Модуляция эффектов геномного импринтинга у млекопитающих : Исследования на модельной системе - партеногенетических эмбрионах мышей

Модуляция эффектов геномного импринтинга у млекопитающих : Исследования на модельной системе - партеногенетических эмбрионах мышей

Автор: Платонов, Евгений Семенович

Шифр специальности: 03.00.15

Научная степень: Докторская

Год защиты: 2003

Место защиты: Москва

Количество страниц: 221 с. ил

Артикул: 2337008

Автор: Платонов, Евгений Семенович

Стоимость: 250 руб.

ВВЕДЕНИЕ.
ЧАСТЬ I ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ
1. ГЕНОМНЫЙ ИМПРИНТИНГ ЭПИГЕНЕТИЧЕСКИИЙ ФЕНОМЕН РЕГУЛЯЦИИ ДИФФЕРЕНЦИАЛЬНОЙ АКТИВНОСТИ АЛЛЕЛЬНЫХ ГЕНОВ
ИМПРИНТИРОВАННЫХ ЛОКУСОВ.
1.1. Геномный импринтинг фактор неэквивалентности
материнского и отцовского геномов у млекопитающих
1.2. Геномный импринтинг и инактивация Ххромосомы
1.3. Идентификация и особенности импринтированных генов
2. ПРОЦЕССЫ МЕТИЛИРОВАНИЯ
ДЕМЕТИЛИРОВАНИЯ ДНК ОСНОВНОЙ МЕХАНИЗМ ВОЗНИКНОВЕНИЯ ГЕНОМНОГО ИМПРИНТИНГА
2.1. Формирование паттернов метилирования.
2.2. Метилирование ДНК основной механизм импринтирования
2.2.1. Этапы метилирования деметилирования генома в онтогенезе
2.2.2. Нарушение геномного импринтинга в результате мутаций,
затрагивающих процессы метилирования.
2.3. Болезни человека, обусловленные нарушением геномного
импринтинга
3. ГЕНОМНЫЙ ИМПРИНТИНГ И ПРОБЛЕМА
ПАРТЕНОГЕНЕЗА У МЛЕКОПИТАЮЩИХ
3.1. Способность к партеногенезу в различных группах
животных.
3.2. Типы партеногенетических зародышей и особенности партеногенетического развития яйцеклеток
млекопитающих
3.3. Получение искусственных партеногенов млекопитающих
3.4. Развитие и причины гибели партеногенетических зародышей
млекопитающих
3.5. Развитие партеногенетических клеточных клонов в составе
химерных организмов млекопитающих
3.5.1. Партеногенетические химеры
3.5.2. Андрогенетические химеры
4. ПАРТЕНОГЕНЕЗ И МОДУЛЯЦИЯ ЭФФЕКТОВ
ГЕНОМНОГО ИМПРИНТИНГА
4.1. Деметилирование ДНК и модуляция эффектов геномного
импринтинга
4.2. Характеристика соединений, обладающих выраженными
деметилирующими свойствами .
4.2.1. Деметилирующее действие 5азацитидина и модуляция
экспрессии генов.
4.2.2. Деметилирующие свойства ретиноевой кислоты
4.3. Влияние генетической среды на эффекты геномного
импринтинга.
4.4. Модуляция экспрессии импринтированных генов
полипептидными ростовыми факторами.
ЧАСТЬ П СОБСТВЕННЫЕ ИССЛЕДОВАНИЯ
5. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ
5.1. Экспериментальные животные
5.1.1. Анестезия, умерщвление
5.1.2. Вазэктомия
5.1.3. Суперовуляция, датировка беременности, выделение ранних
эмбрионов мышей.
5.2. Получение партеногенетических зародышей.
5.3. Культивирование i vi одноклеточных эмбрионов до
. стадии бластоцисты.
5.4. Получение партеногенетических химер.
5.4.1. Агрегация восьмиклеточных эмбрионов и трансплантация
бластоцист в матку ложнобеременных самок.
5.4.2. Анализ распределения партеногенетических клеточных
клонов в составе химерного организма.
5.4.2.1. Распределение партеногенетических клонов меланобластов в
шерстном покрове химер 6 В
5.4.2.2. Распределение партеногенетических клонов в ретинальном
пигментном эпителии и сосудистой оболочке глаза
5.5. Культивирование i vi нормальных оплодотворенных
и партеногенетических эмбрионов мышей на постимплантационных стадиях развития.
