Влияние агробактериальной трансформации на активность триптофансинтазы растительных клеток

Влияние агробактериальной трансформации на активность триптофансинтазы растительных клеток

Автор: Кузнецова, Елена Владимировна

Шифр специальности: 03.00.12

Научная степень: Кандидатская

Год защиты: 2001

Место защиты: Иркутск

Количество страниц: 152 с.

Артикул: 326495

Автор: Кузнецова, Елена Владимировна

Стоимость: 250 руб.



В то время было установлено, что различия между индивидом и каждым видом наследуются, метаболические процессы осуществляю х я с помощью реакций, катализируемых ферментами, а каждая биохимическая реакция находится под контролем единственного гена. Различным изменениям, найденным в структуре ферментов, соответствовали генетические изменения. Объектом для изучения сходства между структурой гена и структурой белка послужила триитофансинтаза. Работая с триптофанзависимыми мутантами а, которые были неспособны расти на среде, несодержащей триптофан, Ч. Яновский выделил фермент в дальнейшем названный триптофансинтазой. В экстрактах был найден пиридоксальфосфатзависимый фермент, который превращал индол и серин в триптофан i, . Этот фермент отсутствовал у триптофанзависимых мутантов и синтез триптофана из индола и серина был блокирован i, . Фермент получил название триптофандесмолаза, которое впоследствии было изменено на триптофанеинтетаза Триптофанзависимые мутанты были неспособны использовать индол в качестве замены триптофана. В дальнейшем были исследованы триптофанзависимые мутаггы . Триптофансинтаза катализирует конечную реакцию биосинтеза триптофана. Это реакция рзамещения, при которой индол3глицерофосфат превращается в триптофан с участием ссрина. У бакгерий триптофансинтаза представляет собой Х2Р2 бифункциональный, мультиферментиый комплекс. Установлено, что реакции, катализируемые изолированными аир субъединицами только на эффективны эквивалентному количеству целого комплекса , , i, , . Активность комплекса примерно в 0 раз выше, нежели разобщенных субъединиц. Доказательство конформационной гибкости субъединиц позволило предположить, что конформационные изменения могут быть основаны на феномене взаимной активации. Полностью активный сайт комплекса триптофансинтазы формируется из двух расположенных рядом субъединиц. В механизме катализа реакций а и р, а также связывании серина и триптофана большую роль играет пиридоксаль5фосфат, связанный с рсубъединицей. Пиридоксаль5фосфат и серии вместе усиливают ассоциацию двух субъединиц. Пиридоксальфосфат фосфорный эфир альдегидной формы витамина В6, служит простетической группой ряда ферментов, катализирующих превращения аминокислот и аминов. Пиридоксальфосфат является одним из многосторонне действующих природных катализаторов, образуя с какойлибо аминокислотой реакционноспособное соединение. Полагают, что во всех случаях пиридоксальфосфат действует путем образования азометина основания Шиффа с аминогруппой аминокислоты. Образовавшийся продукт может подвергаться таутомеризации, судьба этого продукта зависит от природы белковой части фермента, к которой присоединяется пиридоксальфосфат, и от характера группы. В пиридоксальзависимых ферментах формальная группа ниридоксальфосфата формирует связь с Хаминогруппой специфического остатка лизина. У гришофансинтазы пиридоксальфосфат связан с рсубъединицей i, и формирует ковалентную связь шиффово основание с самино группой рсубъединицы. Повидимому, образование триптофана из индола и серина происходит путем образования сначала основания Шиффа между серином и аминоакриловой кислотой и последующим переносом аминоакриловой кислоты к третьему углероду индола. Остается не ясным вопрос, в каком виде находится индол в комплексе. Передает ли асубъединица свободный индол на субъединицу или происходит конденсация индол3глицерофосфата с основанием Шиффа аминоакрилата и дальнейшее альдольное расщепление. В ростовых экспериментах с наблюдали, что в присутствии ссрина клетки были нечувствительны к высоким концентрациям индола i , . Индол в свободном виде никогда не был найден как промежуточное соединение, поскольку является токсичным для клеток, а реакция считается физиологическим процессом i, , , . Триптофан менее токсичное соединение для бактериальных клеток, чем индол , . Структура комплекса триптофансинтазы, а. Струюура триптофансинтазы наиболее изучена у прокариотических организмов и предетавляет собой тетрамер, состоящий из двух неидентичных субъединиц , . Полная длина тетрамера приблизительно 0 А0. Субъединица i представляет собой единственную полипептидную цепь, состоящую из 7 аминокислотных остатков и имеющую молекулярную массу .

Рекомендуемые диссертации данного раздела

28.06.2016

+ 100 бесплатных диссертаций

Дорогие друзья, в раздел "Бесплатные диссертации" добавлено 100 новых диссертаций. Желаем новых научных ...

15.02.2015

Добавлено 41611 диссертаций РГБ

В каталог сайта http://new-disser.ru добавлено новые диссертации РГБ 2013-2014 года. Желаем новых научных ...


Все новости

Время генерации: 0.187, запросов: 145