Разработка технологии получения трансгенных кроликов, продуцирующих с молоком γ-интерферон

Разработка технологии получения трансгенных кроликов, продуцирующих с молоком γ-интерферон

Автор: Гурин, Андрей Владимирович

Шифр специальности: 03.00.23

Научная степень: Кандидатская

Год защиты: 2002

Место защиты: Горки Ленинские, Московской обл.

Количество страниц: 84 с. ил

Артикул: 2292806

Автор: Гурин, Андрей Владимирович

Стоимость: 250 руб.

Разработка технологии получения трансгенных кроликов, продуцирующих с молоком γ-интерферон  Разработка технологии получения трансгенных кроликов, продуцирующих с молоком γ-интерферон 



Трансгенные животные как продуценты желаемого рекомбинантного белка в молочной железе имеют несколько преимуществ по сравнению с традиционно использующимися микробными системами или выделения белка из человеческих тканей i, . Молочная железа высокоудойных животных может продуцировать значительное количество желаемого белка, который можно легко выделить из молока. Кроме того, молоко животных, как правило, не содержит любых токсичных или инфекционных агентов, как, например, вирусы гепатита или прионы. Наконец, существующая техника и инфраструктура молочной промышленности могут использоваться в переработке рекомбинантного белка из молока . Несмотря на быстрый прогресс в области биотехнологии гена, получение трансгенных сельскохозяйственных животных все еще кропотливое и дорогое мероприятие. Основным узким местом является низкоэффективное получение трансгенных животных, что является следствием малого выхода эмбрионов от самок доноров, низкого показателя интеграции гена и непредсказуемость экспрессии белка. Также длительный интервал получения потомков и высокие эксплуатационные издержки делают производство трансгенных животных делом дорогостоящим. Для получения некоторых лекарственных белков, потребность которых невысокая на мировом рынке вследствие малой дозы при лечении каким является интерферон гамма, могут быть использованы кролики. От них можно получить достаточное количество молока для производства интерферона гамма. Ввиду непродолжительного репродуктивного периода у кроликов достаточное количество продукта может быть получено в более короткие сроки, чем от крупных животных овцы, козы, коровы. Целью наших исследований было повышение эффективности получения трансгенных кроликов и создание исходных трансгенньгх животных продуцирующих у интерферон. Разработка наиболее эффективного способа вызывания суперовуляции у кроликов. ХГ. Влияние микроинъекции гена в зиготы на выживаемость плодов кролика в процессе беременности. Получение трансгенных кроликов после пересадки микроинъецированных зигот реципиенту и изучение экспрессии гена у трансгенных кроликов. В ходе исследований выявлены наиболее эффективные типы и дозы препаратов СЖК для вызывания супсровуляции у кроликов. Показано, что 4х кратная гормональная обработка и хирургическое извлечение зигот у одного и того же кролика повышает число овуляций в 5,4 раза по сравнению с одной спонтанной овуляцией и в 3 раза по сравнению с одной гормонально вызванной овуляцией. Продемонстрирована возможность повышения суперовуляции у крольчих после предварительной обработки аналогом простагландина. Определены оптимальные сроки извлечения зигот для микроинъекции гена после обработки ХГ. Показано негативное влияние микроинъекции гена на развитие эмбриона в организме самки. Впервые получены трансгенные кролики, продуцирующие с молоком у интерферон. В качестве практической значимости показано, что наиболее эффективны препаратом СЖК для вызывания суперовуляции у кроликов является Ссргон, а возраст самок не менее 4х месяцев. Применение техники х кратного извлечения зигот по сравнению с убоем более чем в 2 раза повышает выход зигот на одного кролика и почти вдвое сокращает величину затрат на их получение. Наблюдалось повышение эффективности вызывания суперовуляции у кроликов после предварительной обработки аналогом простагландина. Продемонстрирована новая техника получения у интерферона с молоком трансгенных кроликов. Применение очищенных препаратов СЖК для стимуляции суперовуляции у кроликов более эффективно, чем нативного по числу овуляций. Наибольшее число овуляций наблюдалось у кроликов месячного возраста по сравнению с 3месячными, но 5месячные кролики превосходили 4месячных по числу ооцитов с пронуклеусами. Число овуляций у кроликов обработанных СЖК с целью вызывания супсровуляции уменьшается с увеличением кратности гормональных обработок. Обработка кроликов простагландинами сопровождается увеличением числа овуляций при повторном использовании кроликовдоноров. Применение техники повторного хирургического извлечения зигот у кроликов по сравнению с убоем болсс чем вдвое повышает выход зигот на одного кролика.

Рекомендуемые диссертации данного раздела

28.06.2016

+ 100 бесплатных диссертаций

Дорогие друзья, в раздел "Бесплатные диссертации" добавлено 100 новых диссертаций. Желаем новых научных ...

15.02.2015

Добавлено 41611 диссертаций РГБ

В каталог сайта http://new-disser.ru добавлено новые диссертации РГБ 2013-2014 года. Желаем новых научных ...


Все новости

Время генерации: 0.205, запросов: 145