Стресс-реакция у имаго Drosophila : Механизм и генетический контроль

Стресс-реакция у имаго Drosophila : Механизм и генетический контроль

Автор: Хлебодарова, Тамара Михайловна

Шифр специальности: 03.00.15

Научная степень: Докторская

Год защиты: 2000

Место защиты: Новосибирск

Количество страниц: 342 с. ил.

Артикул: 300212

Автор: Хлебодарова, Тамара Михайловна

Стоимость: 250 руб.

СОДЕРЖАНИЕ.
СПИСОК СОКРАЩЕНИЙ
ВВЕДЕНИЕ.
ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ
Ювенильный гормон.
Регуляция титра ЮГ.
Система деградации ЮГ
Механизм действия ЮГ.
Роль ЮГ в размножении насекомых
Развитие насекомых в неблагоприятных условиях среды.
Реакция системы деградации 1 на стресс
Механизм стрессреакции у личинок насекомых и его
генетический контроль
Биогенные амины насекомых
Влияние стресса на содержание биогенных аминов у насекомых
Система метаболизма дофамина и октопамина у i
Щелочная фосфатаза.
Тирозингидроксилаза
Фенолоксидазы
Дофадекарбоксилаза.
Тирозиндекарбоксилаза
ацетилтрансфераза
iаланилдофаминсинтетаза
Дофамингидроксилаза
Внутриклеточный стрессответ
Белки теплового шока и их функции в клетке.
Молекулярные механизмы регуляции экспрессии БГШ
Заключение
МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ
Линии дрозофил
Условия стрсссирования
Методики
Измерение гидролиза ЮГ.
Измерение продуктов гидролиза ЮГ с помощью тонкослойной
хроматографии
Электрофорез в полиакриламидном геле.
Ионообменная хроматография.
Получение антисыворотки против ЮГэстеразы.
Иммуноблот анализ
Измерение содержания дофамина и норадреналина
Измерение активности щелочной фосфатази
Измерение активности тирозиндекарбоксилазы.
Измерение активности фенолоксидаз
Измерение активности тирозингидроксилазы.
Измерение активности дофадекарбоксилазы
Измерение активности Иацетилтрансферазы.
Анализ синтеза РНК и белка по включению меченных
предшественников.
Иозернблот анализ.
Измерение концентрации нуклеиновых кислот и белка
Статистическая обработка результатов
РЕЗУЛЬТАТЫ.
Система деградации ювенильного гормона у i
Сравнение системы гидролиза ЮГ у куколок и имаго . viii
Сравнение систем деградации ЮГ у имаго двух линии
. viii и .
Ферменты деградации ЮГ в онтогенезе двух линии
. viii
Роль ферментов деградации ЮГ в репродукции i
Система деградации ЮГ у i при стрессе.
Влияние стресса на гидролиз ЮГ у имаго двух видов i .3 Содержание ДФФнечувствительной ЮГЭ у самок линии
. viii в нормальных условиях и при стрессе
Генетический контроль деградации ЮГ у . viii.
Генетический анализ различий в активности ДФФнечувствительной ЮГэстеразы между линиями 1 и 7 . viii.
Генетический анализ различий в активности ЦФФчувствительной
ЮГэстеразы между линиями 1 и 7 . viii
Генетический контроль ответа системы деградации ЮГ на
стрессирующее воздействие у . viii
Определение группы сцепления гена, контролирующего ответ
на стрессор системы деградации ЮГ у имаго у I, viii.
Система метаболизма дофамина и октопамина у . viii
Щелочная фосфатаза.
Активность ЩФу имаго . viii в нормальных условиях и при тепловом стрессе.
Генетический анализ различий в активности ЩФ у линий
1 и 7 . viii
Определение группы сцепления гена, регулирующего
активность ЩФ у . viii
Ферменты синтеза ДА и О А у i viii.
Тирозингидроксилаза
ТГу имаго линий 1 и 7 и их Гi гибридов в нормальных
условиях
Динамика изменения активности ТГ у имаго линий 1 и
. viii и их i гибридов в условиях стресса
Дофадекарбоксилаза.
Активность ДДКу самок и самцов линии 1 и 7 . viii
и их гибридов в нормальных условиях и при стрессе.
Генетический анализ различий в активности ДДК у линий
1 и 7 . viii
Тирозиндекарбоксилаза
Активность ГДКу имаго . viii в нормальных условиях
и при тепловом стрессе
Генетический анализ различий в активности ТДКу
двух линий . viii.
Локализация гена, регулирующего активность ТДКу . viii
Ферменты деградации ДА и О А у i viii
Фенол оксидазы.
Активность МФО иДФО у . viii в нормальных условиях
и при тепловом стрессе
Генетический анализ различий в активности ДФО у двух
линий . viii
ацетилтрансфераза
Активность у . viii с дофамином, октопамином и
тирамииом в качестве субстратов.
Активность с дофамином и октопамином в качестве субстрата у двух линий . viii в норме при тепловом стрессе8 Динамика содержания ДА у . viii при тепловом
стрессировании различной длительности
Содержание норадреналина у двух линий . viii
в норме и при стрессе
Определение группы сцепления гена, регулирующего реактивность системы ДА у . viii
Внутриклеточный сгрессответ у i
Анализ спектров суммарных белков у имаго линий 1 и
. viii в нормальных условиях и при тепловом стрессе.
Анализ синтеза белка в слюнных железах личинок линий
1 и 7 . viii в норме и при тепловом стрессе.
Реакция систем метаболизма О А и Ю1 на стресс у мух с
нарушенным синтезом БТШ.
Синтез РНК в слюнных железах личинок III возраста
. viii в нормальных и рессирующих условиях
Экспрессия генов БТШ у имаго двух линий . viii
Экспрессия генов, контролирующих структуру транскрипционных
факторов и , у двух линий . viii.
Заключение.
ОБСУЖДЕНИЕ.
Система деградации ЮГ у i и ее роль в размножении в
нормальных условиях и при стрессе.
Контроль содержания ДА у i viii в нормальных
условиях и при стрессе
Существует ли единый генетический контроль различных
звеньев стрессорной реакции
О природе гена, мутация которого нарушила стресс
реактивность у линии 7 . viii.
ЗАКЛЮЧЕНИЕ.
ВЫВОДЫ.
СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ


