Роль клеток гранулезы при действии соматотропина и пролактина на мейоз ооцитов коров in vitro

Роль клеток гранулезы при действии соматотропина и пролактина на мейоз ооцитов коров in vitro

Автор: Кибардина, Татьяна Викторовна

Количество страниц: 136 с. ил.

Артикул: 4224377

Автор: Кибардина, Татьяна Викторовна

Шифр специальности: 03.00.15

Научная степень: Кандидатская

Год защиты: 2008

Место защиты: Санкт-Петербург-Пушкин

Стоимость: 250 руб.

ОГЛАВЛЕНИЕ
ВВЕДЕНИЕ
1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ.
1.1. Развитие и атрезия фолликулов в яичниках млекопитающих.
1.1.1. Динамика фолликулогенеза.
1.1.2. Атрезия как физиологический процесс регрессии фолликулов.
1.1.3. Центральная роль гонадотропных гормонов в регуляции фолликулогенеза
1.1.4. Влияние соматотропина и пролактина на рост, дифференцировку
и дегенерацию фолликулярных клеток.
1.1.5. Стероидогенез соматических клеток фолликулов в яичниках млекопитающих.
1.2. Регуляция созревания ооцитов млекопитающих.
1.2.1. Мейотические преобразования хроматина и цитоплазматические изменения в процессе созревания ооцитов.
1.2.2. Участие гипофизарных гормонов в контроле оогенеза
1.3. Влияние компонентов фолликулярной жидкости на приобретение
ооцитами компетенции к овуляции
2. МАТЕРИАЛ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЙ.
2.1 .Материал исследований
2.2. Методы исследований
2.2.1. Выделение ооциткумулюсных комплексов коров и их оценка .
2.2.2. Культивирование ооциткумулюсных комплексов коров
2.2.3. Выделение клеток гранулезы.
2.2.4. Культивирование клеток гранулезы в отсутствии сыворотки .
2.2.5. Определение содержания стероидных гормонов продуктов секреции клеток гранулезы при их культивировании i vi
2.2.6. Получение монослойной культуры и кондиционированных сред.
2.2.7. Капацитация сперматозоидов, оплодотворение ооцитов i vi, культивирование зигот и ранних эмбрионов.
2.2.8. Цитогенетический анализ ооцитов, зигот и эмбрионов крупного рогатого скота.
2.2.9. Определение содержания кальция во внутриклеточных депо ооцитов.
2.2 Микроскопирование, микрофотосъемка и статистическая обработка полученных данных.
3. РЕЗУЛЬТАТЫ СОБСТВЕННЫХ ИССЛЕДОВАНИЙ.
3.1. Влияние клеток гранулезы на способность к развитию ооцитов коров, созревших в присутствии пролактина i vi
3.2. Влияние гипофизарных гормонов на соматические клетки фолликула модель i vi.
3.2.1. Эффекты пролактина, соматотропина и инсулина на клетки гранулезы при их культивировании в бессывороточггой системе. .
3.2.2. Статус хроматина клеток кумулюса при их культивировании в средах, кондиционированных клетками гранулезы в присутствии пролактина и соматотропина
3.2.3. Функциональная активность клеток гранулезы коров в монослойной культуре под действием пролактина и соматотропина.
3.3. Влияние соматотропина и пролактина на мейотические преобразования хромосом в ооцитах коров i vi
3.4.Стероидогенез гранулезных клеток коров при их совместном культивировании с соматотропином, пролактином и инсулином .
ОБСУЖДЕНИЕ.
ВЫВОДЫ.
ПРЕДЛОЖЕНИЯ.
СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ


Анализ контролируемых параметров мейоза, выявил положительные эффекты соматотропина и пролактина в присутствии КГ на уровень дегенераций хромосом снижение и цитоплазматическое созревание яйцеклетки. Обнаруженное тормозящее влияние СТГ и ПРЛ на реинициацию мейоза ооцитов является обратимым, и не наблюдается при дальнейшем культивировании. Пролонгация дозревания предполагает возможность синхронизации ядерноцитоплазматического созревания ооцита, что обеспечивает в дальнейшем приобретение яйцеклеткой способности к дальнейшему развитию. При одновременном использовании клеток гранулезы 6 клмл и пролактина нгмл повышался процент выхода нормальных эмбрионов, преодолевших блок развития на стадиях 8 клеток. Результаты исследования позволяют предположить, что ПРЛ и СТГ влияют на продукцию КГ паракринно действующих факторов, участвующих в регуляции мейоза. С учетом данных исследований для увеличения выхода зрелых яйцеклеток и нормальных эмбрионов коров i vi предложена система дозревания ооцитов с использованием КГ 6 клмл, пролактина нгмл или соматотропина нгмл. Клетки гранулезы коров из антральных фолликулов диаметром мм опосредуют действие пролактина или соматотропина на завершение мейотического созревания яйцеклетки i vi. Культивирование ооцитов из антральных овариальных фолликулов в средах, кондиционированных клетками гранулезы в присутствии ПРЛ или СТГ, приводит к торможению ядерного созревания в начале культивирования, при этом снижается уровень содержания кальция во внутриклеточных депо созревших яйцеклеток маркер цитоплазматического созревания. Пролактин и соматотропин при культивировании ооцитов i vi оказывают влияние на статус хроматина соматических клеток, снижая долю клеток с дегеиерированным хроматином СТГ или, повышая число клеток с ядрами на стадии митоза ПРЛ. Введение в систему дозревания ооцитов коров клеток гранулезы из фолликулов мм в концентрации 6 клеток на мл среды совместно с пролактином нгмл способствует повышению выхода нормальных эмбрионов на завершающих стадиях доимлантационного развития. Апробация работы. Европейской ассоциации животноводства, Италия на ом международном конгрессе по биотехнологии в репродукции сх животных, Чехия, сентябрь Клеточное ядро Институт Цитологии РАИ, СанктПетербург, . Публикации. По материалам диссертации опубликовано нучных работ, в том числе 6 в журналах, входящих в Перечень ведущих рецензируемых научных журналов и изданий, рекомендованных ВАК Министерства образования и науки России. Объем и структура диссертации. Диссертация состоит из введения, обзора литературы, описания материалов и методов исследований, результатов исследований, их обсуждения, выводов, предложений, списка использованной при написании диссертации литературы, включающего 5 источников, в том числе 5 на иностранном языке. Диссертация изложена на 6 страницах, включает 7 таблиц, рисунка в том числе микрофотографий. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ 1. Фолликулогснез сложный, тонко регулируемый процесс, зависящий от баланса между локальными овариальными факторами роста и циркулирующими в крови животного гормонами, продолжающийся до момента истощения запаса примордиальных фолликулов в яичниках животных , , , 2, 3. К периоду репродуктивной зрелости в яичнике млекопитающих имеется пул примордиальных фолликулов, каждый из которых состоит из ооцита, блокированного на стадии профазы мейоза I, и одного слоя уплощенных клеток гранулезы. У одних видов приматы, жвачные такие фолликулы развиваются в эмбриональном периоде, а у других грызуны, кролики во время раннего неонатального периода. После формирования когорты примордиальных фолликулов они начинают постепенно и непрерывно покидать остающийся пул и расти. Природа сигналов, инициирующих рост, и механизмы, которые заставляют фолликул покинуть пул, до сих пор еще не окончательно выяснены 9,1, 6, 9. Анализ характера развития больших фолликулов у различных видов млекопитающих показал, что фолликулогенез происходит только во время особого репродуктивного состояния самки иили в течении определенного времени репродуктивного цикла. И, напротив, рост фолликулов до овуляторного размера не происходит во время ложной беременности или беременности до последних дней перед следующим эструсом.

Рекомендуемые диссертации данного раздела

28.06.2016

+ 100 бесплатных диссертаций

Дорогие друзья, в раздел "Бесплатные диссертации" добавлено 100 новых диссертаций. Желаем новых научных ...

15.02.2015

Добавлено 41611 диссертаций РГБ

В каталог сайта http://new-disser.ru добавлено новые диссертации РГБ 2013-2014 года. Желаем новых научных ...


Все новости

Время генерации: 0.548, запросов: 145