Экспериментально-биохимическое исследование индукции нервной ткани и хрусталика

Экспериментально-биохимическое исследование индукции нервной ткани и хрусталика

Автор: Михайлов, Александр Трофимович

Шифр специальности: 03.00.11

Научная степень: Докторская

Год защиты: 1984

Место защиты: Москва

Количество страниц: 435 c. ил

Артикул: 4028876

Автор: Михайлов, Александр Трофимович

Стоимость: 250 руб.

ОГЛАВЛЕНИЕ
ВВЕДЕНИЕ.
Глава I. МОРФОГЕНЕТИЧЕСКИЕ ТКАНЕВЫЕ ВЗАИМОДЕЙСТВИЯ
1.1. Терминологическое определение морфогенетических тканевых взаимодействий.
1.2. Основные критерии морфогенетических тканевых взаимодействий.
1.3. Морфогенетические тканевые взаимодействия в развитии ЦНС. .
1.4. Морфогенетические тканевые взаимодействия в развитии хрусталика
Глава 2. МОРФОГЕНЫ МЕДИАТОРЫ МОРФОГЕНЕТИЧЕСКИХ
ТКАНЕВЫХ ВЗАИМОДЕЙСТВИЙ
2.1. Отношение к понятию морфоген.
2.2. Естественные морфогены.
2.3. Гетерогенные чужеродные морфогены
Глава 3. НШРАМЗУЩИЙ И ЛИНЗОИНДУЦИРУЩИЙ АГЕНТЫ
НАПРАВЛЕНИЕ И МЕТОДОЛОГИЯ ПОИСКА
3.1. Подходы к идентификации нейрализугощего и линзоиндуцирующего агентов.
3.2. Композиционное построение работы
3.3. Объекты, материал и методы исследования
3.3.1. Животные, получение зародышей, выделение тканей и органов
3.3.2. Органная культура i vi .
3.3.3. Биохимические методы
3.3.4. Иммунохимические методы.
Глава 4. ЭКТОДЕРМА РАННЕЙ ГАСТРУЛЫ I
КАК ТЕСТТКАНЬ ДЛЯ ИДЕНТИФИКАЦИИ НЕЙРАЛИЗУЮЩЕГО И ЛИНИНДУЦИРУЩЕГ0 АГЕНТОВ
4.1. Культивирование эктодермы гаструлн .
i i vi без воздействий.
4.2. Культивирование эктодермы ранней гаструлы
. i i vi в присутствии циклических нуклеотидов или чужеродных
белков
4.3. Сравнительный анализ белков эктодермы ранней гаструлы и нейрального зачатка
4.3.1. Изо электрофокусирование ИЭФ.
4.3.2. электрофорез ЭФ.
4.3.3. Иммунохимический анализ
Глава 5. ИДЕНТИФИКАЦИЯ МОРФОГЕНЕГИЧЕСКИАКТИВНЫХ ЭКСТРАКТОВ ИЗ СЕТЧАТКИ И ГОЛОВНОГО МОЗГА КУРИНЫХ ЗАРОДЫШЕЙ.
5.1. Критерии идентификации индуцированных структур и условия биотестирования экстрактов
5.2. Идентификация экстрактов с высокой морфогенетической активностью
Глава 6. ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНОБИОХИМИЧЕСКИЙ АНАЛИЗ М0РФ0ГЕНЕТИЧЕСКИАКТИВНЫХ ЭКСТРАКТОВ ИЗ СЕТЧАТКИ И МОЗГА КУРИНЫХ ЗАРОДЫШЕЙ.
6.1. Природа агентов, определяющих морфогенетическую активность экстрактов из сетчатки и мозга куриных зародышей.
6.1.1. Определение доз ферментов и условий гидролиза.
6.1.2. Влияние ферментативной обработки на индуцирующую активность экстрактов.
6.2. Влияние ультрацентрифугирования на морфогенетическую активность экстрактов из сетчатки и мозга куриных зародышей
6.3. Сравнительный биохимический анализ экстрактов из сетчатки и мозга куриных зародышей.
6.4. Фракционирование экстрактов из сетчатки и мозга куриных зародышей и оценка морфогенетической активности фракций
Глава 7. ЭКСПЕРИМШАЛЬНОБИОХИМИЧЕСКИЕ ПОДХОДЫ К ИДЕНТИФИКАЦИЙ МОРФОГЕНЕТИЧЕСКОЙ АКТИВНОСТИ ГЛАЗНЫХ ПУЗЫРЕЙ КУРИНЫХ ЗАРОДЫШЕЙ
7.1. Культивирование глазных пузырей куриных зародышей с эктодермой ранней гаструлы i i vi .
7.2. Электрофоретическое исследование белков глазных зачатков и сетчатки у ранних зародышей кур
7.3. Определение морфогенетической активности электрофоретических фракций из глазных пузырей зародышей кур
Глава 8. ИММУНОХИМИЧЕСКИЙ АНАЛИЗ РЕАЛИЗАЦИИ ИНДУКЦИИ
ХРУСТАЛИКА И ЗАЧАТКА ЦНС В РАЗВИТИИ АМФИБИЙ.
8.1. Анализ появления кристаллинов после индукции
хрусталика i viv и i vi .
8.I.I. Электрофоретическая и иммунохимияеская характеристика кристаллинов взрослых амфибий
8.1.2. Иммунохимическая идентификация кристаллинов в хрусталике зародышей и в эксплантатах.
8.2. Иммунохимический анализ антигенов эктодермы гаструлы и нервной пластинки в развитии амфибий.
Глава 9. ЗАКЛЮЧЕНИЕ ИТОГИ И ПЕРСПЕКТИВЫ
9.1. Ткани для тестирования нейрализующей и линзоиндуцирувдей активности.
9.2. Идентификация и свойства нейрализующего и линзоиндуцирующего агентов
9.3. Соотношение процессов индукции и дифференцировки хрусталика и ЦНС в эмбриональном развитии.
ВЫВОДЫ
ЛИТЕРАТУРА


