Принципы создания новых форм лекарственных препаратов и биологически активных соединений солюбилизацией липосомами

Принципы создания новых форм лекарственных препаратов и биологически активных соединений солюбилизацией липосомами

Автор: Селищева, Алла Анатольевна

Шифр специальности: 03.00.23

Научная степень: Докторская

Год защиты: 2007

Место защиты: Москва

Количество страниц: 371 с. ил.

Артикул: 3390063

Автор: Селищева, Алла Анатольевна

Стоимость: 250 руб.

1.1.1.Свойства индивидуальных фосфолипидов и их смесей в водной фазе
1.1.2.Структурная организация и липидный состав биомембран
1.1.3.Современные представления о механизмах взаимодействия мембран и белков разных типов мембранные, периферические белки, немембранные водорастворимые белки
1.1.4. Интерфазный катализ
Часть 1.2. Липосомальные формы противотуберкулезных препаратов для лечения туберкулеза легких
1.2.1. Строение и свойства М. i микобактерии и начальные этапы взаимодействия с макрофагами
1.2.2. Схема терапии туберкулеза легких и описание свойств препаратов производных рифамицина рифампицина и рифабутина
1.2.3. Липосомы с противотуберкулезными препаратами для лечения заболеваний легких
РЕЗУЛЬТАТЫ И ОБСУЖДЕНИЕ
ГЛАВА 2. Свойства модельных и биологических мембран, модифицированных ФоссЬолипазами разных типов
Часть 2.1. Оптимизация условий гидролиза фосфолипидов в составе агрегатов
различного строения фосфолипазами С2.
2.1.1. Гидролиз ФХ в присутствии дезоксихолата под действием фосфолилазы С .
2.1.2. Гидролиз ФЭ фосфолипазой С в присутствии дезоксихолата и в составе липосом из смеси ФХФЭ
Часть 2.2. Свойства и структурная организация фосфолипидных мембран, обработанных фосфолипазами разных типов .
2.2.1. Слияние липосом при образовании в модельных мембранах продуктов гидролиза фосфолипидов под действием фосфолипаз А2, С и Д.
2.2.2, Проницаемость мембран липосом для ионов кальция, инициируемая продуктами гидролиза фосфолипидов под действием фосфолипаз
Часть 2.3. Проницаемость для ионов кальция биологических мембран мембран синаптосом, индуцированная обработкой фосфолипазами разных типов
2.3.1. Накопление Са2 в синаптосомах при их инкубации с фосфолипазами С разной специфичности.
2.3.2. Действие фосфолипазы О на транспорт ионов
кальция в синалтосомы
2.3.3. Влияние фосфолипазы А2 на Сатранспорт в синалтосомы. 7 ГЛАВА 3. Влияние ДАГсодержащих липосом на фагоциты и ткань
легкого экспериментальных животных.
Часть 3.1. Индукция кислородного взрыва в моноцитах крови человека липосомами различного липидного состава
Часть 3.2. Влияние липосом на развитие кислородного взрыва в
альвеолярных макрофагах человека
Часть 3.3. Действие ДАГсодержащих липосом на операционную рану легкого морской свинки.
ГЛАВА 4. Белоклипидные комплексы Фосфолипидов сои ссериновыми протеазами, их белковыми ингибиторами и бактериоцинами
Часть 4.1. Выбор липидных модельных систем.
4.1.1. Постановка задачи
4.1.2.Определение состава липидных экстрактов сои
4.1.3. Получение индивидуалоных фосфолипидов и их смесей
Часть 4.2. Белоклипидные комплексы
4.2.1. Оптимизация условий их получения и анализ состава
4.2.2. Характеристики полученных комлексов
4.2.3. Структурная организация фосфолипидов в белоклипидных комплексах
4.2.4. Взаимодействие немембранных водорастворимых белков с фосфолипидами цвиттерионами
4.2.5. Активность белков в составе белоклипидных комплексов 7 Часть 4.3.Комплексы фосфолипидов с бактериоцинами и их антимикробная активность .
