Рекомбиногенность бактериального белка reca из pseudomonas aeruginosa сопряжена со стабильностью его нуклеопротеинового комплекса

Рекомбиногенность бактериального белка reca из pseudomonas aeruginosa сопряжена со стабильностью его нуклеопротеинового комплекса

Автор: Байтин, Дмитрий Михайлович

Автор: Байтин, Дмитрий Михайлович

Шифр специальности: 03.00.15

Научная степень: Кандидатская

Год защиты: 1999

Место защиты: Гатчина

Количество страниц: 107 с. ил.

Артикул: 268545

Стоимость: 250 руб.

Рекомбиногенность бактериального белка reca из pseudomonas aeruginosa сопряжена со стабильностью его нуклеопротеинового комплекса  Рекомбиногенность бактериального белка reca из pseudomonas aeruginosa сопряжена со стабильностью его нуклеопротеинового комплекса 

ОГЛАВЛЕНИЕ
ВВЕДЕНИЕ
Глава 1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ
1.1. Взаимодействие белка с онДНК
1.2. Взаимодействие белка с днДНК
1.3. Гидролиз АТФ
1.4. Реакция переноса нити
1.5. Роль белка в реакции переноса нити
1.6. Роль белка в системе клетки
1.7. Свойства, обеспечивающие высокую рекомбиногенность
белков
1.8. подобные белки
1.9.1. Структура гена гесА из i и анализ
его продукта
1.9.2. Рекомбиногенность белка из .i
Глава 2. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ
Глава 3. РЕЗУЛЬТАТЫ
3.1. Очистка белка и измерение его АТФазной
активности в зависимости от температуры
3.2. ОнДНКзависимый гидролиз АТФ белка
3 3. Стехиометрия связывания белка РесАРа с онДНК
3.4. Реакция переноса нити, катализируемая белком РесАРа
3.5. Конкуренция между белками ЯесАРа и ЭЭВ за связывание с ДНК
3.6. Диссоциация комплексов РесАонДНК
3.7. Взаимодействие белка РесАРа с днДНК
3.8. Ингибирование РесАРазависимого гидролиза АТФ
хлоридом натрия
3.9. ЭлигодТзависимый гидролиз АТФ
Глава 4. ОБСУЖДЕНИЕ РЕЗУЛЬТАТОВ
4.1. ОнДНКзависимый гидролиз АТФ проводимый белком РесАРа
4.2. Стехиометрия связывания белка РесАРа с онДНК
4.3. Взаимодействие белка ИесАРа с днДНК
4.4. Причины высокой рекомбиногенности белка РесАРа
4.5. Биохимические основы стабильности филамента РесАРа
ЗАКЛЮЧЕНИЕ
ВЫВОДЫ
СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ


Данная реакция протекает с участием белка i а Последовательное изучение каждого из этапов этой реакции позволяет понять закономерности гомологичной рекомбинации i viv. Актуальность проблемы. Несмотря на то, что ген гесА из i был клонирован и секвенирован еще в году Крюков, Зайцев и др. , , исследование биохимических свойств белка из . было предпринято только в последнее время. Необычная способность белка индуцировать высокую частоту рекомбинационных обменов в клетках . 1 и 0 из . v vi, . Однако в отличие от этих белков гиперрекомбиногенность белка выражается на фоне крайне слабой индукции функций клетки. Такая необычная комбинация и фенотипов клеток . , указывает на различия при инициировании гомологичной рекомбинации, контролируемой этим белком. Исследование белка в сравнении с белком из . i vi выявило корреляцию между рекомбиногенностью белка и стабильностью его нуклеопротеинового комплекса. Вместе с тем, существует ряд внешних факторов, определяющих стабильность филамента, образуемого белком i vi, и, повидимому, i viv. Одним из таких факторов является необычный эффект, производимый молекулой дАТФ на белок i i, , . отвечают за стабильность нуклеопротеинового комплекса и важна ли эта стабильность для инициирования рекомбинации. Цель работы. Целью работы было изучение биохимических свойств белка для выяснение причин его высокой рекомбиногенности i viv. Задачи работы. Для достижения этой цели решали следующие задачи 1 Выделение и очистка белка 2 Сравнительный анализ ДНКзависимого гидролиза АТФ, катализируемого белками и 3 Изучение особенностей реакции переноса нити, катализируемой белком 4 Изучение биохимических свойств, определяющих эффективность белков и в конкуренции с белком за взаимодействие с онДНК. Научная новизна и практическая ценность работы. Впервые охарактеризованы биохимические свойства белка , как наиболее рекомбиногенного из всех белков , изученных к настоящему времени. Выявлена корреляция между высокой рекомбиногенностью белка и стабильностью его нуклеопротеинового комплекса. Исследованы зависимости межмолекулярного взаимодействия в полимере белка , а также взаимодействия белка с ДНК от концентрации ионов Мд. Предложен новый метод, позволяющий регистрировать кинетику разборки филаментов, построенных белками на онДНК. Изучен эффект кофактора дАТФ, в комплексе с которым белок создает филамент, по своей стабильности напоминающий филамент . Проведенное исследование относится к числу фундаментальных. Оно расширяет наши представления о молекулярном механизме гомологичной рекомбинации. Белок РесАРа может быть использован в роли гомологичной рекомбиназы, введение которой в клетки млекопитающих может существенно активировать гомологичную рекомбинацию в клетках высших и обеспечить замену поврежденного участка гена при генотерапии. Реакции обмена гомологичными нитями ДНК предшествует стадия образования пресинаптического комплекса, т. РесА на онДНК Сох е Биохимические и морфологические свойства нуклеопротеинового филамента строго зависят от того, входит ли в комплекс АДФ или АТФ. А Едетап е а. Такой комплекс является неактивным для проведения реакции обмена нитей. Замещение АДФ на АТФ либо негидролизуемого аналога АТФ АТФу приводит к значительному изменению морфологических параметров филамента. Шаг спирали увеличивается до А межнуклеотидное расстояние до 5 А, а диаметр образуемого филамента уменьшается до 0 А. Белок РесА взаимодействует с сахарофосфатным остовом ДНК таким образом, что молекула ДНК оказывается расположенной вдоль оси филамента, при этом нуклеотидные основания остаются доступными со стороны большой бороздки филамента. ОнДНК в таком комплексе растягивается в 1,5 раза относительно своей исходной длины.

Рекомендуемые диссертации данного раздела

28.06.2016

+ 100 бесплатных диссертаций

Дорогие друзья, в раздел "Бесплатные диссертации" добавлено 100 новых диссертаций. Желаем новых научных ...

15.02.2015

Добавлено 41611 диссертаций РГБ

В каталог сайта http://new-disser.ru добавлено новые диссертации РГБ 2013-2014 года. Желаем новых научных ...


Все новости

Время генерации: 0.199, запросов: 145