Система обеспечения безопасности продукции животноводства при использовании анаболических стероидов, производных стильбена и β-адреностимуляторов

Система обеспечения безопасности продукции животноводства при использовании анаболических стероидов, производных стильбена и β-адреностимуляторов

Автор: Комаров, Александр Анатольевич

Шифр специальности: 03.00.23

Научная степень: Докторская

Год защиты: 2006

Место защиты: Москва

Количество страниц: 452 с. ил.

Артикул: 3306937

Автор: Комаров, Александр Анатольевич

Стоимость: 250 руб.

Система обеспечения безопасности продукции животноводства при использовании анаболических стероидов, производных стильбена и β-адреностимуляторов  Система обеспечения безопасности продукции животноводства при использовании анаболических стероидов, производных стильбена и β-адреностимуляторов 

ОГЛАВЛЕНИЕ
СПИСОК СОКРАЩЕНИЙ
ВВЕДЕНИЕ
1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ
1.1. Международноправовые аспекты применения анаболических
агентов в животноводстве
1.2. Стероидные гормоны и производные стильбена общая характеристика, метаболизм, фармакокинентика и токсикологическая оценка
1.3. Общая характеристика, метаболизм и фармакокинетика адреностимуляторов
1.4. Методы определения анаболических агентов
1.5. Заключение
2. СОБСТВЕННЫЕ ИССЛЕДОВАНИЯ
2.1. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ
2.2. РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЙ
2.2.1. Получение иммуногенов для определения анаболических
агентов иммунохимическими методами
2.2.1.1. Синтез гаптенов анаболиков с функциональными карбоксильными группами
2.2.1.1.1. Синтез карбоксипроизводного ДЭС диэтилстильбэстролокарбоксиметила
2.2.1.1.2. Синтез карбоксиироизводных ЭТЭ аэтинилэстрадиол3гемисукцината и 3окарбоксиметилэтинилэстрадиола
2.2.1.1.3. Синтез карбоксипроизводных ТБ тренболонгемисукцината
и ртренболон3окарбоксиметилоксима
2.2.1.1.4. Синтез карбоксипроизводных НТ нортестостеронгемисукцината и рнортестостерон3окарбоксиметилоксима
2.2.1.1.5. Синтез карбоксипроизводного метилтестостеронЗокарбоксиметилоксима
2.2.1.2. Коньюгирование карбоксипроизводных ДЭС и синтетических анаболических стероидов с белкаминостителями
2.2.1.3. Коньюгирование кленбутерола с белкаминосителями
2.2.2. Оптимизация условий экспрессного определения анаболических агентов иммунохимическими методами
2.2.2.1. Скрининг активности и специфичности иммунных сывороток
2.2.2.2.Выбор твердофазного антигена и оптимизация условий его иммобилизации на носителе
2.2.2.3. Проверка чувствительности и специфичности ИФА тестсистем
2.2.2.4. Разработка способов подготовки проб биосубстратов для экспрессного определения анаболиков методом ИФА
2.2.2А 1. Определение анаболиков в моче животных методом ИФА
2.2.2.4.1.1. Оптимизация условий гидролиза коньюгированных форм анаболических стероидов и производных стильбена в моче животных
2.2.2.4.1.2. Экстракция свободных форм стероидов и производных стильбена из мочи животных методом ИФА
2.2.2.4.1.3. Определение кленбутерола в моче животных методом ИФА
2.2.2.4.2. Определение анаболических стероидов и производных
стильбена в мышечной ткани животных методом ИФА
2.2.2.4.3. Определение анаболических стероидов и производных
стильбена в печени животных методом ИФА
2.2.2 4. Определение ДЭС в кормах методом ИФА
2.2.2.4.5. Определение кленбутерола в мышечной ткани и печени животных методом ИФА
2.2.2А6. Определение кленбутерола в шерсти животных методом ИФА
2.2.2А.1. Определение кленбутерола в сетчатой оболочке глаза животных методом ИФА
2.2.2.4.8. Определение кленбутерола в кормах методом ИФА
2.2.3. Разработка подтверждающих арбитражных методик определения анаболических агентов в биосубстратах с помощью ГХМС
2.2.3.1. Извлечение и очистка стероидов, производных стильбена из биосубстратов для определения методом ГХМС