ГЛАВА 5. Взаимодействие антибиотиков рифамицинового ряда с модельными мембранами получение липосомальных форм рифампицина и рифабутина. Часть 5.1. Физикохимические характеристики рифампицина и рифабутина в зависимости от среды растворимость, рКа
5.1.1 .Растворимость антибиотиков в зависимости от среды
5.1.2. Определение рКа антибиотиков
Часть 5.2. Связывание антибиотиков рифамицинового ряда с модельными
мембранами
5.2.1 Методы получения липосомальной формы
рифампицина и рифабутина
5.2.2.Оптимизация условий включения ПТП в липосомы
5.2.3Влияние ионной силы на включение антибиотиков в липосомы
5.2.4. Влияние природы буфера с различной ионной силой на включение антибиотиков в липосомы при рН6,0
5.2.5. Влияние среды на включение антибиотиков в липосомы изФХ
Часть 5.3. Исследование механизма взаимодействия антибиотиков с модельными мембранами с помощью коэффициента распределения октанолвода и липосомывода
5.3.1.Определение коэффициента распределения антибиотиков методом разделения фаз.
5.3.2 Определение Кс1 антибиотиков в системе
5.3.2 Определение антибиотиков в системе
липосомы вода методом флуоресценции.
5.3.3Коэффициент распределения антибиотиков в системе октанол вода.
Часть . Стабильность рифампицина в водной фазе и в составе липосом. Антимикробная активность препаратов
5.4.1. Получение стандартов индивидуальных продуктов деструкции и окисления рифампицина
5.4.2. Анализ продуктов деструкции и окисления водного и липосомального препаратов РФ при хранении при С
5.4.3. Продукты деструкции рифампицина в составе липосомальной формы при хранении при 4С.
5.4.4. Лиофилизированный липосомальный препарат
5.4.5. Бактериостатическая активность липосомальной формы рифампицина при различных сроках хранения
ГЛАВА 6. Эффективность действия пустых липосом и липосомальных Форм противотуберкулезных препаратов в отношении микобактерий
Часть 6.1. Взаимодействие пустых липосом с М. i и М. vi в среде инкубации и инфицированных макрофагах мышей
Часть 6.2. Взаимодействие пустых липосом с М. i
Часть 6.3. Эффективность действия рифампицина в растворе и в составе липосом в отношении М. i v и М. i
Часть 6.4. Исследование эффективности действия рифампицина в растворе и в составе липосом на модели экспериментального туберкулеза у
ГЛАВА 7. Материалы и методы исследований
Часть 7.1. Используемые в работе реактивы
Часть 7.2. Методы исследования
ЗАКЛЮЧЕНИЕ
ВЫВОДЫ
ГЛАВА 8. Список литературы
СПИСОК СОКРАЩЕНИЙ
АМ альвеолярные макрофаги
АТФ аденозинтрифосфат
АФК активные формы кислорода
цАМФ циклический аденозинмонофосфат
ДАГ 1,2пдиацилглицерин
ИН изониазид
ИФз инозитолтрифосфат
ИФу интерферон
ИЛ1 интерлейкин
КЛ кардиолипин
лФХлизофосфатидилхолин
ЛФИлипосомальная форма изониазида
МЛВ мультиламеллярные везикулы
ОВ однослойные везикулы
БОВ большие однослойные везикулы
МОВ малые однослойные везикулы
ИСТ нитросиний тетразолий
ПТП противотуберкулезные препараты
ПАСК парааминосалициловая кислота
ПФИ лолифосфатидилинозиды
ПЯЛ полиморфоядерные лейкоциты
СМФ система мононуклеарных фагоцитов
ТДМ трегалозадимиколат
ФХ фосфатидилхолин
ФЗ фосфатидилэтаноламин
ФИ фосфатидилинозит
ФИцикл фосфатидилинозитный цикл
ФИЗФ фосфатидилинозит3монофосфат
ФИ4Ф фосфатидилинозит4 монофосфат
ФИ4,5Фг фосфатидилинозит4,5 дифосфат
ФИМН фосфатидилшоинозитолманнозид
ФИМг фосфатидилинозит диманнозид
ФС фосфатидилсерин
ФГ фосфатидилглицерин
ФК фосфатидная кислота
ФНОа фактор нейроза обухолей
ЭФРэпидермальный фактор роста
ВВЕДЕНИЕ