Применение электронной микроскопии,гистохимических методов и воздействий. Первые попытки реализовать эти подходы к анализу нейральной индукции связаны с именами Мангольда . Гольтфретера , . Однако наиболее демонстративные и доказательные результаты были получены много позднее, когда в экспериментальную эмбриологию вошли прецизионные методы органных культур, иммунохимия, электронная микроскопия и т. Обширная серия работ была выполнена методами гистохимии и электронной микроскопии в сочетании с трансфильровыми экспериментами i vi . При этом использовались фильтры с определенной и равномерной по всему фильтру структурой и со стандартным размером пор. Обнаружено, что с началом гаструляции в пространстве между клетками эктодермы и мезодермы появляется большое число рибосом, зачастую образующих скопления с псевдокристаллической структурой. Рибосомные гранулы обнаруживаются до начала нейруляции, затем их число резко снижается. Вместо них начинает обнаруживаться сеть фибрилл, содержащих глюкозамингликаны i, , . Микроинъекции ферментов рибонуклеаза, коллагеназа, гиалуронидаза приводили к разрушению и исчезновению фибрилл, однако нарушения или замедления процесса нейральной индукции при этом не отмечалось i, , , . Таким образом, можно заключить, что экстрацеллюлярные структуры, располагающиеся в зоне контакта эктодермы и хордомезодермы, не играют существенной роли в индукции нервной системы см. Этому заключению соответствуют и данные трансфильтровых экспериментов. Иуз. То1чопеп а1. Однако, если удлинить время трансфильрового контакта между тканями до часов, то в порах фильтров обнаруживался гранулярный материал и клеточные отростки. При этом в эксплантатах развивались заднеголовные структуры. Эти данные позволяют предположить, что первый этап в нейральной индукции обеспечивается за счет диффузии соответствующих индуцирующих агентов, в то время как для регионализации ЦНС необходим, повидимому, более тесный контакт нейрализованной эктодермы с мезодермой То1уопеп е1 а1. То1лгопеп, . Тойвонен предпринял экспериментальноэмбриологическую попытку определить в первом приближений размеры молекул, переходящих от мезодермы к эктодерме. С этой целью он разделил ткани диализной мембраной с порами, пропускающими молекулы ООО Б и менее. В этих опытах он наблюдал более или менее выраженный нейрализующий эффект около случаев индукции переднего мозга. Однако, в контроле эктодерма гаструлы диализная мембрана . Тоопеп, . Довидимому, результаты Тойвонена следует рассматривать только как ориентировочные. Другие методические подходы использование радиоактивных изотопов см. КиивЛ, , иммунохимические исследования Уа1п1о е а1. Саксен, Тойвонен, Беисйаг, Иейеташг, , , , Бахп, , более или менее оправдали себя. Процесс нейральной индукции у зародышей амфибий . К облучению ультрафиолетом ii . Правда, не исключено, что это связано с повреждающим действием ультрафиолета на клеткипредшественники дорзальной губы бластопора , , ii, , i, . Нейральная индукция относится к наиболее изученным морфогенетическим взаимодействиям в развитии позвоночных. Тем не менее, представленные выше данные указывают на неполноту наших знаний об этих процессах. Хорошо документированными можно считать следующие положения. I. Образование нервной ткани как в нормальном развитии, так и в эксперименте, зависит от индуцирующих влияний хордомезодермы дорзальная губа бластопора. Реализация нейральной индукции не требует непосредственного контакта клеток экто и мезодермы и обеспечивается веществами, способными к диффузии в экстрацеллюлярном пространстве. Процессы нейрализации эктодермы и регионализации зачатка ЦНС качественно различные индукционные процессы. Последнее существенно для корректной оценки действия различных индукторов на эктодерму. Использование чужеродных нейрализующих агентов позволяет достаточно точно имитировать моделировать индукционные процессы, имеющие место у зародышей. Как будет показано далее, именно этот подход позволил сделать первые шаги в анализе молекулярнохимических механизмов нейральной индукции см.

Рекомендуемые диссертации данного раздела

28.06.2016

+ 100 бесплатных диссертаций

Дорогие друзья, в раздел "Бесплатные диссертации" добавлено 100 новых диссертаций. Желаем новых научных ...

15.02.2015

Добавлено 41611 диссертаций РГБ

В каталог сайта http://new-disser.ru добавлено новые диссертации РГБ 2013-2014 года. Желаем новых научных ...


Все новости

Время генерации: 0.192, запросов: 145