2.2.3.1.1. Оптимизация условий экстракции стероидов и производных стильбена из мышечной ткани животных для определения методом ГХМС
2.2.3.1.2. Экстракция стероидов и производных стильбена из печени
и почек животных для определения методом ГХМС
2.2.3.1.3. Экстракция стероидов и производных стильбена из биоологических жидкостей животных, жировой ткани и кормов для определения методом ГХМС
2.2.3.1.4. Очистка экстрактов анаболических стероидов и производных стильбена методами ТФЭ и ВЭЖХ
2.2.3.2.Разработка способов извлечения и очистки 3адреностимуляторов
из биосубстратов для определения методом ГХМС
2.2.3.2.1. Экстракция Радреностимуляторов из мышечной ткани,
печени и почек животных для определения методом ГХМС
2.2.3.2.2. Извлечение радреностимуляторов из мочи животных
для определения методом ГХМС
2.2.3.2.3. Извлечение радреностимуляторов из сетчатки глаза
животных для определения методом ГХМС
2.2.3.2.4. Извлечение радреностимуляторов из шерсти животных и
кормов для определения методом ГХМС
2.2.3.2.5. Оптимизация условий очистки экстрактов
радреностимуляторов методом ТФЭ
2.2.3.3. Оптимизация способов дериватизации анаболических
стероидов и производных стильбена для определения методом ГХМС
2.2.3.4. Оптимизация условий хроматографического разделения анаболических стероидов и производных стильбена
2.2.3.5. Оптимизация способов дериватизации 3адреностимуляторов
для определения методом ГХМС
2.2.3.6. Оптимизация условий хроматографического разделения 3адреностимуляторов
2.2.4. Метрологическая аттестация арбитражных массспектрометрических методик определения анаболических агентов в биосубстратах
2.2.4.1. Алгоритм оценивания неопределенности измерения
2.2.4.2. Расчетноэкспериментальное оценивание неопределенности измерения
2.2.4.3. Контроль правильности результатов измерения содержания анаболиков в биосубстратах с использованием международных аттестованных стандартных образцов
2.2.4.3.1. Определение атренболона в аттестованном стандартном
образце 5 лиофилизированной печени теленка
2.2.4.3.2. Определение ДЭС в аттестованном стандартном образце
9 лиофилизированной моче теленка
2.2.4.3.3. Определение кленбутерола в аттестованном стандартном
образце 9 лиофилизированной печени теленка
2.2.4.3.4. Определение кленбутерола и сальбутамола в аттестованном стандартном образце 4 лиофилизированной моче теленка
3. ОБСУЖДЕНИЕ РЕЗУЛЬТАТОВ
4. ВЫВОДЫ
5. ПРАКТИЧЕСКИЕ ПРЕДЛОЖЕНИЯ
6. СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ
7. ПРИЛОЖЕНИЯ
СПИСОК СОКРАЩЕНИЙ
АТ антитела
БСА бычий сывороточный альбумин
БСТФА 1чт,Нбистриметилсилилтрифторацетамид
ВЭЖХ высокоэффективная жидкостная хроматография
ГМ гемисукцинат
ГФМ гептафтормасляный
ГХМС хроматомассспектрометрия
ГЭ гексэстрол
ДГТ 5адигидротестостерон
ДСО дейтерированный стандартный образец
ДТЭ дитиоэритритол
ДЭ диенэстрол
ДЭС диэтилстильбэстрол
i астрой
Е2 эстрадиолр
Ез эстриол
Ж желатина
ИК инфракрасный
ИФА иммуноферментный анализ
КБ кленбутерол
КДМ карбодиимидный метод
КМО карбоксиметил оксим
МБ метилборатный
МБК метилборная кислота
МВИ методика выполнения измерений
МО метилоксим
МП мапентерол
МСМС тандемная массспектрометрия
метод смешанных ангидридов
МСТФА ЫметилЫтриметилсилилтрифторацстамид МТх метилтестостерон
НКТ ИФА непрямой конкурентный твердофазный ИФА
НТ р нортестостерон
ОКО отрицательный контрольный образец
П прогестерон
ПМР протонный магнитный резонанс
ПАФ полный адъювант Фрейнда
ПФП пентафторпропионовый
РИА радиоимунный анализ
РКа показатель константы ионизации
СБ сальбутамол
СО стандартный образец
Т тестостерон
ТБ ртренболон
ТБЛ тербуталин
ТБМЭ третбутилметиловый эфир
ТМБ триметилбороксин
ТМИС триметилйодсилан
ТМС триметилсилильный
ТМХС триметилхлорсилан
ТСХ тонкослойная хроматография
ТФЭ твердофазная экстракция
ТФА твердофазный антиген
УФ ультрафиолетовый
ФТ фенотерол
ХИ химическая ионизация
ЦБ цимбутерол
ЭТЭ аэтинилэстрадиол
ЭУ электронный удар
ВВЕДЕНИЕ
Актуальность