Взаимодействие агонистов с рецепторами клеточной мембраны сопровождается активацией специфичной к ФИ и ПФИ фосфолипазы С фосфодиэстеразы, расположенной на поверхности мембраны со стороны цитозоля. Основным субстратом для этого фермента является ФИ4,5Ф2, в результате гидролиза которого образуются два продукта ДАГ, который остается в мембране и вступает в дальнейшие превращения и водорастворимый продукт инозиттрифосфат ИФ3, который способен вызывать выход ионов кальция из внутриклеточных депо. В дальнейшем ИФ3 гидролизуется до ИФ2, затем до ИФ и на конечной стадии происходит превращение ИФ в свободный миоинозит, который вступает в цикл ФИ на стадии образования ФИ путем замещения цитидиндифосфата в молекуле ЦДФДГ . Интересно отметить, что третья стадия гидролиза ИФ до миоинозита ингибируется литием агентом, который широко применяется при терапии психических заболеваний . На самом деле цикл имеет еще более сложную структуру, т. ПФИ могут гидролизоваться не только под действием фосфолипазы С, но под действием фосфомоноэстеразы , превращаясь в конечном итоге в ФИ согласно уравнению ФИФИ4ФФИ4,5Ф2. Для ФИ по сравнению с другими фосфолипидами характерен строго определенный жирнокислотный состав приблизительно в молекул ФИ, содержащихся в клеточной мембране, во втором положении находится остаток арахидоновой кислоты, а в первом положенииостаток стеариновой кислоты , . Под действием агонистов цикл превращения ФИ и ПФИ активируется, и если в этих условиях клетки преинкубируются в присутствии РАТФ, то происходит обогащение Р молекул ФИ, ФИ4Ф, ФИ4,5Ф2 и ФК, благодаря чему оказывается возможным регистрировать метаболизм ФИ. Изучение механизма сопряжения между активацией метаболизма ФИ и ПФИ, расположенных на внутреннем слое биомембран, и воздействием информационного сигнала с внешней стороны клетки, начатое в е годы, продолжается до настоящего времени. Анализ полученных результатов выходит за рамки данного обзора, в котором ниже будет обсуждены свойства двух компонентов ФК и ДАГ, образующихся при активации метаболизма ФИ в плазматической мембране. Было установлено, что существует сопряжение между превращением ФИ, индуцированным связыванием агониста с внешней стороны мембраны, и транспортом ионов кальция внутрь клетки. В связи с этим было высказано предположение, что ФК, образующаяся в ходе превращения ФИ как один из промежуточных продуктов, является ионофором кальция . Это предположение основывалось только на результатах исследований свойств ФК в модельных системах. Например, показано, что из всех исследуемых фосфолипидов только КЛ и ФК могли транспортировать ионы кальция через гидрофобную область для системы, состоящей из двух водных слоев, разделенных слоем хлороформа . Согласно расчетам, проведенным авторами, 1 одна молекула ФК может переносить 1 ион кальция при рН8,3 . Добавление 1 моль ФК в липосомы, содержащие ФХ, холестерин и дицетилфосфат 2, индуцировало проницаемость для ионов кальция с эффективностью, близкой к эффективности известного ионофора кальция А 7, причем ФК оказалась селективным ионофором, так как ионы магния транспортируются значительно менее эффективно. При другом фосфолипидном составе ФХ и ФС присутствие 5ной диолеилфосфатидной кислоты в мембране не влияло на проницаемость мембран для ионов кальция, но когда содержание ФК возрастало до , проницаемость мембран увеличивалась в десять раз . Систематическое изучение ионофорных свойств ФК в липосомах различного фосфолипидного состава позволило сделать заключение о том, что в низких концентрациях ФК способна ускорять перенос кальция через мембрану только в тех смесях фосфолипидов, в которых можно индуцировать структурные перестройки типа образования фазы Ни. Следует еще раз подчеркнуть, что только ФК, содержащая остатки ненасыщенных жирных кислот, способна модифицировать бислой, образуя гексагональную фазу при 3,7, а в присутствии двухвалентных катионовпри 6,0 . При активации гидролиза ФИ под действием агониста в мембране происходит кратковременное увеличение количества ФК, которая по своему жирнокислотному составу близка к ФИ, т. Иными словами, образуется ФК такого жирнокислотного состава, который обеспечивает способность модифицировать бислой.

Рекомендуемые диссертации данного раздела

28.06.2016

+ 100 бесплатных диссертаций

Дорогие друзья, в раздел "Бесплатные диссертации" добавлено 100 новых диссертаций. Желаем новых научных ...

15.02.2015

Добавлено 41611 диссертаций РГБ

В каталог сайта http://new-disser.ru добавлено новые диссертации РГБ 2013-2014 года. Желаем новых научных ...


Все новости

Время генерации: 0.199, запросов: 145