Участие трансформирующего фактора роста- β в клеточных реакциях при атерогенезе

Участие трансформирующего фактора роста- β в клеточных реакциях при атерогенезе

Автор: Калинина, Наталья Игоревна

Шифр специальности: 03.00.25

Научная степень: Кандидатская

Год защиты: 2001

Место защиты: Москва

Количество страниц: 130 с. ил

Артикул: 344629

Автор: Калинина, Наталья Игоревна

Стоимость: 250 руб.

ВВЕДЕНИЕ.
ГЛАВА ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ.
1.1 РОЛЬ ЦИТОКИНОВ В РАЗВИТИИ АТЕРОСКЛЕРОТИЧЕСКИХ ПОРАЖЕНИЙ.
1.2 Структура изоформ и рецепторов и регуляция их экспрессии
1.2.1 Изоформы
1.2.2 Рецепторы к i связывание лиганда
1.3 Белки специфические внутриклеточные медиаторы сигнала р.
1.3.1 зависимый путь передачи сигнала.
1.3.2 Альтернативные пути передачи сигнала
1.4 зависимые эффекты , которые могут иметь значение для
развития атеросклеротических поражений
1.4.1 Подавление пролиферации.
1.4.2 Индукция дифференцировки клеток.
1.4.3 Влияние на продукцию свободных радикалов
1.5 Гипотезы о юли в развитии атеросклеротических поражений в
СВЕТЕ ОСНОВНЫХ КОНЦЕПЦИЙ АТЕРОГЕНЕЗА
1.5.1 Концепция о формировании атеросклеротических поражений в
результате избыточного накопления атерогенных липопротеидов.
1.5.2 Воспалительная теория атерогенеза.
1.5.3 Гипотеза о развитии атеросклероза в ответ на повреждение
1.5.4. Перекисная теория формирования атеросклеротических поражений.
1.6 ИЗОФОРМЫ И РЕЦЕПТОРЫ в КЛЕТКАХ АТЕРОСКЛЕРОТИЧЕСКИХ
ПОРАЖЕНИЙ I I.
И. ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНАЯ ЧАСТЬ
ГЛАВА II. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ
2.1 Материалы
2.1.1 Аутопсийный материал.
2.1.2 Клеточные культуры.
2.1.3 Антитела.
2.1.4 Олигонуклеотидные последовательности.
2.2 Методы.
2.2.1 Метод иммуногисто и иммуноцитохимического выявления антигенов
2.2.2 Выделение РНК
2.2.3 Анализ мРНК с помощью ОТПЦР.
2.2.4. Очистка фрагментов ДНК. 5
2.2.5 Расщепление фрагментов ДНК специфическими эндонуклеазами
рестрикции.
2.2.6 Оценка воздействия 3 на пролиферацию и дифференцировку клеток
линии ТНР
2.2.7 Гистохимическое выявлен ие активности анафтилацетатэстеразы
2.2.8 Авторадиографическое выявление пула пролиферирующих клеток
2.2.9 Электрофорез белков и иммуноблоттинг.
2.2. Выявление активности ЫАОРНоксидазы
2.2. Статистическая обработка результатов.
ГЛАВА Ш. РЕЗУЛЬТАТЫ
3.1 Компоненты зависимого пути передачи сигнала в клетках
АТЕРОСКЛЕРОТИЧЕСКИХ ПОРАЖЕНИЙ
3.1.1 Иммуногистохимическое выявление белков в клетках не пораженной
атеросклерозом стенки аорты и атеросклеротических поражений различных типов
3.1.2 Выявление мРНК в клетках различных атеросклеротических
поражений
3.1.3 Изучение колокализации белков и ингибиторов клеточного цикла в
стенке нормальной аорты и атеросклеротических поражениях.
3.2 Исследование компонентов зависимого пути передачи
