Амплификация генов как механизм изменчивости соматических клеток млекопитающих

Амплификация генов как механизм изменчивости соматических клеток млекопитающих

Автор: Копнин, Борис Павлович

Шифр специальности: 03.00.15

Научная степень: Докторская

Год защиты: 1983

Место защиты: Москва

Количество страниц: 273 c. ил

Артикул: 4027822

Автор: Копнин, Борис Павлович

Стоимость: 250 руб.

ВВЕДЕНИЕ
ГЛАВА I.
1.2.
1.4.
ГЛАВА 2.
2.2.
2.2.
2.
2.3. 2.
2.4. 2. 2.
ОГЛАВШИЕ
Феномен амплификации генов.
Понятие амплификации генов.
Открытие явления генной амплификации амплификация локуса i1 у i и амплификация рибосомных генов в процессе оогенеза .
Амплификация генов как механизм изменчивости микроорганизмов
Магнификация и компенсация рибосомных и гистоновых генов у i .
Амплификация генов в соматических клетках млекопитающих .
Получение и характеристика сублиний клеток, резистентных к колхицину и адриабластину
Введение


Однако, несмотря на то, что ряд исследователей высказывал предположение о вовлеченности феномена амплификации генов в процессы канцерогенеза,П4, природа амплифицированных генов в опухолевых клетках остается неясной. Лишь в случае крысиной гепатомы Н4 амплифицированные гены были идентифицированы 7. С помощью метода гибридизации i i было показано, что дополнительные хромосомные районы, состоящие из чередующихся более темных и более светлых блоков эти структуры названы ii ii i дифференциально окрашенные области Д представляют собой участки, состоящие из амплифицированннх генов рРНК 7. В г. КАД. Эта амплификация была найдена в клетках сирийского хомяка, устойчивых к фосфонацетил ъ аспартату, ингибитору аспартаткарбомоилтрансферазн. Резистентность к этому препарату возникала в результате амплификации генов белка КАД, обладающего тремя ферментативными активностями аспартаткарбомоилтрансферазы, карбомоилфосфатсинтетазы, дигидрооротазы и катализирующего три первые реакции синтеза v уридинмонофосфата 5. Амплификация генов этого белка стабильно наследовалась в ряду
клеточных поколений, и, подобно генным мутациям, возникала случайно и независимо от действия селективного агента4 вывод сделан на основании результатов флуктуационного теста ЛуриаДельбрюка. Собственно этими данными и были ограничены в период начала нашей работы сведения о генной амплификации в соматических клетках млекопитающих. В отличие от микроорганизмов, у которых была обнаружена амплификация довольно большого числа разнообразных генов, в клетках млекопитающих была описана амплификация только генов рРНК, ДГФР и белка КАД. Немногочисленность имевшихся данных не позволяла составить представления о том, насколько часто этот феномен лежит в основе изменчивости соматических клеток млекопитающих, каковы общие закономерности возникновения и наследования данного генетического изменения, какие экзогенные и эндогенные факторы могут способствовать или препятствовать амплификации генов, и, наконец, каковы механизмы этого явления. Основываясь на полученных нами несколько ранее9, данных о том, что устойчивость к колхицину в соматических клетках мыши нестабильна и развивается в результате многоступенчатого процесса, мы предположили, что в основе резистентности к этому препарату может лежать амплификация генов. В связи с этим было предпринято более детальное изучение этого признака, в ходе которого было показано, что он действительно связан с амплификацией генов,кодирующих, вероятно, специфический белок охарактеризованы особенности возникновения и наследования данного генетического изменения выявлены факторы, влияющие на процессы генной амплификации и обнаружены закономерности изменений кариотипа и локализации амллифицированных последовательностей в геноме. Ниже представлены результаты этих исследований. В настоящей главе описана методика выделения резистентных к колхицину и адриабластину сублиний клеток джунгарского хомячка, в которых, впоследствии, была найдена амплификация участков генома, а также представлены данные о степени лекарственной устойчивости использованных в работе резистентных сублиний, и об изменениях фенотипа, обеспечивающих их устойчивость к большой группе цитотоксических агентов. Следует заметить, что наша работа по получению колхицинустойчивых и адриабластинустойчивнх клеточных сублиний, а также по изучению фенотипических изменений, определяющих их резистентность, была в значительной мере облегчена тем, что ряд исследователей уже проводил изучение природы данных типов лекарственной устойчивости. Так, в нашей лаборатории А. А.Ставровская с помощью многоступенчатого отбора получила сублинию клеток мыши, устойчивую к высоким концентрациям колцемида и колхицина. При исследовании этой сублинии было обнаружено, что резистентные варианты накапливают значительно меныше количества меченого колхицина, чем клетки дикого типа. В то же время гомогенаты устойчивых клеток связывают такое же количество колхицина, как и гомогенаты клеток исходной линии . Неионогенный детергент твин повышал накопление препарата в колхицинустойчивых вариантах в гораздо большей степени, чем в чувствительных клетках ,5.

Рекомендуемые диссертации данного раздела

28.06.2016

+ 100 бесплатных диссертаций

Дорогие друзья, в раздел "Бесплатные диссертации" добавлено 100 новых диссертаций. Желаем новых научных ...

15.02.2015

Добавлено 41611 диссертаций РГБ

В каталог сайта http://new-disser.ru добавлено новые диссертации РГБ 2013-2014 года. Желаем новых научных ...


Все новости

Время генерации: 0.174, запросов: 145