Современные биотехнологические процессы и иммунологические методы при промышленном производстве ветеринарных препаратов

Современные биотехнологические процессы и иммунологические методы при промышленном производстве ветеринарных препаратов

Автор: Гринь, Светлана Анатольевна

Год защиты: 2008

Место защиты: Кашинцево

Количество страниц: 310 с. ил.

Артикул: 4055903

Автор: Гринь, Светлана Анатольевна

Шифр специальности: 03.00.23

Научная степень: Докторская

Стоимость: 250 руб.

Содержание
1 .Введение
2.Обзор литературы
2.1.Оборудование для культивирования микроорганизмов, культур клеток и вирусов
2.2.Питательные среды и ингредиенты, используемые при культивировании клеток животных и вирусов
2.3.Штаммы и их характеристика
2.4.Культивирование фиксированных штаммов вируса бешенства
2.5.Методы и процессы культивирования микроорганизмов,
культур клеток и вирусов
2.6.Выделение, очистка и концентрирование вирусного материала
2.7.Мстоды диагностики бактерийных и вирусных препаратов
2.7.1 .Традиционные методы
2.7.2.ИФАметоды
2.7.3.ПЦРметоды
2.8.Антигенные свойства вирусов
2.9.Инактивация вируса
2Механизмы выработки иммунитета
2. .Технология производства гипериммунных сывороток
2Трансгенные животные
2Биологические свойства адъювантов и их компонентов
бсуждение литературного обзора
3.Собственные исследования
3.1 .Материалы и методы
3.1.1 .Культуры клеток и эмбрионы птиц
3.1.2.Животные
3.1.3.Штаммы
3.1.4.Оборудование
3.1.5. Методы
3.1.5.1 .Культивирование микроорганизмов в биореакторах
3.1.5.2.Культивирование клеток и вирусов в биореакторах
3.1.5.3.Репродукция вируса бешенства
3.1.5.4.Репродукция вируса инфекционного ринотрахеита
3.1.5.5.Концентрирование вируса 6 3.1.5.6.0чистка вируса бешенства и инфекционного ринотрахеита
крупного рогатого скота от клеточных белков
3.1.5.7.0пределение титра инфекционности вируса бешенства и инфекционного ринотрахеита крупного рогатого скота
3.1.5.8.Белок
3.1.5.9.Комплементсвязывающая активность вируса бешенства
и инфекционного ринотрахеита крупного рогатого скота
3.1.5Преципитирующая активность вируса бешенства и
инфекционного ринотрахеита крупного рогатого скота
3.1.5. .Гемагглютинирующая активность вируса бешенства и
инфекционного ринотрахеита крупного рогатого скота
3.1.чистка 1 в
3.1.5. .Оценка чистоты препарата иммуноглобулина в
3.1.днородность и специфичность препаратов иммуноглобулинов
3.1.5Оценка реактогенности масел на мышах
3.1.5Оценка токсичности масел на мышах
3.1.5Получение гииериммунной сыворотки против
гемофилеза, стрептококкоза и пастереллеза свиней
3.2. Результаты исследований
3.2.1. Культивирование культур клеток и вирусов в биорсакторах
в суспензии и на микроносителях
3.2.2. Основные факторы, влияющие на гибель клеток при
глубинном культивировании в биореакторах
3.2.3. Влияние механического перемешивания и аэрации на гибель
клеток в биореакторе
3.2.4. Способ оценки токсичности масляных адъювантов и их компонентов, используемых при разработке и производстве биопрепаратов с помощью культуры клеток свиной почки
в пробирке с монослоем
3.2.4.1. Клеточная культура
3.2.4.1.1. Подготовительные операции
3.2.4.2. Культивирование первичных клеток СП
3.2.4.2.1. Приготовление питательных сред
3.2.4.2.1.1. Основной раствор
3.2.4.2.1.2. Разведенные растворы
3.2.4.2.2. Приготовление масляных адъювантов
3.2.4.3. Приготовление первичных клеток СП
3.2.5. Суспензионное культивирование клеток сперматогоний свиньи
3.2.5.1. Теоретическое обоснование
3.2.5.2. Периоды сперматогенеза
3.2.5.3. Регуляция сперматогенеза
3.2.5.4. Суспензионное культивирование
3.2.5.4.1. Первый период суспензионного культивирования клеток семенника поросенка
3.2.5.4.2. Второй период суспензионного культивирования сперматогоний
3.2.5.4.3. Третий период суспензионного культивирования сперматоцитов