5.6. Электрофоретический анализ изоферментов
глюкозофосфатизомеразы
5.7. Анализ влияния деметилирующих соединений на
нормальные оплодотворенные и партеногенетические эмбрионы мышей
5.7.1. Обработка 5азацитидином
5.7.2. Обработка ретиноевой кислотой.
5.8. Анализ влияния ростовых факторов на партеногенетических
эмбрионов мышей .
5.9. Анализ экспрессии импрингированного гена I2 методом i
i гибридизации на тотальных препаратах и гистологических срезах
5 Статистическая обработка данных.
6. РЕЗУЛЬТАТЫ
6.1 ПАРТЕНОГЕНЕТИЧЕСКОЕ РАЗВИТИЕ ЭМБРИОНОВ
МЫШЕЙ МОДЕЛЬНАЯ СИСТЕМА ДЛЯ ИЗУЧЕНИЯ ГЕНОМНОГО ИМПРИНТИНГА В ЭМБРИОГЕНЕЗЕ МЛЕКОПИТАЮЩИХ
6.1.1. Изучение межлинейных различий в способности к
партеногенетическому развитию эмбрионов мышей СВЬ
.и СВА
6.1.2. Влияние 5азацитидина на экспрессию генов локуса i1 на
ранних стадиях преимплантационного развития нормальных оплодотворенных эмбрионов мышей 6 и СВА
6.1.3. Пролонгирование развития нормальных и
партеногенетических эмбрионов на постимплантационных стадиях i vi
6.1.3.1. Культивирование нормальных оплодотворенных
постимплантационных эмбрионов.
6.1.3.2. Культивирование диплоидных партеногенетических
эмбрионов линии СВА .
6.1.3.3. Культивирование диплоидных партеногенетических
эмбрионов СВА x6 .
6.2. МОДУЛЯЦИЯ ЭФФЕКТОВ ГЕНОМНОГО
ИМПРИНТИНГА ПРИ ИЗМЕНЕНИИ ГЕНЕТИЧЕСКОЙ СРЕДЫ
6.2.1. Анализ партеногенетических клеточных клонов у химерных
мышей 6
6.2.1.1. Постнатальное развитие партеногенетических химер.
6.2.1.2. Распределение паргеногенетических клонов меланобластов в
шерстном покрове .
6.2.1.3. Распределение партеногенетических клеточных клонов в ретинальном пигментном эпителии и сосудистой оболочке
ретинальном пигментном эпителии и сосудистой оболочке
глаз .
6.2.1.4. Распределение партеногенетических клеточных клонов
во внутренних органах и тканях химер шестимесячного возраста
6.2.1.5. Постимплантационное развитие и клональный анализ
партеногенетических химерных эмбрионов
6.3. МОДУЛИРУЮЩЕЕ ВЛИЯНИЕ ДЕМЕТИЛИРУЮЩИХ
СОЕДИНЕНИЙ НА ЭФФЕКТЫ ГЕНОМНОГО ИМПРИНТИНГА.
6.3.1. Влияние неспецифического деметилирующего соединения
ретиноевой кислоты на развитие диплоидных партеногенетических эмбрионов мышей 6, СВА
6.3.1.1. Применение ретиноевой кислоты на доимплантационных
стадиях развития
6.3.1.2. Влияние на имплантацию и постимплантационное развитие
6.3.1.3. Применение ретиноевой кислоты в постимплантационном
периоде развития.
6.3.2. Действие 5азацитидина на развитие диплоидных
партеногенетических эмбрионов мышей 6, СВА и
СВА х
6.3.2.1. Влияние 5азацитидина на развитие яйцеклеток,
активированных к партеногенезу
6.3.2.2. Воздействие 5азацитидина на развитие партеногенетических
зародышей на стадии бластоцисты
6.3.2.3. Влияние 5азацитидина на постимплантационное развитие
партеногенетических эмбрионов после внутрибрюшинных инъекций различных доз препарата самкамреципиентам
6.4. МОДУЛЯЦИЯ ЭФФЕКТОВ ГЕНОМНОГО
ИМПРИНТИНГА РОСТОВЫМИ ФАКТОРАМИ.
6.4.1. Изучение влияния ростовых факторов семейства факторов
роста фибробластов на развитие диплоидных партеногенетических зародышей СВА х
6.4.1.1. Действие 2 и 4 на развитие партеногенетических
зародышей на стадии морулы
6.4.1.2. Совместное влияние 2 и инсулиноподобного ростового
фактора I2 на партеногенетические зародыши i vi
6.4.2. Изучение влияния трансформирующего ростового фактора а

