Получение, свойства и применение рекомбинантной пероксидазы хрена

Получение, свойства и применение рекомбинантной пероксидазы хрена

Автор: Григоренко, Виталий Георгиевич

Год защиты: 2001

Место защиты: Москва

Количество страниц: 108 с.

Артикул: 2881258

Автор: Григоренко, Виталий Георгиевич

Шифр специальности: 03.00.23

Научная степень: Кандидатская

Стоимость: 250 руб.



Химическое коньюгирование белков и гаптенов, приводят к частичной инактивации фермента и гетерогенности конъюгатов, что в свою очередь, оказывает влияние на специфичность и чувствительность анализа. С развитием генной инженерии появилась возможность создавать рекомбинантные конъюгаты фермента маркера с антителами и белковыми антигенами. Такие конъюгаты обладают рядом преимуществ по сравнению с химически полученными, в частности, они гомогенны по составу, имеют стехиометрию и воспроизводимы. Кроме того, рекомбинантные конъюгаты сохраняют 0 как ферментативную, так и иммунологическую активность. Достижения последних лет в гетсрологи ческой экспрессиии Г1Х в клетках . Целью данного этапа работы было получение рекомбинантного конъюгата пероксидазы хрена с белкомпереносчиком жирных кислот из серпа человека БПЖК i ii i, . БПЖК является новым высокоспецифичным маркером инфаркта миокарда. Получение рекомбинантного конъюгата ПХ с БПЖК позволит создать новые экспресссистемы для диагностики инфаркта миокарда. II. Глава 1. Изучение пероксидаз переживает своеобразный ренессанс в последние годы. Это обусловлено в первую очередь такими фактами как определение новых кристаллических структур и применение методов генной инженерии для выяснения механизмов действия пероксидаз. Большинство пероксидаз классифицируются как металлоферменты, большая часть которых содержит Ее протопорфирин IX гем. Также существует 1руппа пероксидаз, которые используют ванадий или селей и не содержат гсм. Гемсодсржащие псроксидазы подразделяются на два хорошо охарактеризованных суперсемейства, а также группу, включающую хлоропсроксидазы гибридные ферменты с атрибутами цитохрома Р0 и дигем цитохромС пероксидазы. Этот обзор посвящен исключительно суперсемейству растительных пероксидаз, включающему ферменты растений, грибов и бактерий и ярчайшему представителю пероксидазе хрена ПХ 1,2. Пероксидазы животных, также как лактопероксидазы, миелопсроксидазы и простагландин Н еннтетаза, относятся ко второму суперсемейсгву. Многие важные структурнофункциональные различия между этими двумя суперсемейсгвами освящены в обзоре 3. Суперсемейство растительных пероксидаз по классификации предложенной Vi, подразделяется па 3 класса 1. Класс 1 пероксидазы прокариот. Сюда относятся цитохром С пероксидазы дрожжей ССР, аскорбат пероксидазы и каталазыпероксидазы. Эти ферменты не гликозилированы, не имеют сигнального пептида, не содержат ионов катьция и не имеют дисульфидных связей. Класс 2 секрегируемые грибные пероксидазы, такие как лигнин 1ЛР и марганец МпР пероксидазы из РИапегосЬаее сЬгу. Соргтис стегет СлР пероксидаза, также известная как пероксидаза АИР из АмИготусея гатояш. Эти пероксидазы содержат сигнальный пептид для секреции через эпдоплазматичсский ретикулум, два иона кальция, гликозилированы и имеют 4 консервативных дисульфидных связи. Класс 3 классические растительные секреторные пероксидазы, такие как пероксидаза хрена, арахиса и ячменя. Также представители этого класса характеризуются содержанием углеводов от 0 до . Все пероксид азы классов имеют в качестве проксимального лиганда имидазольную группу остатка гистидина и консервативные остатки аргинина и мстидина в дистальной области гема. П iX3 II г Р Н. Псроксидазы также участвуют в других реакциях, имеющих биологическое значение. Так в случае растительных пероксидаз физиологическими субстратами являются растительные гормоны, такие как индолилуксусная кислота и ее производные, и лигнин предшественники. В настоящем обзоре рассматриваются структурные основы, определяющие субстратную специфичность и каталитическую активность, а также новые перспективы практического применения пероксидаз, связанные с достижениями белковой инженерии. В последние годы сильно увеличилось количество рентгенострукгурных данных, относящихся к растительным пероксидазам. Так в настоящий момент определены кристалличекие структуры пероксидаз, относящихся к 2 классу , I, ЛР, МпР 3, , аскорбат пероксидазы гороха, относящейся к 1 классу . Одним из ярких достижений является определение структуры 3х представителей, относящихся к 3му классу растительных пероксидаз ,, пероксидазы арахиса, хрена рис.

Рекомендуемые диссертации данного раздела

28.06.2016

+ 100 бесплатных диссертаций

Дорогие друзья, в раздел "Бесплатные диссертации" добавлено 100 новых диссертаций. Желаем новых научных ...

15.02.2015

Добавлено 41611 диссертаций РГБ

В каталог сайта http://new-disser.ru добавлено новые диссертации РГБ 2013-2014 года. Желаем новых научных ...


Все новости

Время генерации: 0.183, запросов: 145