральных свойств бифидобактерий
4.2.4. Определение содержания жизнеспособных бифидобактерий
4.2.5 Сохранение чистых культур бифидобактерий 1
4.2.6. Активизация лиофилизированных культур бифидобактерий
4.2.7. Изучение динамикинакопления бактериальноймассы
бифидобактерий
4 Определение активной кислотности
.9. Определение титруемой кислотности
4.2 Определение сквашивающей активности штаммов
4.2 Приготовление бактериальной суспензии
4.2 Определение сахаролитической активности
4.2 Определение каталазной активности
4.2 Определение продукции желатиназы
4.2 Генотипирование бифидобактерий
4.2 Определение антибиотикорезистентности бифидобактерий
методом двойных серийных разведений
4.2 Определение антибиотикорезистентности бифидобактерий
дискодиффузионным методом
4.2 Определение антагонистической активности
4.2 Определение безвредности штаммов бифидобактерий для
лабораторных животных
4.2 Определение устойчивости бифидобактерий к солям желчи
4.2 Контроль культуры бифидобактерий на наличие посторонней
микрофлоры
4.2 Контроль активности и стерильности питательных сред
4.2 Статистическая обработка полученных данных
Глава 5. РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЯ И ИХ ОБСУЖДЕНИЯ
5.1 ФЕНОТИПИЧЕСКИЕ СВОЙСТВА БИФИДОБАКТЕРИЙ
5.1.1 Морфологические характеристики референсных штаммов
бифидобактерий
5.1.2.Морфологические характеристики культур бифидобактерий,
выделенных от детей
5.1.3. Ферментативная активность бифидобактерий
5.2. ГЕНОТИПИРОВАНИЕ БИФИДОБАКТЕРИЙ
5.3. СРАВНЕНИЕ РЕЗУЛЬТАТОВ ГЕНОТИПИРОВАНИЯИ ИДЕНТИФИКАЦИИ БИФИДОБАКТЕРИЙ ПО ФЕРМЕНТАТИВНЫМ ПРИЗНАКАМ
5.4.ИЗУЧЕНИЕ АНТИБИОТИКОРЕЗИСТЕНТНОСТИ. БИФИДОБАКТЕРИЙ
5.4.1. Метод микроразведений в полужидкой питательнойсреде 5.4.2 Дискодиффузионный метод определения антибиотикорезистентности бифидобактерий
5.5. КУЛЬТУРАЛЬНЫЕ СВОЙСТВ А БИФИДОБАКТЕРИЙ
5.5.1. Показатели культивирования бифидобактерий, выделенных от детей
5.5.2. Сравнение показателей культивирования производственных и производственно перспективных штаммов бифидобактерий
5.6. ИЗУЧЕНИЕ БЕЗВРЕДНОСТИ.ШТАММОВ БИФИДОБАКТЕРИЙ, ВЫДЕЛЕННЫХ ОТ ДЕТЕЙ
5.7. ИССЛЕДОВАНИЕ АНТАГОНИСТИЧЕСКОЙ АКТИВНОСТИ ШТАММОВ БИФИДОБАКТЕРИЙ
5.8. ИССЛЕДОВАНИЕ УСТОЙЧИВОСТИ.ШТАММОВ БИФИДОБАКТЕРИЙ К СОЛЯМ ЖЕЛЧИ
5.9. ИЗУЧЕНИЕ ШТАММОВБИФИДОБАКТЕРИЙ ПРИ СОВМЕСТНОМ КУЛЬТИВИРОВАНИИ
5.9.1. Оценка длительности хранения штаммов бифидобактерий в бульонной культуре
5.9.2. Проявление синергидного эффекта совместного культивирования на физиологическую активность штаммов
5 Исследование консорциумов производственных и производственно перспективных штаммов бифидобактерий ЗАКЛЮЧЕНИЕ ВЫВ ОД Ы
ПРАКТИЧЕСКИЕ РЕКОМЕНДАЦИИ БИБЛИОГРАФИЯ

3.
СПИСОК СОКРАЩЕНИЙ, ИСПОЛЬЗУЕМЫХ В ТЕКСТЕ
БГКП бактерии группы кишечных палочек
БС среда для культивирования бифидобактерий производства Государственного научного центра прикладной микробиологии г. Оболенск
ГКНМ Государственная коллекция микроорганизмов нормальной микрофлоры ФГУН МНИИЭМ им. Г.Н. Габричевского Роспотребнадзора
ГМ гидролизатномолочная среда
ГОС галактоолигосахариды
ЖКТ желудочнокишечный тракт
КЖ культуральная жидкость
КОЕ колониеобразующая единица
Лагфаза период между посевом культуры бактерий и началом ее экспоненциального роста
МПА мясопептонный агар
МГ1К минимальная подавляющая концентрация антибиотика
2 4 среды для культивирования лакто и бифидобактерий
МУК методические указания
НТМ никотинамид аденин динуклеотид добавка к среде МюллераХинтона
ОСМ оптический стандарт мутности
ОЕ оптическая единица
ОСО опытный стандартный образец
ПЦР полимеразная цепная реакция
Т градусы Тернера
ТУ технологические условия
СанПиН Санитарные нормы и правила
УПБ условнопатогенные бактерии
УПМ условнопатогенные микроорганизмы
ФОС фруктоолигосахара
ФСП Фармакологическая статья производства
АТСС i i американская коллекция типовых культур
v ii немецкая
коллекция микроорганизмов
дезоксирибонуклеозидтрифосфаты
дидезоксирибонуклеозидтрифосфаты
i ii японская коллекция
микроорганизмов
среднее арифметическое
стандартная ошибка отклонения от среднего арифметического значения
i i ii
i i i i
i
рибосомальная РЖ трансальдолаза
i ощущение чувства кворума
ВВЕДЕНИЕ