3.2.5.4.4. Четвертый период суспензионного культивирования сперматидов
3.2.5.4.5. Основные выводы
3.2.5.4.6. Оптимизация культивирования клеток ткани семенника поросенка
по основным физикохимическим и биофизическим параметрам
3.2.6. Накопление вируса бешенства, ИРТ, ПГ3 при
глубинном культивировании в биореакторах
3.2.7. Культивирование пастерелл, гемофил и стрептококков в биореакторах
3.2.7.1. Анализ традиционного процесса культивирования пастерелл
3.2.7.2. Разработка управляемого процесса периодического
культивирования пастерелл
3.2.7.2.1. Оптимизация процесса культивирования пастерелл на начальной стадии роста на фазе приспособления и начале фазы логарифмического роста
3.2.7.2.2. Влияние окислительновосстановительного потенциала культуральной жидкости на рост i
3.2.7.3. Испытание управляемого процесса культивирования пастерелл в лабораторных и промышленных условиях
3.2.7.3.1. Испытание управляемого процесса культивирования в лабораторных биореакторах
3.2.7.3.2. Испытание управляемого процесса культивирования в промышленных биореакторах
3.2.8. Современные оборудование и методы очистки, концентрирования и инактивации биоматериала антигенов, вирусов и микроорганизмов
3.2.8.1. Очистка и концентрирование вируса ИРТ КРС
3.2.8.2. Биологические свойства вируса инфекционного ринотрахеита крупного рогатого скота
3.2.8.3. Биологические свойства культурального вируса бешенства
3.2.8.4. Очистка и концентрирование вируса бешенства
3.2.8.5. Инактивация вируса бешенства
3.2.8.6. Получение конъюгата антиI КРС с пероксидазой из хрена
3.2.8.6.1. Выделение иммуноглобулина класса из сыворотки крови крупного рогатого скота
3.2.8.6.2. Очистка иммуноглобулина вируса бешенства
3.2.9. Разработка метода определения токсичности масляных адъювантов и их компонентов
3.2.9.1. Изучение токсичности масляного адъюванта и его компонентов на культуре клеток СП в пробирках с монослоем
3.2.9.2. Сравнительное изучение показателей токсичности масляных адъювантов и их компонентов, используемых в производстве биопрепаратов, на белых мышах и культуре клеток СП в пробирках
с монослоем
3.2 Получение специфических гипериммунных сывороток для изготовления диагностикумов
3 Получение лечебной ассоциированной гипериммунной сыворотки против пастереллеза, гемофилеза и стрептококкоза
свиней с использованием различных видов животных
3 Способ получения гипериммунной сыворотки против гемофилеза, стрептококкоза и пастереллеза свиней
3.2 Изготовление диагностических наборов в промышленных условиях
4. ОБСУЖДЕНИЕ
5. ВЫВОДЫ
6. ПРАКТИЧЕСКИЕ ПРЕДЛОЖЕНИЯ
7. СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ
8. ПРИЛОЖЕНИЕ
СПИСОК СОКРАЩЕНИЙ
ПС почка свиньи
ЦПД цитопатическое действие
ВНА вируснейтрализующая активность
ПХ пероксидаза из хрена
ПТ почка теленка
ПП почка поросенка
ПК почка коровы
МЕ международная единица
МН микроноситель
ДЕАЕ диэтиламиноэтил
ДМЕМ модифицированная Дульбеко полная среда Игла
ПЭГ полиэтиленгликоль
ИРТ инфекционный ринотрахеит
ККМ критическая концентрация мицеллообразования
МЖВ модифицированный живой вирус
ВТГ вирус простого герпеса
РИФ реакция иммунофлюоресценции
РДП реакция диффузионной преципитации
РСК реакция связывания комплемента
КС комплемент связывающий
ИФА иммуноферментный анализ
ДХН дезоксихолат натрия
ПЦР полимеразная цепная реакция
КСА комплемепнт связывающая активность
ПА преципитирующая активность
ГА гемагглютинирующая активность
ИВ инфекционный пустуллезный вульвовагинит
ММ молекулярная масса
ГЦ соотношение гуанина к цитозину
КАЛ комплементантительный лизис
АЗКЦ реакция антитело зависимого клеточного цитолиза
ПМН полиморфноядерные нейтрофилы
РНК рибонуклеиновая кислота
ДНК дезоксинуклеиновая кислота
АЗКЦК реакция антитело зависимого клеточного цитолиза, усиленного комплементом Д Дальтон
НД нормативная документация
1. ВВЕДЕНИЕ
Актуальность