Учитывая тот факт, что каждый их этих компонентов также подвержен контролю, картина регуляции синтеза ЮГ в течение жизненного цикла насекомого представляется достаточно сложной. Что касается контроля секреции ЮГ, то как выяснилось, он не играет существенной роли в регуляции титра гормона, гак как ЮГ не накапливается в СА, а сразу выводится из железы см. В регуляцию титра ЮГ вовлечены белки гемолимфы, которые связывают гормон, защищают его от неспецифической деградации и транспортируют к тканяммишеням. Несмотря на разнообразие ЮГ
связывающих белков, выявленных у разных видов насекомых, их можно подразделить на два типа , . Один из них обнаружен в гемолимфе i , ii и i i. Да , , ii, i, . Другой тип белков выявлен в гемолимфе i. Это низкомолскулярные белки , связывающие ЮГ и ЮГ с 0 нМ, а ЮГШ с еще меньшей эффективностью обзор , , . У i i в гемолимфе личинок III возраста было обнаружено два ЮГсвязывающих белка. Один имел молекулярный вес 8 кДа и обладал высокой способностью связывать ЮГ, а другой с молекулярным весом кДа, характеризовался низкой эффективностью связывания гормона , i, . Изучение ЮГсвязывающего белка, выделенного из гемолимфы x, показало, что он синтезируется в жировом теле и его последовательность не имеет сходства с другими известными белками , i, . Использование аналога ЮГ, эпоксигомофарнезил диазоацетата, позволило картировать ЮГсвязывающие сайты этого белка , i, . Как полагают авторы, их формируют дисульфидные мостики между и Сконцевыми районами молекулы, которые образуют гидрофобный карман в который и попадает гидрофильный ЮГ Сопоставление концентрации ЮГсвязывающего белка из гемолимфы личинок x с титром ЮГ показало, что весь ЮГ связан с белком , i, i, , . В исследованиях i vi было обнаружено, что ЮГсвязывающие белки гемолимфы x защищают не только от неспецифической деградации, но и драматически снижают активность одного из основных ферментов деградации ЮГ эпоксидгидразы, не влияя при этом на активность ЮГэстеразы , , i, . Учитывая задачи нашей работы, рассмотрим систему деградации ЮГ и ее роль в регуляции титра гормона более подробно. Система деградации ЮГ. Основные пути деградации ЮГ у насекомых, как впервые было установлено Слейдом и Циббитом , ii, , это гидролиз эфирной группы и гидратация эпоксидного кольца. Первичными продуктами этих реакций являются ЮГкислота и ЮГдиол, соответственно. Ферменты, осуществляющие эти реакции это ЮГэстераза, которая выявлена, в основном, в гемолимфе и жировом теле личинок различных видов насекомых и ЮГэпоксидгидраза ЮГЭГ, которая широко представлена в некоторых органах и тканях личинок, таких как жировое тело, кишечник и имагинальные диски, но не в гемолимфе обзор, . Уже в ранних работах было установлено, что ЮГэстераза гидролизует ЮГ, связанный с белкомносителем . ЮГЭГ этой способностью, повидимому не обладает, поскольку активность этого фермента резко падает в присутствии ЮГсвязывающих белков , i, . ЮГэстеразу. В тканях, повидимому, основным ЮГгидролизующим ферментом является ЮГЭГ, однако эта возможность не исключена и для ЮГэстеразы, так как она одинаково эффективно гидролизует и связанный и свободный ЮГ . Анализ многочисленных исследований по изучению динамики активности ЮГэстеразы у разных видов насекомых показал, что этот фермент играет ключевую роль в инициации и протекании метаморфоза. Действительно, у всех изученных видов i и у большинства исследованных видов i падению титра ЮГ в конце последнего личиночного возраста предшествовало появление и последующее повышение активности ЮГэстеразы. Раушенбах, . Подтверждением доказательства роли ЮГэстеразы в инициации и протекании метаморфоза у i и i послужили эксперименты по ингибированию активности фермента. Аппликации предкуколкам ii i, i i, i и i vii i ингибиторов активности ЮГэстеразы приводили к резкому снижению активности фермента i viv и прерыванию окукливания , , . Ингибирование активности ЮГэстеразы у личинок x приводило к задержке метаморфоза и формированию гигантских личинок , , , а у ii i вызывало дополнительную личиночноличиночную линьку , . У имаго роль ЮГэстеразы в регуляции титра ЮГ не столь очевидна.

Рекомендуемые диссертации данного раздела

28.06.2016

+ 100 бесплатных диссертаций

Дорогие друзья, в раздел "Бесплатные диссертации" добавлено 100 новых диссертаций. Желаем новых научных ...

15.02.2015

Добавлено 41611 диссертаций РГБ

В каталог сайта http://new-disser.ru добавлено новые диссертации РГБ 2013-2014 года. Желаем новых научных ...


Все новости

Время генерации: 0.298, запросов: 145