Индукция, фенотипическое проявление и картирование UVS-мутаций Streptomyces Olivaceus Vkx

Индукция, фенотипическое проявление и картирование UVS-мутаций Streptomyces Olivaceus Vkx

Автор: Лавренчук, Василий Яковлевич

Шифр специальности: 03.00.15

Научная степень: Кандидатская

Год защиты: 1985

Место защиты: Киев

Количество страниц: 138 c. ил

Артикул: 3432556

Автор: Лавренчук, Василий Яковлевич

Стоимость: 250 руб.

СОДЕРЖАНИЕ
ВВЕДЕНИЕ.
ГЛАВА I. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ
1.1. Природа повреждений, возникающих в ДНК.
1.2. Генетический контроль репарации ДНК
1.3. Механизмы и ферменты репарации.
1.3.1. Фотореактивация
1.3.2. Экоцизионная репарация.
1.3.3. Пострепликативная репарация
1.3.4. Индуцибельная репарация
1.3.5. Адаптивный ответ.
1.4, Мутанты стрептомицетов, дефектные по репарации
ГЛАВА 2. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ
2.1. Генетическая номенклатура, штаммы, питательные среды.
2.2. Индукция мутаций и выделение мутантов чувствительных к действию УФсвета иуз.
2.3. Изучение чувствительности Цуз иЦуз штаммов к различным повреждающим ДНКтропным агентам
2.4. Определение доверительных интервалов кривых выживаемости .
2.5. Изучение способности и иузштаммов к
фоторе активации.
2.6. Определение антибиотической активности иуэцутантов
2.7. Процедуры скрещиваний и генетический анализ гап
лоидных рекомбинантов
ГЛАВА 3. ПОЛУЧЕННЫЕ РЕЗУЛЬТАТЫ И ИХ ОБСУЖДЕНИЕ
3.1. Получение и фенотипическая классификация vмутантов . iv VX
3.1.1. Частота индукции vмутаций.
3.1.2. Чувствительность vмутантов к действию повреждающих ДНКтропных агентов
3.1.3. Способность v и vшташов к фотореактивации.
3.1.4. Сравнительный анализ наиболее чувствительных к УФсвету мутантов стрептомицетов и кишечной палочки.
3.1.5. Заключение.
3.2. Фертильность скрещиваний и рекомбинационная
способность vмутантов.
3.2.1. Способность vмутантов к образованию антибиотика и фертильность скрещиваний
3.2.2. Ингибирование vмутантами спорообразования штаммов и I4 смешанной культуре.
3.2.3. Рекомбинационная способность vмутантов
3.2.4. Заключение
3.3. Генетический анализ vмутантов
3.3.1. Картирование мутаций v2, vз, v4 и v5 .
3.3.2. Анализ штамма с как двойного vмутанта
3.3.3. Мутации v и возможное количество затронутых генов репарации.
3.3.4. ЗаключениеНО
выводы.из
ЛИТЕРАТУРА


Кроме пиримидиновых димеров, УФсвет вызывает появление в ДНК продуктов5,6диокситимина и других тиминовых гликолей, гидратов пиримидинов, сшивок ДНКбелок Сигаева и соавт. При облучении спор высоктш дозами УФсвета до тимина может превратиться в так называемый споровый продукт типа циклобутановых димеров рис. Споровый продукт вызывает в раз меньший летальный эффект, чем тиминовые димеры Смит, Хенеуолт, . Все эти повреждения так или иначе искажают конфигурацию двойной спирали ДНК и должны в дальнейшем устраняться репарационными системами Жестяников, . Наиболее изученными в этом отношении являются пиримидиновые димеры. Их количество в ДНК . Образовавщийся димер вызывает нарушение спаривания с двумя комплементарными основаниями, которые находятся напротив него. С каждой стороны от димера также нарушается спаривание, которое захватывает еще четыре пары оснований. При действии на клетку различных видов ионизирующего излучения наблюдается ряд общих закономерностей, однако, в случае Уизлучения и быстрых нейтронов доказана более высокая относительная биологическая эффективность последних Свердлов, . , , . Рис. I. Образование димера тимина а и спорового продукта б при облучении ДНК УФсветом. Реасоске , , I0. В случае неполного совпадения однонитевых разрывов могут появляться косые двойные разрывы Стручков, . Имеются противоречивые данные о репарации двойных разрывов ДНК у . Показано, что в первые мин. Остальные этих повреждений репарируются медленно в последующее время. У мутанта гесА гесВ гесС медленная репарация не обнаружена, что указывает на существование рекомбинантного пути репарации двойных разрывов в клетках дикого типа Петров, . С другой стороны показана нерепарируемость двойных разрывов у v штамма . при ингибировании экзонуклеазной активности. Уже первый двойной разрыв ДНК вызвал гибель клетки. У мутанта гесА гесВ гесС первый двойной разрыв возникает при большей дозе vлучей по сравнению с клетками дикого типа в связи с генетическим блоком экзонуклеазы V , ведущей расчистку однонитевых разрывов и ускоряющей появление двойных разрывов. Клетки этого штамма погибают задолго до наступления первого двойного разрыва Бреслер и соавт. Аналогичные результаты о нерепарируемости двойных разрывов получены на клетках карциномы шейки матки Филатов и соавт. Репарация двойных разрывов нарушена у радиочувствительных мутантов дрожжей Вишневецкая и соавт. Кроме одно и двунитевых разрывов, оказывающих на клетку сильное летальное действие, радиация вызвает появление в ДНК многих химических повреждений, которые могут опосредованно приводить к разрывам нитей и также вызывать гибель клеток. Сюда относятся повреждения азотистых оснований, сахарофосфатного каркаса, разрывы гликозидных связей и ряд других повреждений Крушинская, Рябченко, . Повреждения оснований оказывают на клетку наибольшее биологическое действие. Они делятся на щелочелабильные и щелочестабильные. В случае выпадения основания в нити ДНК образуются апуриновые или апиримидиновые участки. Они переходят в однонитевые разрывы при щелочной денатурации ДНК. Этот тип повреждений относится к щелочелабильным. Все остальные повреждения оснований относятся к щелочестабильным. Их можно выявить при действии на облученную ДНК эндонуклеаз. К щелочестабильным повреждениям оснований относятся образование различных гликолей тимина продукт, а также удаление трития из метильной группы тимина с образованием Рябченко, . Щелочелабильные и щелочестабильные участки образуются в значительно большем количестве, чем однонитевые разрывы. Бреслером и соавторами показано, что соотношение однонитевых разрывов к обоим типам этих повреждений в Уоблученных клетках . Бреслер и соавт. Жестяников, . Нитрозогуанидин. Пметил1 нитроИнитрозогуанидин сильный канцероген, вызывающий алкилирование различных сайтов пуриновых и пиримидиновых оснований. Повреждения распределяются довольно равномерно по хромосоме , . Однако, репликативный аппарат клетки может его игнорировать, поскольку это повреждение не вызывает нарушений в спаривании оснований.

Рекомендуемые диссертации данного раздела

28.06.2016

+ 100 бесплатных диссертаций

Дорогие друзья, в раздел "Бесплатные диссертации" добавлено 100 новых диссертаций. Желаем новых научных ...

15.02.2015

Добавлено 41611 диссертаций РГБ

В каталог сайта http://new-disser.ru добавлено новые диссертации РГБ 2013-2014 года. Желаем новых научных ...


Все новости

Время генерации: 0.204, запросов: 145