На морфологию клеток оказывают влияние разнообразные факторы температура культивирования, состав питательных сред несоответствие количества азотистых оснований потребностям клеток в источниках питания, степень анаэробиоза и газовый состав среды, кислотность среды в кислой среде образуются пузырчатые формы, при подщелачивании среды грануляция клеток исчезает. Например, на гидролизатномолочной среде и в молоке клетки бифидобактерий имеют склонность к образованию палочек без ветвления. Бифидобактерии, выращенные на печеночной среде, и при добавлении в среду катионов калия,, натрия, цезия бывают с четко выраженной бифуркацией при добавлении же в среды двухвалентных ионов кальция, бария, магния. Такую зависимость изменения морфологии от воздействия внешних факторов назвали переадаптацией к условиям окружающей среды , , 7. По способности образовывать булавовидные формы бифидобактерии близки к коринсбактериям, а по способности ветвиться к актиномицетам. Изза вариабельности морфологии они имеют сходство и с другими микроорганизмами нокардиями, битурибактериями , . Исходной формой в клеточном цикле бифидобактерий, согласно данным Н 8, является кокковидная клетка, способная последовательно превращаться в. Кокковидные и палочковидные формы в равной степени являются транзиторными, и чаще встречаются в поздней экспоненциальной и стационарной фазах развития популяции , , , , , 7. По данным V 6, на средах, оптимальных по составу, клетки бифидобактерий могут сохранять форму прямых или изогнутых изящных палочек до двадцати двух лет. Популяция в своем развитии проходит несколько стадий фазу задержки роста, в которой происходит адаптация культуры к условиям культивирования лагфазу, вегетативного размножения экспоненциальную фазу, стационарную фазу и фазу гибели популяции. Лагфаза роста iii длится часа и характеризуется преобладанием палочковидных клеток. Ещ ii Н. В экспоненциальной фазе, длительность которой составляет от до часов, накапливаются вегетативно размножающиеся клетки, характеризующиеся последовательной дифференциацией и трансформацией транзиторных палочковидных и коккоидных форм в многократно почкующиеся и дихотомически ветвящиеся многоклеточные структуры, которые, распадаясь и дифференцируясь, образуют репродуктивные формы. Во время стационарной стадии роста часов начинается старение популяции, обнаруживаются почкующиеся глобулярные и булавовидные формы. Их появление обусловлено развитием в постоянно изменяющихся неблагоприятных по физикохимическим параметрам условиях нарастанием кислотности среды за счет накопления токсических продуктов метаболизма несоответствием температуры культивирования степени анаэробиоза уменьшением концентрации источников питания, увеличением популяционного давления , , 2, 5. В часовой культуре преобладают древовидноветвящиеся и почкующиеся мультисептированные формы . На сутки образуется мицеллиальный конгломерат бифидопласт своего рода многоклеточная структура, представленная морфологически и физиологически неоднородными клетками , , , . Образование гетерогенного многоклеточного бифидопласта осуществляется, при сочетании равновеликого бинарного деления с множественным аполярным делением палочковидных клеток, результатом которого является образование коккоидов I и II типа. Структура клеточной стенки коккоидов I типа соответствует строению клеточной стенки материнской особи, тогда как коккоиды II типа отличаются трехслойной клеточной стенкой и обилием накопления гранул полифосфата и гликогена, что сближает их со спорой бацилл. Из коккоидов в благоприятных условиях развиваются палочковидные формы , , , . В поздней стационарной фазе в зависимости от состава среды и условий хранения от 3 до суток, происходит старение и отмирание популяции. Наряду с незначительным количеством делящихся клеток характерно появление кластеров спонтанно лизирующихся особей и целых фрагментов мицелия. В фазе отмирания культуры, на поверхности клеток образуются полисахаридные капсулы, встречаются раздутые, вакуолизированные инволюционные формы, происходит просветление цитоплазмы, дифференциация фибрилл и лизис клеток. Деление клеток бифидобактерий осуществляется путем центростремительной инвагинации цитоплазматической мембраны, сопровождающееся образованием клеточной стенки , , , 9.

Рекомендуемые диссертации данного раздела

28.06.2016

+ 100 бесплатных диссертаций

Дорогие друзья, в раздел "Бесплатные диссертации" добавлено 100 новых диссертаций. Желаем новых научных ...

15.02.2015

Добавлено 41611 диссертаций РГБ

В каталог сайта http://new-disser.ru добавлено новые диссертации РГБ 2013-2014 года. Желаем новых научных ...


Все новости

Время генерации: 0.205, запросов: 165