Свободный радикал ДЭС4,4полухинона может вступать в реакцию с молекулярным кислородом с образованием ДЭС4,4хинона и перекисных радикалов 9. Описано несколько типов повреждения ДНК под воздействием свободных радикалов эстрогенов. Механизм генотоксического действия катехоловых метаболитов ДЭС аналогичен ранее описанному для метаболитов Ез. На различных экспериментальных моделях получены данные о ДЭСиндуцированных генных мутациях. Так, ДЭС вызывал мутации в локусе 7КАТФазы и инактивировал трансген клеточной линии 2 Китайского хомячка. РОССИЙСКАЯ ГОСУЛАРСТЗЕПНАЯ и. ДЭС делецией и метилированием 6тиогуанинрезистентных клонов 1, 5, 6,4. Рисунок 9. Метаболизм ДЭС. В другом исследовании наблюдали 2,,6кратную амплификацию стус гена опухоли почек, вызванной обработкой сирийских хомячков ДЭС 0. ДЭСиндуцированная геномная неустойчивость является ключевым элементом в канцерогенезе, вызванном этим веществом. Дополнительным подтверждением этому может служить то, что в 0 опухолей полового тракта у дочерей женщин, подвергавшихся лечению трансплацентарным канцерогеном ДЭС, обнаружена микросателлитная нестабильность . Для другого синтетического эстрогена этинилэстрадиола ЭТЭ отмечена более слабая канцерогенность, по сравнению с Е2 и ДЭС, что объясняется более низким формированием катехоловых метаболитов , 4, 8. ЭТЭ, по сравнению с Е2 и ДЭС, связана с тем, что при этом образуется в 3 раза меньше катехоловых метаболитов 0. Апдростаповые стероидные гормоны мужские половые гормоны, производные С9стероида андростана. Главный андрогенный природный гормон тестостерон Т роксиандрост4ен3он или а4андростенрол3он, отвественный за развитие и проявление вторичных мужских половых признаков и обеспечивающий сперматогенез. Основное место образования и секреции тестостерона интерстициальные клетки Лейдига, расположенные в семенниках между семенными канальцами. Значительно меньшие количества этого гормона могут синтезироваться в яичниках, плаценте и коре надпочечников . Андрогенная активность тестостерона определяется наличием углеродных атомов в стерановом кольце, 3кетогруппой в А кольце и, прежде всего, гидроксилом в рположении аформа биологически неактивна. Андрогены обладают сильным анаболическим эффектом, который включает усиление синтеза белка в мышечной и костной ткани 1, 7. В некоторых органах, например, в простате, фермент 5осредуктаза способен превращать тестостерон в 5адигидротестостерон ДГТ, являющийся более сильнодействующим андрогеном рис. Вместе с тем 5адигидротестостерон имеет менее выраженные анаболические свойства. Повидимому, Дчдвойная связь в молекуле тестостерона, ослабляя андрогенные свойства, усиливает анаболические. Возможно, решающим является то, что в клетках мужского полового аппарата преобладают андрогенные рецепторы, имеющие наибольшее сродство к 5адигидротестостерону, в то время как в мышцах и других тканях доминируют рецепторы с наибольшим сродством к тестостерону . Как тестостерон, так и ДГТ действуют опосредованно, через высокоаффинное и высокоспецифичное связывание с внутриклеточным белкомрецептором андрогенов. Рецепторы андрогенов обнаружены как в мужских, так и в женских тканях. Присутствие этих рецепторов в женских тканях, например, в яичниках, свидетельствует о выраженной активности андрогенов в организмах обоего пола. Более того, полагают, что белокрецептор андрогенов задействован в развитии рака яичников, поскольку его обнаруживают в опухолей яичников 1. Важно также отметить, что в тканях, содержащих ароматазу 0 , тестостерон может подвергаться ароматизации с образованием эстрадиола рис. Очевидные преимущества применения анаболических стероидов с ослабленными андрогенными свойствами давно привлекали внимание исследователей. Открытие i в году простого способа синтеза норстероидов путем удаления метиловой группы в С положении в молекуле Т положило начало эры создания многочисленных синтетических андрогенных стероидов рис. Рисунок . Рнортестостерон нандролон НТ и его соли обладали эффективным анаболическим действием и ослабленной андрогенной активностью.

Рекомендуемые диссертации данного раздела

28.06.2016

+ 100 бесплатных диссертаций

Дорогие друзья, в раздел "Бесплатные диссертации" добавлено 100 новых диссертаций. Желаем новых научных ...

15.02.2015

Добавлено 41611 диссертаций РГБ

В каталог сайта http://new-disser.ru добавлено новые диссертации РГБ 2013-2014 года. Желаем новых научных ...


Все новости

Время генерации: 0.198, запросов: 145