6.4.2.1. Влияние на развитие эмбрионов доимплантационнных
стадий и имплантацию в матку ложнобеременных самок
6.4.2.2. Влияние на постимплантационное развитие эмбрионов и
плаценты
6.4.3. Антиз влияния на экспрессию импринтированного
гена2
ОБСУЖДЕНИЕ.
ВЫВОДЫ.
СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ


Считается, что эти гены импринтированы их родителями и поэтому данный феномен называют родительским импринтингом, геномным импринтингом или гаметическим импринтингом. В последнее время для описания данного явления чаще используют термин геномный импринтинг. Термин хромосомный импринтинг , , Баранов, постепенно вышел из обращения. Геномный импринтинг известен только у представителей подкласса высших, или плацентарных, млекопитающих i, или i и определяется, в частности для аутосом, как дифференциальная экспрессия двух родительских аллелей гена Этот подкласс охватывает подавляющее большинство видов млекопитающих. Они характеризуются тем, что их зародыш снабжен особым органом плацентой, при помощи которой осуществляется его связь с телом матери, и детеныши родятся более или менее хорошо развитыми. Для самок сумчатых животных i характерен геномный импринтинг, при котором происходит преимущественная инактивация X хромосомы во всех соматических клетках . По мнению Холла , , импринтинг является эволюционно приобретенным признаком в результате перехода к внутриутробному развитию и плацентации, где роль родительских геномов в воспроизводстве должна быть разной. Вероятно, именно поэтому передача трансгенов матерью часто приводит к их инактивации через метилирование. Геномный импринтинг следует относить к эпигенетическим явлениям, когда наследственные изменения в генной экспрессии происходят без изменения последовательности нуклеотидов ДНК. Эпигенетические механизмы контроля принимают участие во многих процессах нормального и патологического развития человека и животных. В основе геномного импринтинга лежат специфические структурномолекулярные изменения регуляторных элементов импринтированных локусов, происходящие во время формирования мужских и женских половых клеток, которые приводят к стойким функциональным различиям в экспрессии аллелей гомологичных генов у потомства Баранов, . Эпигенетический контроль экспрессии генов через их репрессию и дерепрессию является одним из фундаментальных механизмов регуляции развития млекопитающих. В каждом эпигенетическом феномене выделяют три составляющих регуляции сигнал восприятие сигнала локусом переключателем поддержание выбранного состояния. Примером такой триады являются детерминация пола, инактивация Ххромосом в соматических клетках у самок млекопитающих и геномный импринтинг, причем этот каскад явлений происходит по сходному эпигенетическому сценарию Голубовский, . Геномный импринтинг включает ряд последовательных эпигенетических событий в развитии организма. При оплодотворении в зиготе объединяются два гаплоидных родительских набора хромосом, имеющие установленные в процессе гаметогенеза и свойственные полу родителей характерные импрингы. В клетках зародышевого пути эти импринты сохраняются, но в процессе сперматогенеза или оогенеза полностью стираются и к моменту созревания гамет устанавливаются v i . Другими словами, во время формирования первичных половых клеток происходит очередная перемена характера импринтов, соответствующая полу данного организма. Такой процесс, в результате которого происходят значительные изменения паттерна импринтов, наиболее важен для понимания механизмов регуляции геномного импринтинга в процессе роста и развития организма. Причем этот ключевой этап, указывающий на обратимый характер геномного импринтинга, вселяет надежды на возможность напрааленного изменения геномного импринтинга. Однако именно данный процесс остается наиболее загадочным и наименее изученным феноменом. Дифференциальная экспрессия генов импринтированных локусов может иметь в ходе развития ткане и стадиоспецифический характер, то есть один и тот же ген может вести себя как импринтированный неактивный в определенной клеточной системе и на конкретной стадии онтогенеза. В то же время этот же ген может нормально экспрессироваться в других клеточных системах или в этой же клеточной системе, но на другой стадии развития. Солтер , подчеркивает, что этот факт следует всегда учитывать, когда мы обсуждаем возможные эффекты и механизмы геномного импринтинга.

Рекомендуемые диссертации данного раздела

28.06.2016

+ 100 бесплатных диссертаций

Дорогие друзья, в раздел "Бесплатные диссертации" добавлено 100 новых диссертаций. Желаем новых научных ...

15.02.2015

Добавлено 41611 диссертаций РГБ

В каталог сайта http://new-disser.ru добавлено новые диссертации РГБ 2013-2014 года. Желаем новых научных ...


Все новости

Время генерации: 0.191, запросов: 145