СИГНАЛА И НЕКОТОРЫХ ЭФФЕКТОВ 3 В КУЛЬТИВИРУЕМЫХ МОНОЦИТАХ ЧЕЛОВЕКА ЛИНИИ ТНР1 И ГМК ИНТИМЫ
3.2.1 Выявление белков и мРНК в промоноцитах ТНР1.
3.2.2 Исследование способности 3 индуцировать дифференцировку
клеток ТНР1 и экспрессию в них ингибиторов клеточного цикла
3.2.3 Исследование регуляции экспрессии субъединиц Ноксидазы в
клетках ТНР1.
3.2.4 Выявление белков . ингибиторов циклинзависимых киназ и субъединиц
Ноксидазы в культивируемых ГМК интимы аорты человека.
3.3 Экспрессия и активность МРНоксидазы в клетках
АТЕРОСКЛЕРОТИЧЕСКИХ ПОРАЖЕНИЙ.
3.3.1 Анализ экспрессии субъединиц Ноксидазы в атеросклеротических
поражениях
3.3.2 Гистохимическое исследование активности Ноксидазы в
атеросклеротических поражениях
ГЛАВА IV. ОБСУЖДЕНИЕ РЕЗУЛЬТАТОВ
4.1 РЕГУЛЯЦИЯ ЭКСПРЕССИИ БЕЛКОВ 2, 3 И
4.2 Участие белков 2, 3 и 4 в воздействии 3 на
моноциты Мф
4.3 ЫАБРНоксидаза в атеросклеротических ПОРАЖЕНИЯХ
4.4 Белки 2, 3 и 4 в ГМК атеросклеротических поражений
Заключение.
ВЫВОДЫ.
4 СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ.
СПИСОК СОКРАЩЕНИЙ, ВСТРЕЧАЮЩИХСЯ В ТЕКСТЕ
ДИССЕРТАЦИИ
активин подобные киназы
последовательность, обусловливающей ответ на сигнал активина белки, принимающие участие в морфогенезе костной ткани циклинзависимые киназы диаминобензидин усиленная хемилюминссценция I3 фактор инициации трансляции фактор роста фибробластов
колониестимупирующий фактор роста гранулоцигговмакрофагов I молекула адгезии клеток воспаления I1 интерлейкин
белок, обусловливающий латентность
МСР1 белок хемоатграктант моноцитов
М колониестимулирующий фактор роста макрофагов
Мох1 оксидаза, активируемая митогенами
никотинамидадениндинуклеотид фосфат
кВ ядерный факторкВ
ррюх и x мембранные субъединицы ЫАОРН оксидазы
ррКох и ррНох цитоплазматические субъединицы ЫАОРН оксидазы
РА1 ингибитор активатора плазминогена
РСЫА ядерный антиген пролиферирующих клеток
РЭСР тромбоцитарный фактор роста
РМ8Р фенилметилсульфонил фторида
рЯВ белок ретинобластомы
ii ингибиторы циклинзависимых киназ
белок, заякоривающий белки связывающий элемент додедилсульфат лаурилсульфат натрия 1 белок, взаимодействующий со белками 1 лигаза убиквитина ЕЗ, взаимодействующая со белками белок, ассоциированный с рецепторами, обладающими серинтреонин киназной активностью 3 рецептор к ТАЕ трисацетатЭДТА 3 фактор транскриции ЕЗ трансформирующий фактор роста Р
ингибитор транскрипции, взаимодействующий с последовательностью
фактор некроза опухолейа
I1 белок, взаимодействующий с рецептором к
иРА активатор плазминогена урокиназного типа
V фактор роста эндотелия сосудов
БСА бычий сывороточный альбумин
ГМК гладкомышечные клетки
ЛПНП липопротеиды низкой плотности
Мф макрофаги
ТАК1 киназа, активируемая
Трис трисоксиметиламинометан
ФБ фосфатный буфер
ФБС фетальная бычья сыворотка
ЭДТА этилендиаминтетраацетат
ЭК эндотелиальные клетки
ЭЦМ экстрацеллюлярный матрикс
ВВЕДЕНИЕ