Штамм V vi представляет собой международный референсштамм, используемый при оценке иммуногенности антирабических вакцин. По происхождению он является производным Пастеровского фиксированного вируса бешенства. Штамм V адаптирован к ткани головного мозга мышей, а также к клеткам линии ВНК. Штамм V адаптирован к клеткам ВНК 3. Флюри. Первоначально изолят вируса вызывал у кошек, собак, морских свинок, белых крыс и мышей заболевание, которое по клиническим признакам напоминало заболевание, обусловленное фиксированным вирусом. Кролики оказались сравнительно маловосприимчивыми. Другой характерной особенностью вируса являлась неспособность вызывать образование телец БабешаНегри. Штамм аттенуирован в результате 0 пассажей в мозге однодневных цыплят и пассажей в развивающихся куриных эмбрионах . В результате он стал апатогенным для собак и кроликов при подкожном введении, слабо патогенным для мышей, морских свинок и сирийских хомячков при подкожном и внутримышечном введении. Штамм высокопатогенен для всех лабораторных животных при внутримозговом введении. Штамм v выделен из мозга бешеной собаки. После 4 пассажей в мозге мыши прошел более 0 пассажей в развивающихся куриных эмбрионах. На уровне го пассажа штамм почти полностью утратил патогенность для взрослых кроликов, мышей, хомяков и собак при внутримозговом и внутримышечном введении, сохранив патогенность для мышей дневного возраста. Штамм i первоначально был выделен в США от больной бешенством собаки. Вирус был фиксирован в результате 0 внутримозговых пассажей на мышах и чередующихся пассажей в мозге мыши и культуре клеток ПСХ. В последующем он стал исходным для фиксированных штаммов , , Внуково и др. Штаммы 1 и 2 делеционные мутанты штамма , полученные путем использования селекционированных моноклональных антител. Вирус авирулентен для взрослых мышей и других диких грызунов при внутримозговом, внутримышечном или пероральном путях введения, однако он сохранил патогенность для мышейсосунов при внутримозговом или пероральном способах введения 3. Л.Ф. Никитин и М. А. Селимов, проведя чередующихся пассажей штамма ЭАО в культуре первичных клеток ПСХ и мозге мыши при обычной С и серийных пассажа в ПСХ при пониженной С температуре, получили другой аттенуированный вариант вируса Внуково 6. Вирус бешенства, штамм У9 выделен из слюнной железы вампира в Мексике, после чего фиксирован в мозге мышейсосунов и адаптирован к культуре клеток фибробластов эмбриона летучей мыши 1. Во ВНИИВВиМ Г. А. Сафоновым и др. В НК и получил название ТС. По сообщениям авторов, особенностью штамма ТС является его способность размножаться вмышечной ткани животных. Авторами также было показано, что на уровне пассажа в клетках ВНК вирус размножается без признаков ЦПД, накапливается с инфекционной активностью 6,,0 МЛД5см3, является авирулентным для овец при внутримозговом введении, а также для телят, собак и кошек при внутримышечной инокуляции. Внутримышечное введение культуральной вируссодержащей жидкости вызывает образование у животных антирабических ВНА 5. В г. ТС на уровне пассажа был адаптирован В. А. Балабановым, Т. В. Сологуб, И. В. Никишиным и др. ПС . В г. ТС на уровне го пассажа в этой же клеточной системе был взят за основу при конструировании инактивированной вакцины против бешенства животных . Как следует из изложенного, все фиксированные штаммы вируса бешенства в результате аттенуации частично или полностью утрачивают патогенность для животных при периферическом введении, успешно размножаются в клеточных культурах или куриных эмбрионах после предварительной адаптации. Щелково и др. Штаммы , v, , Внуково. В ветеринарной практике широкое распространение получили живые и инактивированные цельновирионные вакцины на основе штаммов вируса бешенства i, , v, i, V, и , , , Внуково, Щелково . Одним из основных и эффективных способов предотвращения бешенства является иммунопрофилактика, основанная на применении антирабических вакцин. Созданная Л. Пастером мозговая вакцина в свое время сыграла большую роль в борьбе с бешенством.

Рекомендуемые диссертации данного раздела

28.06.2016

+ 100 бесплатных диссертаций

Дорогие друзья, в раздел "Бесплатные диссертации" добавлено 100 новых диссертаций. Желаем новых научных ...

15.02.2015

Добавлено 41611 диссертаций РГБ

В каталог сайта http://new-disser.ru добавлено новые диссертации РГБ 2013-2014 года. Желаем новых научных ...


Все новости

Время генерации: 0.208, запросов: 145