Таким образом, было показано, что активация системы происходит в процессе формирования атеросклеротических поражений, когда в клетках экспрессируются оба рецептора, и они становятся восприимчивыми к сигналу . Было показано также, что рецептор П типа, выделенный как из не пораженной атеросклерозом стенки аорты, так и из атеросклеротических поражений различных типов является полноценным сигнальным рецептором ,i i, . Хотя эти данные и приблизили нас к пониманию значения в развитии атеросклеротических поражений, окончательного ответа получено не было. II типа, который образует комплекс с рецептором I типа, активируя его. Серинтреониновая киназа рецептора к I типа фосфорилирует белки 2 или 3, которые затем в комплексе со 4 перемещаются в ядро клетки, где играют роль факторов транскрипции, изменяя экспрессию генов, промоторы которых содержат специфическую последовательность для связывания этих белков . Поэтому клетки, содержащие белки , способны воспринимать сигнал . Однако распределение белков в атеросклеротических поражениях аорты человека остается не изученным. Одна из гипотез об участии в формировании атеросклеротических поражений предполагает, что является цитокином, способствующим образованию атеросклеротических поражений. Действительно, была показана роль в усилении синтеза протеогликанов ГМК интимы, что может способствовать избыточному накоплению липопротеидов в интиме артерий , v , и, тем самым, возможно, образованию атеросклеротических поражений. Кроме того, может индуцировать экспрессию протеаз матрикса в Мф . Возможно, что такие эффекты могут приводить к деградации межклеточного матрикса и индукции апоптоза в липофиброзных бляшках, а, следовательно, к прогрессированию таких поражений. Последняя препятствует дальнейшему проникновению в интиму артерий ЛПНП, а, следовательно, предотвращает развитие атеросклеротических поражений. Вовторых, этот цитокин может подавлять пролиферацию клеток атеросклеротических поражений, в частности, ГМК, что теоретически может приводить к уменьшению размеров поражений. Известно, что подавление пролиферации, вызванное , связано с усилением экспрессии ингибиторов циклинзависимых киназ, например, i, 2ii и 4, которые инактивируют комплексы циклинзависимых киназ с циклинами, что приводит к остановке клеточного цикла в фазе i . Помимо подавления пролиферации экспрессия i, , и 2i, необходима для прохождения клетками терминальной дифференцировки . Однако до сих пор не были изучены распределение рКф, и 5I4 в клетках стенки аорты человека, а также способность регулировать дифференцировку моноцитов в Мф в атеросклеротических поражениях и связанные с этим функции этих клеток, например, способность продуцировать свободные радикалы кислорода. Повышенная концентрация свободных радикалов кислорода рассматривается как один из патогенетических факторов развития атеросклеротических поражений . Основным ферментом, ответственным за генерацию свободных радикалов кислорода в сосудистой стенке, является ЫАОРНоксидаза ii . Vii . Однако распределение x i xiсубъединиц ЫАГРНоксидазы в клетках артериальной стенки и атеросклеротических поражений, а также регуляция и активность этого фермента остаются мало изученными. В настоящий момент доступными и адекватными моделями для изучения клеток, формирующих атеросклеротические поражения, являются культивируемые ГМК интимы аорты человека и промоноцигы человека линии ТНР1, поэтому мы использовали эти клетки для решения экспериментальных задач i vi, которые дополняли исследования, проведенные i i на срезах стенки аорты человека. Учитывая все вышеизложенное, целью настоящей работы было исследовать участие и белков в формировании атеросклеротических поражений в аорте человека. Выявить белки , передающие сигнал , i i в клетках не пораженной атеросклерозом стенки аорты человека и разных типов атеросклеротических поражений. Изучить распределение ингибиторов циклинзависимых киназ р I4 i и , i i в клетках не пораженной атеросклерозом стенки аорты человека и разных типов атеросклеротических поражений. Выявить субъединицы и оценить активность фермента о кс ид азы i i в клетках не пораженной атеросклерозом стенки аорты человека и разных типов атеросклеротических поражений.

Рекомендуемые диссертации данного раздела

28.06.2016

+ 100 бесплатных диссертаций

Дорогие друзья, в раздел "Бесплатные диссертации" добавлено 100 новых диссертаций. Желаем новых научных ...

15.02.2015

Добавлено 41611 диссертаций РГБ

В каталог сайта http://new-disser.ru добавлено новые диссертации РГБ 2013-2014 года. Желаем новых научных ...


Все новости

Время генерации: 0.184, запросов: 145